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细胞培养中的哪些专业词儿(传代细胞,细胞系....)
发布时间:2022-07-14 点击量:630

在进行细胞培养时,我们经常会听到一些专业名词,原代培养是什么?什么是世代数?细胞系是什么?有限细胞系又代表的是什么?有的专有名词搞不清楚的话,会对细胞培养过程也会有一定的影响。根据老师们的反馈,我们总结了以下容易混淆的概念供大家参考~

 

1原代培养(Primary culture)

 

开始于直接取自生物体的细胞、组织或器官的培养称为原代培养。通常代表异质细胞群,很难标准化和繁殖。它们的寿命一般有限,而且已知它们会随着时间而改变其差异特征。

 

2传代(Passage(Subculture))

 

细胞从一个皿里转移或传代到另一皿里的过程称为细胞传代。这是一个操作行为,无法准确定义细胞分裂次数。

 

3传代次数(Passage number)

 

一种细胞被传代培养的次数称为传代次数。

 

 

4世代数(Generation number)

 

一种细胞所经历的细胞数量倍增次数称为世代数。

 

5群体倍增时间(Population doubling time)

 

在对数生长期中期细胞数量翻倍所需要的时间间隔称为群体倍增时间。

 

 

6群体倍增次数(Population doubling)

 

在培养过程中细胞所经历的细胞数量倍增次数称为群体倍增次数。

 

 

7细胞系(Cell line)

 

原代细胞经过第一次传代后增殖的细胞称为细胞系或亚克隆。随着细胞的传代,生长能力*强的细胞会占据优势,最终导致细胞群体在基因型和表现型上达到一定程度的均一性。

 

8细胞株(Cell strain)

 

细胞系通过选择或克隆获得的具有特征的细胞系称为细胞株。与亲代细胞系起始时相比,细胞株往往会获得其他一些遗传学改变。

 

9有限细胞系(Finite cell line)

 

通过传代增殖但在体外只能增殖有限细胞数量的一种细胞称为有限细胞系(通常60-70倍增次数)。

 

10衰老(Senescence)

 

与染色体端粒缩短相联系的生物调控的增殖潜力损失称为细胞衰老。存活的细胞也可能保留一些功能活性。

 

11永生化(Immortalization)

 

获得无限的寿命,可能是细胞自发产生的,也可能是以转染引起的。

 

 

12无限细胞系(Infinite/immortal/strain)

 

具有无限增殖能力的细胞系或细胞株称为无限细胞系/连续细胞系。

 

13平板效率(Plating efficiency)

在传代培养中产生集落的细胞的百分比称为平板效率。如果每个集落都可以说是来自一个细胞,那么平板效率等同于克隆效率/集落形成效率。有时,平板效率被粗略地用来描述传代培养后存活的细胞数量,但这被更好地称为种子效率。

导致细胞污染的原因主要有以下几方面:

环境:水浴锅、培养箱水盘、细胞培养箱内壁、超净台、桌面及试剂瓶身、细胞房空气消毒。

操作:细胞复苏、传代、冻存等过程中也可带入污染。

试剂:血清、基础培养基、胰酶、辅助试剂、营养添加物等。

耗材:培养皿或培养瓶、枪头。

细胞本身:本身携带污染、细胞老化、分化等。

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如何进行污染源排查?

*血清:其他试剂保持不变,仅更换血清。

*基础培养基:其他试剂保持不变,仅更换基础培养基。

*PBS:其他试剂保持不变,仅更换PBS。

*胰酶:若细胞复苏的很好,一传代就污染,可以尝试其他试剂保持不变,更换消化用胰酶,看细胞状态。

细胞反复复苏都会出现污染,那可保持培养体系不变,培养其他类型且适用于此培养体系的细胞,观察是否有污染出现。整个营养体系:基础培养基、血清、营养添加物都可使用控制变量法进行排查。

*耗材

培养基及辅助试剂等条件不变,使用新耗材(培养皿或培养瓶、枪头)培养细胞,观察细胞是否有污染。

*细胞本身

细胞本身携带污染源。可对细胞进行无菌检测(细菌、真菌、支原体)。

细胞分化,细胞一旦分化,很难逆转,无法通过外界营养体系和生长条件的调整“*”。

*细胞老化:细胞一旦老化,是无法逆转的。

因此,大家需要学会观察细胞的形态并进行分析,可以按照这几点进行控制变量排查,如若确认是细胞本身问题,若细胞本身不是很昂贵,建议丢掉重新培养,若较珍贵,污染后可尝试根据污染种类选择合适的抗生素进行杀灭,分化和老化是没有办法补救的。

 

 

 

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