千舍--荧光标记的选择指南

对于流式检测最初的一步就是选择何种方法，通常是何种荧光物质标记的抗体。厂家根据需要开发了各种荧光标记的抗体，进行选择时首先要满足的就是所选择的抗体必须在流式上能够检测，各单位买的流式仪功能不*一致，首先要和检测方进行联系，看能否检测。在附表里我将常用的荧光标记物质的激发波长和检测波长给出，可以参考。有几个原则一起说一下：1、流式检测时*荧光物质直接标记的抗体，如果没有直接标记的抗体，用间接发，即二抗上标记荧光分子同样可以。不过这增加了处理的难度，处理步骤增多，往往会不同程度影...

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免疫荧光单标记和双标记的方法？及千舍热卖细胞？

免疫荧光单标记和双标记的方法1.免疫荧光单标记方法免疫荧光单标记是指只标记一种蛋白质分子，方法比较简单，只要按照染色步骤去做，通常不存在太多的问题。但要注意固定液的选择，固定液选择的合适与否，可能会直接影响染色结果。具体染色方法如下。1)所需材料与试剂(1)培养在盖玻片或玻璃培养皿中融合程度达到60％一70％的细胞。(2)一抗、FITC或TRITC标记的二抗。(3)4％多聚甲醛固定液或冷丙酮固定液(一20℃预冷20min)。(4)封闭液。(5)0．01mol／LPBS缓冲液。...

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耐药细胞株是如何构建的？

目前已知的体外建立耐药细胞株的方法主要有以下几种：大剂量药物冲击法、药物浓度递增法、药物浓度递增与大剂量药物冲击相结合法、转基因结合药物筛选法。其中药物浓度递增法和大剂量药物冲击法成为临床建立肿瘤细胞化疗耐药模型的常用方法。①药物浓度递增法是指最初使用低浓度的药物刺激细胞，等待细胞适应低浓度的环境之后，再略微提高药物浓度，继续等待细胞适应目前的环境，经过反复的培养和加压，最终使细胞可以在高浓度的药物环境下生存②大剂量药物冲击法是在细胞培养时加入超高药物浓度的药物，但是孵育的时...

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如何养出“漂亮“的悬浮细胞？

实验室培养的细胞种类可以大致分为贴壁细胞和悬浮细胞两种，只有极少数类型细胞同时存在两种状态。悬浮细胞是指不需要依赖支持物，可在培养基中以悬浮状态生长的一类细胞，如淋巴细胞和大部分血液系统来源细胞。（如小鼠白血病细胞WEHI-3,人白血病细胞K-562,HL-60）。工业上也有越来越多的贴壁传代细胞被驯化出来，进行全悬浮的培养。目前在工业中应用的主要有SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293细胞等，它们主要用于重组蛋白质生产；在兽用生物制品中常用的传代细胞主要有采用全悬...

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什么是细胞支原体污染？怎么办？

支原体污染一直是细胞培养的“头号敌人”，但是支原体的存在却十分普遍，它的“不请自来”总是让我们措手不及。世界上有近60%的实验室正在遭受支原体污染的困扰，今天就让我们来好好认识这个“刺头”吧！什么是支原体？支原体结构简单，具有高度多形性、无细胞壁、增殖缓慢、可在人工培养基中存活并增殖的特点。除此之外，它的“个头”很小，只有0.1-0.3um，可通过一般的滤菌器。支原体主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成丝状后断裂呈球杆状颗粒。大部分支原体繁殖速度比细菌慢，适宜生...

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炎炎夏日，细胞又污染了怎么办？

一、单细菌污染?1.检查操作人员的无菌操作技术；2.检查相关培养基与试剂是否为操作者个人专用；3.检查操作者的清洁情况：（a）培养操作前后是否洗手；（b）是否更换实验服；（c）是否扎好头发；4、进行细胞培养时是否严格按照无菌要求佩戴实验服具（包括实验服、口罩、防尘帽、手套等）；5、若污染反复出现，问题往往出自使用试剂，需立即进行检查。二、支原体污染怎么办?1、与其他操作者一起检查支原体污染，确认筛选步骤是否具有可操作性；2、确认使用的血清是否为严格过滤，确保其质量；3、外来细...

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如何构建体外耐药细胞

近年来，恶性肿瘤（癌症）已经成为严重威胁中国人群健康的主要公共卫生问题之一。为什么癌症容易复发，很难治愈呢？因为绝大部分抗肿瘤药物，最终都逃不过肿瘤细胞产生耐药性的命运，导致癌症继续发展。对于肿瘤细胞耐药的产生原因仍然处在研究之中，如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药依然是目前研究的热点和难点。什么是耐药性？化疗是治疗恶性肿瘤的方法中有效的手段之一，指用化学药物的方法杀死肿瘤细胞。常用的药物包括细胞增殖的抑制剂、DNA损伤修复途径的抑制剂，如阿霉素（adriamycin）、紫杉醇（...

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WinSera胎牛血清搞活动了

8月1日至9月30日，WinSera优等胎牛血清的优惠来袭，一次性购买多瓶有好礼相送，欢迎大家选购。活动详情请联系千舍销售~~胎牛血清的常见问题Q血清应该如何保存，可以存放多久？A:血清可长期储存于-20℃冰箱中。倘若把血清存放在4℃冰箱，请不要超过一个月。如果一次性无法用完一瓶血清，建议将血清无菌条件下分装并储存于-20℃，避免反复冻融。Q如何正确地解冻血清？A:采用逐步解冻法，将血清从-20℃冰箱转入4℃冰箱融解，随后分装。切忌直接将血清从-20℃冰箱转移至室温解冻，这样...

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