27个细胞传代培养常见问题汇总

1、一般拿到细胞后，应该注意什么?收到细胞先不开盖,用酒精将整个细胞瓶外壁进行消毒，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各两张)，排除细胞本身污染的情况。2、何时须更换培养基?视细胞生长密度而定，常规细胞2-3天更换培养基。3、细胞何时进行传代较好?一般情况下细胞生长至*汇合后就应该传代，所有细胞生长都有一个要求不宜...

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如何确认细胞交叉污染

交叉污染虽不如微生物污染普遍，但与HELA细胞及其他生长迅速的细胞系间广泛的交叉污染是个明确的问题，会造成严重后果。从声誉好的细胞库获取细胞系、定期检查细胞系性质及采用良好的无菌技术有助于避免交叉污染。通过DNA指纹图谱、核型分析和同位素分析可确认有无交叉污染。血清与培养基通常血清的添加比例为10%，当然也可根据细胞状态和生长速率适当增加或减少添加比例。在更换血清品牌或者批次时，最好需对血清的品质进行验证，防止对实验造成影响。对于培养基，目前商品化的比较成熟，稳定性也较好。如...

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WinSera胎牛血清的储存和融化方法~

储存条件：-20°C冻存。胎牛血清一次解冻后，应按单次习惯用量分装，分装后的血清仍-20°C冻存。若置于4°C的血清，应在一周内用完。为保证细胞培养的最佳效果，血清和培养基的配置，应遵循“现用现配”原则。配好的培养液，应于一周内用完。血清避免反复冻融，避免在4°C或更高温度储存过久，否则会破坏血清中有效活性成分，影响血清品质。血清融化专业方法：目的;更好保留血清中活性成分，使细胞培养更稳定。推荐血清厂家专业融化方法（此方法国际通用，适用于所有种类的血清）：操作温度100ml5...

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细胞培养常见问题大集合~

01、复苏细胞的正确打开方式?复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。解冻后的细胞可以直接接种到含有*培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜*培养液替换旧培养液，以去除DMSO。如果细胞对冷冻保护剂特别敏感，解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含*生长培养液的培养瓶中。注：操作时戴好手套，防止冻伤;带上防护眼镜可以防止液氮罐...

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细胞培养常见问题及其解决办法

细胞培养常见问题及其解决办法1.如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。2.何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。3.可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法...

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外泌体样本收集

外泌体是由细胞分泌的纳米级膜性小囊泡，直径约30~150nm。外泌体来源多样，广泛存在并分布于各种生物液体中，富含来源细胞的蛋白质、脂质和核酸，参与细胞间的信息交流。不同病理和生理条件下，外泌体的内容物不尽相同，因此外泌体可以很好地反映生物体的疾病与健康状态。此外，外泌体特殊的膜结构能够保护其内容物如RNA（microRNA、mRNA、lncRNA、circRNA）免受酶的降解，保证其能在各类体液中被稳定检测到，因此外泌体是研究各种疾病的良好生物学材料，可作为肿瘤潜在的bio...

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国产WINSERA胎牛血清是你明智选择

国产WINSERA胎牛血清是你明智选择选择胎牛血清的标准血源可追溯性选择来源安全、可追溯的FBS对于细胞培养来说至关重要。目前市面上存在较多以假乱真的FBS产品，科研工作者对血清的真实产地、来源难以鉴别。对此，国际血清行业协会（ISIA）实施了供应链可追溯性的行业标准，以确保FBS的质量和安全性。例如，FBS供应商是否保留原产地的可追溯记录？是否持有血清生产各阶段处理、运输和商业交易的文件？这些都是判断FBS可追溯性需要考虑的因素。产品检测每款FBS在生产上市之前，必须经过严...

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细胞培养常见问题及其解决

细胞培养常见问题及其解决1.如何选用特殊细胞系培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。2.何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。3.可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立...

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