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千舍--荧光标记的选择指南
更新时间:2022-08-18 点击量:565


对于流式检测最初的一步就是选择何种方法,通常是何种荧光物质标记的抗体。厂家根据需要开发了各种荧光标记的抗体,进行选择时首先要满足的就是所选择的抗体必须在流式上能够检测,各单位买的流式仪功能不*一致,首先要和检测方进行联系,看能否检测。在附表里我将常用的荧光标记物质的激发波长和检测波长给出,可以参考。有几个原则一起说一下:

1、流式检测时*荧光物质直接标记的抗体,如果没有直接标记的抗体,用间接发,即二抗上标记荧光分子同样可以。不过这增加了处理的难度,处理步骤增多,往往会不同程度影响检测结果。

2、厂家推出的抗体有一些明确写明适合流式检测,而另一些则表明适合免疫组化、western等,选择前者,可以保质保量,但是后者并不是不可以用,一般来说如果没有明确的表明适合流式检测的抗体,采用后者也是可以的,不过要注意其检测结果不一定非常理想。

3、单抗和多抗均可应用。

4、绿色荧光蛋白等本身有荧光的物质在检测时会占据一个荧光通道,我也曾碰到几次有人将转了绿色荧光蛋白的细胞再采用FITC标记的抗体来检测目的蛋白(据说还有人用此方法得出了满意的结果!),岂不知绿色荧光蛋白和FITC是一个荧光通道,更本不能一起检测。

5、如果是检测淋巴细胞这类细胞,经常用到多种抗体同时标记,选择时切勿选错。我自己比较倾向于多重标记,因为这样可以减少抗体和细胞用量,特别是对于小鼠的血标本,经常采到的血量微少,采用多重标记更有利。当然这要求流式操作者有较高的水平,注意调节流式仪的各种参数。

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人永生化表皮细胞荧光素酶标记 HACAT+LUC

人非小细胞肺癌细胞荧光素酶标记 HCC827+LUC

人结肠癌细胞荧光素酶标记 HCT116+LUC

人宫颈癌细胞荧光素酶标记 HELA+LUC  

人胃癌细胞黄色荧光标记 HGC-27+YFP

人结直肠癌细胞荧光素酶标记 LOVO+LUC

人乳腺癌细胞荧光素酶标记 MCF-7+luc

人乳腺癌细胞荧光素酶标记 MDA-MB-231+LUC

人高转移性肝癌细胞荧光素酶标记 MHCC-97H+luc

人胃癌细胞荧光素酶标记 NCI-N87+LUC

人皮肤黑色素瘤细胞荧光素酶标记 SK-MEL-2+LUC

人卵巢癌细胞荧光素酶标记 SK-OV-3+LUC

人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞荧光素酶标记 U251 MG/TMZ+LUC(3000)

人乳腺癌细胞荧光素酶标记 ZR-75-1+luc

小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记 4T1+luc

小鼠黑色素瘤细胞荧光素酶标记 B16-F10+LUC

小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 CT26+LUC

小鼠胶质细胞瘤荧光素酶标记 GL-261+luc

小鼠肝癌细胞荧光素酶标记 HEPA1-6+LUC

小鼠卵巢上皮癌细胞荧光素酶标记 ID8+LUC

小鼠骨肉瘤成骨细胞荧光素酶标记 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC

小鼠肺癌细胞荧光素酶标记 LLC+LUC

小鼠结肠癌细胞荧光素酶标记 MC38+LUC

小鼠脑神经瘤细胞荧光素酶标记 neuro-2a+luc

小鼠胰腺癌细胞荧光素酶标记 panc02+LUC

小鼠前列腺癌细胞荧光素酶标记 RM-1+LUC

大鼠脑胶质瘤细胞绿色荧光标记 C6+LUC