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动物血清的定义以及分类
更新时间:2023-09-26 点击量:881

动物血清的定义:

血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后,分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。血清的主要作用是提供基本营养物质,包括激素、维生素、转运蛋白、微量元素、扩散因子和生长因子等细胞增殖和维持的必需成分,促进细胞生长。

动物血清的分类:

1、按来源动物分

常见的血清供体动物,主要有牛、马、猪、兔、鸡等。

2、按照牛的年龄分

市场上常见的牛血清,根据采血时间不同和血清采制方法分为:又可以分为胎牛、新生牛、小牛血清和成年牛血清:胎牛血清(Foetal Bovine Serum,简称FBS):5-8月未出生胎牛,人工引产胎牛心脏穿刺取血;新生牛血清(Newborn Calf Serum,简称NBCS):出生14小时内未进食的新生牛,通常采用颈动脉采集血液分离得到的血清;小牛血清(Calf Serum):出生后1-12月龄小牛动脉采血分离血清;成年牛血清(Adult Bovine Serum,简称ABS):一岁以上成年牛,屠宰时收集全血后分离得到血清。

 

以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。其中胎牛由于还未接触外界,血液中所含抗体、补体等对细胞生长有害的成分最少,血清的质量高。根据血清质量从优到次排序依次为,胎牛>新生牛>小牛>成年牛。所以目前多数科研人员选择胎牛血清进行细胞培养。

3、按照采集地点分

根据血源采集地不同,大致又可以分为澳洲、北美、南美及中国四大类。

 

从血源质量、加工工艺、质控上区分,从优到次排序依次是澳洲>北美>南美>国产。特别是生产过程中,澳洲和北美大多采用静置分层工艺,对红细胞破坏小,血清中的血红蛋白和胆红素较少,颜色呈透明的淡黄色;而南美则大多采用离心收集工艺,红细胞破坏较多,血清中血红蛋白和胆红素较多,颜色偏红。

根据不同品质分:

区分胎牛血清很重要的一点就是血清的内毒素含量,内毒素含量越低的血清,级别就越高,以胎牛血清为例:当血清中内毒素含量≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;当血清中内毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;当血清中内毒素含量≥ 25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;目前,由于同一厂家,不同批次的血清,内毒素数值也可能有较大差异,因此很多血清厂家在名称上已不注明级别。但使用者仍可通过检测报告进行甄别。

根据不同处理分:

透析胎牛血清:透析过滤去除10kD以下小分子(如次黄嘌呤和胸腺核苷),避免外源小分子对细胞产生干扰。适合脉冲示踪实验(例如同位素标记特定小分子加入到培养体系中,以研究细胞代谢),也适合转染CHO后的筛选等应用。去外泌体血清:通过超速离心法去除绝大部分外泌体的血清,适用于外泌体相关细胞实验研究。超低lgG的血清:使用亲和层析等工艺,去除IgG,使其水平低于标准值,适用于抗体、病毒和病毒反应以及细胞表面抗原表位相关研究。活性炭/葡聚糖处理的血清:可降低血清中类固醇激素的浓度,例如雌二醇、孕酮、皮质醇、睾酮、T3 和 T4。适用于相关激素研究的实验。

其他动物源血清:

马血清:一般分为两种:第一种马血清含有的大分子蛋白比较多,适用于蛋白封闭;第二种马血清为细胞培养级别。经过多次过滤,去除大多数大分子蛋白,但保留了血清中促细胞生长的活性因子,适用于细胞培养,例如神经细胞培养时,培养基中需要添加马血清。猪血清:常用于猪肺炎支原体疫苗的生产。在对细胞和活疫苗进行支原体检验中,《兽药典》明确推荐猪血清作为支原体检验用液体培养基的组成成分。兔血清:兔血清通常从六个月或更小的动物身上收集,可用于免疫细胞化学和免疫组织化学中的封闭血清。羊血清:多用做封闭液,也有一些研究人员发现,优质的羊血清可用于某些细胞的培养。鸡血清:从屠宰供人类食用的健康鸡中收集的。有研究用于血清维生素 B12 的放射性同位素稀释测定。