耐药细胞株是如何构建的？

目前已知的体外建立耐药细胞株的方法主要有以下几种：大剂量药物冲击法、药物浓度递增法、药物浓度递增与大剂量药物冲击相结合法、转基因结合药物筛选法。其中药物浓度递增法和大剂量药物冲击法成为临床建立肿瘤细胞化疗耐药模型的常用方法。①药物浓度递增法是指最初使用低浓度的药物刺激细胞，等待细胞适应低浓度的环境之后，再略微提高药物浓度，继续等待细胞适应目前的环境，经过反复的培养和加压，最终使细胞可以在高浓度的药物环境下生存②大剂量药物冲击法是在细胞培养时加入超高药物浓度的药物，但是孵育的时...

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如何养出“漂亮“的悬浮细胞？

实验室培养的细胞种类可以大致分为贴壁细胞和悬浮细胞两种，只有极少数类型细胞同时存在两种状态。悬浮细胞是指不需要依赖支持物，可在培养基中以悬浮状态生长的一类细胞，如淋巴细胞和大部分血液系统来源细胞。（如小鼠白血病细胞WEHI-3,人白血病细胞K-562,HL-60）。工业上也有越来越多的贴壁传代细胞被驯化出来，进行全悬浮的培养。目前在工业中应用的主要有SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293细胞等，它们主要用于重组蛋白质生产；在兽用生物制品中常用的传代细胞主要有采用全悬...

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什么是细胞支原体污染？怎么办？

支原体污染一直是细胞培养的“头号敌人”，但是支原体的存在却十分普遍，它的“不请自来”总是让我们措手不及。世界上有近60%的实验室正在遭受支原体污染的困扰，今天就让我们来好好认识这个“刺头”吧！什么是支原体？支原体结构简单，具有高度多形性、无细胞壁、增殖缓慢、可在人工培养基中存活并增殖的特点。除此之外，它的“个头”很小，只有0.1-0.3um，可通过一般的滤菌器。支原体主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成丝状后断裂呈球杆状颗粒。大部分支原体繁殖速度比细菌慢，适宜生...

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炎炎夏日，细胞又污染了怎么办？

一、单细菌污染?1.检查操作人员的无菌操作技术；2.检查相关培养基与试剂是否为操作者个人专用；3.检查操作者的清洁情况：（a）培养操作前后是否洗手；（b）是否更换实验服；（c）是否扎好头发；4、进行细胞培养时是否严格按照无菌要求佩戴实验服具（包括实验服、口罩、防尘帽、手套等）；5、若污染反复出现，问题往往出自使用试剂，需立即进行检查。二、支原体污染怎么办?1、与其他操作者一起检查支原体污染，确认筛选步骤是否具有可操作性；2、确认使用的血清是否为严格过滤，确保其质量；3、外来细...

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如何构建体外耐药细胞

近年来，恶性肿瘤（癌症）已经成为严重威胁中国人群健康的主要公共卫生问题之一。为什么癌症容易复发，很难治愈呢？因为绝大部分抗肿瘤药物，最终都逃不过肿瘤细胞产生耐药性的命运，导致癌症继续发展。对于肿瘤细胞耐药的产生原因仍然处在研究之中，如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药依然是目前研究的热点和难点。什么是耐药性？化疗是治疗恶性肿瘤的方法中有效的手段之一，指用化学药物的方法杀死肿瘤细胞。常用的药物包括细胞增殖的抑制剂、DNA损伤修复途径的抑制剂，如阿霉素（adriamycin）、紫杉醇（...

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WinSera胎牛血清搞活动了

8月1日至9月30日，WinSera优等胎牛血清的优惠来袭，一次性购买多瓶有好礼相送，欢迎大家选购。活动详情请联系千舍销售~~胎牛血清的常见问题Q血清应该如何保存，可以存放多久？A:血清可长期储存于-20℃冰箱中。倘若把血清存放在4℃冰箱，请不要超过一个月。如果一次性无法用完一瓶血清，建议将血清无菌条件下分装并储存于-20℃，避免反复冻融。Q如何正确地解冻血清？A:采用逐步解冻法，将血清从-20℃冰箱转入4℃冰箱融解，随后分装。切忌直接将血清从-20℃冰箱转移至室温解冻，这样...

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血清保存方法和冻融方法

血清保存方法1.如何保存血清？血清应该在-20℃保存。如果一次无法用完一瓶，应该无菌分装后冷冻保存。注意避免反复冻融。2.为什么储存在冰箱中的血清会出现沉淀？有些胎牛血清产品没有预老化，储存在2－8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等）可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在－20℃储存胎牛血清，避免反复冻融。冻融方法正确解冻方法：将血清首先置于冰箱2-8℃中12-24小时，使之缓慢部分溶解，然后再放在室温下使之全溶。注...

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胎牛血清与新生牛血清、小牛血清区别

胎牛血清与新生牛血清、小牛血清区别1.血清类别牛血清类别胎龄胎牛血清（FBS)胎儿(母牛怀孕3-8个月)新生牛血清(NCS)出生10日内小牛血清（BCS）16-22周供体血清成年牛2.采血方式不同胎牛血清：母牛怀孕3-8个月时，采用剖腹心脏密闭穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供体牛血清：分别是取自新生牛（小牛）、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少；促细胞生长因子、促帖附因子、激素及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清4....

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