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更新时间:2023-12-21
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人脐静脉细胞融合细胞EA.hy926
苏州千舍生物,细胞培养试剂,常备国内外品牌血清/胎牛血清,拥有完善的细胞库管理体系,供应上万种类细胞株细胞系,公司细胞技术60%为硕士和博士学历,其中明星产品有:DC2.4细胞、RAW264.7细胞、COV434细胞、HO-8910细胞、A2780细胞、SK-OV-3细胞、OVCAR-3细胞、OVCA433细胞、HEK-293-6e细胞、FRO细胞、HEPG2.2.15细胞、HL-7702细胞、L-02细胞、M-ICC12细胞、143B细胞、HOS细胞、M4e细胞、M2e细胞、TU686细胞、TU212细胞、vero细胞、SW48细胞、SW480细胞、NCCIT细胞、B16-F10细胞、HK-1细胞、Hep2细胞、C666-1细胞、HNE1细胞、HNE1/DDP细胞、capan-1细胞、vero e6细胞、A375细胞、Hs294T细胞、HSC-LX-2细胞、LOVO细胞、MKN-28细胞、RL952细胞、Hela细胞、A549细胞、Ishikawa细胞、EBC-1细胞、H1993细胞、H1993细胞、Hep-2细胞、NCI-H441细胞、LS174T细胞、NCCIT细胞、capan-1细胞、Hep3B细胞、HUVEC细胞、SW116细胞等。
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人脐静脉细胞融合细胞EA.hy926几种常用细胞培养基产品
⒈ BME(basal medium eagle)基础培养基
⒉ MEM
⒊ DMEM
⒋ IMDM
⒌ RPMI-1640
⒍ M199
⒎ Mccoy's 5A
⒏ F10 F12 DMEM混合F12(三)几种常用细胞培养配套试剂的配置(缓冲液、平衡盐溶液等)
五、细胞传代培养(消化法)
具体操作:
(一)传代前准备
1.预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
2.用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3.正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。
4.点燃酒精灯:注意火焰不能太小。
5.准备好将要使用的消毒后的空培养瓶,放入微波炉内高火,8分钟再次消毒。???
6.取出预热好的培养用液:取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7.从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭
显微镜
的台面,再在镜下观察细胞。
8.打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
(二)胰蛋白酶消化
1.加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度。
3.吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。
(三)吹打分散细胞
1.吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
2.吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中。
3.平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟。
4.弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
(四)分装稀释细胞
1.分装:将细胞悬液吸出分装至2-3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖。
2.显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记。
(五)继续培养
用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+,占50%为++,占75%时为+++。
传代细胞培养注意事项:
1.严格的无菌操作
2.适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。
附:EDTA(0.02%乙二胺四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g, KCl 0.20g, KH2PO4 0.02g, 葡萄糖 2.00g,0.5%酚红4ml,加入蒸馏水定容至1000ml。10磅20min高压灭菌,使用时调节PH值到7.4。注意EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要*清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。
六、细胞的复苏
细胞复苏的原则--快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。
人乳腺癌细胞+LUC细胞,MCF-7+Luc人结直肠腺癌细胞 COLO320
人结直肠腺癌细胞 COLO320 DM
人结直肠腺癌细胞 COLO320 HSR
人结肠癌细胞 CW-2
结肠癌细胞 cx-1
人肝癌细胞 hepg2.2.15
人肝癌细胞 Hep3B2.1-7 [Hep3B]
人肝癌细胞 HEPG2
人肝癌细胞人肝癌(HBV) HEPG2.2.15
人 SV40 转染成骨细胞 HFOB1.19
人胃癌细胞 HGC-27
人肾皮质近曲小管上皮细胞 HK-2
人肾上皮细胞 HKb-20
人早幼粒白血病细胞 HL 60(hl-60)
人肝细胞 HL-7702[L-02]
人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM
人骨肉瘤细胞 HOS
人胰腺癌细胞 HPAC
人胎盘细胞(有限细胞系) Hs 815.Pl
人乳腺癌细胞 HS578T
人脑胶质瘤细胞 HS683
人真皮成纤维细胞(原代细胞永生化) HSF(SV40)
人纤维肉瘤细胞 HT-1080
人膀胱癌细胞 HT-1376
人结肠癌细胞 HT-29 (HT29)
人眼小梁网细胞 HTMC
人胰腺导管细胞 HPNE
人肝癌细胞 huh-7
人肝癌细胞 huh-7.5.1
人T淋巴细胞白血病细胞 HUT-78
人十二脂肠腺癌 HUTU-80
人脐静脉内皮细胞(原代细胞永生化) HUVEC
人脐静脉内皮细胞 HUV-EC-C
人脐静脉内皮细胞 HUVEC-RFP
人脐静脉内皮细胞 HUVEC-GFP
人诱导多能干细胞 iPS
人子宫内膜癌细胞 Ishikawa
人正常卵巢上皮细胞系 IOSE-80(IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN)
人胚肺成纤维细胞 IMR-90
人急性T细胞白血病细胞 J.gamma1
人膀胱移行细胞癌 J82
人胎盘绒毛癌细胞 JAR
人胰腺癌细胞 JF-305
人绒毛膜癌细胞 JEG-3
人T淋巴细胞白血病细胞 Jurkat(clone E6-1)
人慢性骨髓性白血病细胞系 K562
人K562耐阿霉素细胞株 K562/ADR
人口腔表皮癌细胞 KB
人脑胶质细胞瘤细胞 KNS-89
人外周血嗜碱性白血病细胞 KU812
人食道癌细胞 kyse30
人胶质瘤细胞 LN229
人前列腺癌细胞 LNCaP clone FGC
人结直肠癌细胞 lovo
人结直肠腺癌细胞 LS174T
人结直肠癌细胞 LS513
人肝星形细胞 LX-2
人乳腺上皮细胞 MCF-10A
人乳腺癌细胞 MCF-7
人乳腺癌阿霉素耐药细胞 MCF-7/Adr
人乳腺癌细胞荧光素酶标记 MCF-7+luc
人乳腺细胞 MDA-KB2
人乳腺癌细胞 MDA-MB-231
人乳腺癌细胞 MDA-MB-231-LUC
人乳腺癌细胞 MDA-MB-361
人黑素瘤细胞 MDA-MB-435S
人乳腺癌细胞 MDA-MB-436
人乳腺癌细胞 MDA-MB-453
人乳腺癌细胞 MDA-MB-468
人膜间皮细胞 MET-5A
人骨肉瘤细胞 MG63
人胃癌细胞 MGC-803
人高转移性肝癌细胞 MHCC-97H
人高转移性肝癌细胞 MHCC-97L
人胰腺癌细胞 MIA-PACA-2
人急性淋巴母细胞白血病细胞 MOLT-4
人胚肺成纤维细胞 MRC-5(有限细胞系)
人急性淋巴母细胞白血病细胞 MT-4
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