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胎牛血清应用广泛,符合质控标准是关键以国内灭活病毒疫苗的制造过程为例,主要是通过体外大规模培养特定的细胞株来繁殖病毒。目前,主流培养液仍然采用基础培养基加血清的方式,强调了对有效培养方法和一致材料的迫切需求。正规来源的胎牛血清不会额外添加其他不明成分,除了含有细胞所需的营养成分及辅助因子之外,还含有转移和结合蛋白,有缓冲pH和解毒的作用,因而常用于疫苗生产细胞的培养。对于牛血清的应用场景,目前国内遵循的质量标准是2020版《中华人民共和国药典》三部通则(3604新生牛血清检测...
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—胎牛血清有必要热灭活吗—01目的血清的灭活就是将血清置于56℃作用30min,然后将它们分装储存于-20℃。热灭活的目的是为了去除血清中的补体等对热敏感的物质,以排除对免疫分析的影响。胎牛血清中对补体的灭活则明显没有必要。研究人员曾对商业胎牛血清中的补体成分进行测定,他们发现胎牛血清中含有的C1、C6仅达成年动物血清的1-3%,而其它补体成分仅有成年动物的5-50%,至于补体的主要成分C3在胎牛血清中则几乎不能检出。通过补体固定实验,我们也在多个不同批次的胎牛血清中获得了相...
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血清的供应量改变带来的价格波动由于中国海关总署对供应企业和允许进口的血源地做出了明确规定,胎牛血清的价格便与这些血源产地的供应量息息相关。胎牛血清是一种天然产物,产地牛源的健康状况和生长环境尤为重要,当牛源产地气候变化时,会极大的影响胎牛血清的产量。例如2018年澳洲地区发生干旱,导致农场主不得不屠宰超量的牛以避免损失,这种情况间接导致当年澳洲血源的胎牛血清供应链同比往年有一个显著的增长。所以说,跟一般的商品不同,胎牛血清的供应量并非仅由胎牛血清的市场需求决定,而是由当年的气...
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一般在拿到细胞后,应该注意什么?收到细胞后先不要开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议对收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况一般可以再申请免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培...
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血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?血清在解冻过程(包括没有*解冻)或储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如凝集素、纤维蛋白原和玻连蛋白等)可能会聚集成团,形成絮状沉淀或外观混浊;在运输过程中,由于时间较长,所以往往有少许解冻,因此也可能稍有沉淀,但这些都不影响血清性能。若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
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如何构建耐药细胞株?肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性是肿瘤治疗失败的重要因素之一,成为目前阻碍肿瘤治疗的绊脚石。因此,探索肿瘤细胞产生耐药的原因以及如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药仍是目前研究的热点和难点。肿瘤细胞耐药的产生是一个复杂的过程,它的机制广泛牵涉到药物代谢学、病理学、生理学等多个学科,这就决定了肿瘤细胞对化疗药物产生耐药的机制是复杂的,因此体外建立化疗药物耐药细胞株仍然是研究肿瘤细胞耐药机制的重要方法。一种药物长期作用于某类细胞,杀死其中没有抗性的细胞,而对这类细胞中具...
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ELISA试剂盒又称为酶联免疫试剂盒,用于对液体样本中的目标物质进行定性和定量检测。随着国家对科研项目的重视,在科研单位和广大科研类院校也越来越受欢迎。ELISA试剂盒之所以受欢迎和它自身的优点是分不开的。首先适合检测的样本很广泛包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本,具体根据试剂盒说明书决定,通常检测灵敏度比较高。其次ELISA是将酶催化的放大作用与特异性抗原抗体反应结合起来的一种微量分析技术。酶标记抗原或抗体以后,既不影响抗原抗体反应的...
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