鸭脑微血管内皮细胞永生化

货号：WS-003Y（免疫荧光鉴定）

细胞详述

脑微血管内皮细胞是血脑屏障的主要组成成分，能够限制可溶性物质和细胞等从血液进入大脑。大脑微血管内皮细胞与外周内皮细胞相比具有一些相同特性。

脑微血管内皮细胞存在许多细胞间紧密连接，产生很高的跨内皮阻抗，延迟细胞旁的通量；脑微血管的内皮细胞间衔接得十分紧密，不象其他组织的血管内皮细胞那样有较大的缝隙脑微血管内皮细胞缺乏内皮细胞的窗孔结构，其液相物质胞饮水平较低；脑微血管内皮细胞具有不对称定位酶和载体介导转运系统，从而产生 “两极分化"的表现型。 与外周内皮细胞相同，大脑微血管内皮细胞表面表达细胞粘附分子，调控白细胞进入大脑。由于微血管内皮细胞的器官特异性，内皮细胞通常取源于疾病研究的相关组织。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。

注意事项：  收到细胞后第一次传代建议1：2传代，充液培养基是维持培养基，不能用来培养细胞。

细胞特性

1) 组织来源于实验动物的脑组织。

2) 细胞鉴定：血管假性血友病因子（vWF）免疫荧光染色为阳性。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5) 细胞生长方式：铺路石状细胞，不规则细胞，贴壁培养。

产品的运输和保存

视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

2) T-25培养瓶充满wan全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

推荐培养基

我们推荐使用鸭脑微血管内皮细胞-永生化细胞专用培养基（WS-003Y-001A）作为体外培养鸭脑微血管内皮细胞的培养基。

贴壁细胞的传代培养

准备和消化：在无菌条件下操作，将旧的培养基去除后，用PBS溶液轻轻润洗细胞，去除残留的血清成分。接着加入适量的0.25%胰蛋白酶消化液，置于37℃、5% CO2培养箱中消化2-3分钟，直至细胞表面变得圆滑和亮泽。随后加入含有10% FBS的培养基终止消化作用，轻柔吹打或振荡培养皿，使细胞悬浮在培养基中。

收集和传代 ：将处理好的细胞悬液转移至离心管中，进行轻度离心（室温，1000rpm，5分钟），以收集细胞。随后，吸去上清液，加入适量的wan全培养基重新悬浮细胞。按照预定的传代比例（通常为1:2或1:3），将悬液中的细胞分别移植到新的培养皿中。标记新培养皿上的细胞信息后，轻轻摇匀，将培养皿放置于37℃、5% CO2培养箱中进行进一步的培养。

悬浮细胞或半贴壁细胞的传代培养

直接传代：将悬浮细胞在培养皿中沉淀后，吸取部分上清液，然后用吸管轻柔吹打以形成细胞悬液。最后将悬液转移到新的培养皿中继续培养。这种方法适合于不需要酶消化的细胞传代，操作简便，但可能会造成细胞损伤和损失。

离心方法：先将悬浮细胞悬液离心，去除上清液后用新的培养基重悬细胞。然后根据需要的传代比例将细胞转移到新的培养皿中。这种方法适合于细胞数量较多时，通过离心可以有效收集和分离细胞，有利于细胞的健康和稳定传代。

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