细胞复苏注意事项

细胞复苏注意事项➤复苏时动作要快，尽量减少胞内形成冰晶，影响复苏后细胞活率。➤融化时尽量不要碰到管口，以免容易造成污染。➤若一次性需要复苏细胞很多，可以分批水浴解冻，防止传热不佳使得细胞融化时间延长。➤若需要同时复苏好几种细胞，提前在离心管和培养瓶上做好标记，或记住自己摆放的位置，不要弄混乱。4、何判定细胞是否发生支原体污染：可以选用直接培养法、荧光染色或PCR方法检测，比较常用的是PCR。当细胞发生支原体污染时，原则上是能够去除支原体的，但是整个过程耗时耗力，还要考验个人操...

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肾小球分离、移植培养

肾小球分离、移植培养SD大鼠颈椎脱臼法处死，75%乙醇浸泡1～2分钟，2次，置超净台内，打开腹腔取出肾脏剪碎，置含Hank's液的无菌培养皿洗涤，置80目不锈钢筛网上。用扁平自制小铲轻轻碾磨产物微小组织透过筛网，滤过组织Hank's液混合物用吸管吸至120目不锈钢筛网，滤过，去小组织块，滤过物吸至200目不锈钢筛网，轻轻滤过，Hank's液洗涤次，收集网上肾小球，镜下观察为分离良好的肾小球。肾小球用0.2%胰酶、0.1%胶原酶，37℃消化20分钟，加血清终止胰酶反应，离心除去...

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刚拿到细胞后，应该注意什么？

一般在拿到细胞后，应该注意什么？收到细胞后先不要开盖，放在培养箱静置若干小时后（看细胞密度而定）在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议对收细胞时的培养基拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张），排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况一般可以再申请免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培...

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简单好用以及精确的细胞培养的原理和步骤

简单好用以及精确的细胞培养的原理和步骤今天我们要讲解的是，细胞培养的原理和步骤，简单好用以及精确，学完之后，相信你对细胞培养将不再陌生。接下来就开始今天的学习吧！细胞培养:体外模拟体内需要的生长条件（温度，营养等），然后加上一些处理条件，比如做药物筛选，就可以做抗性基因的表达的筛选，比如还可以测定某个基因敲低或是过表达的产物，这个当然要结合WB来看最后基因的表达产物是否升高哦，细胞培养的应用还有很多。细胞培养的基本原理：细胞传代（生存空间和营养不足，长得太密，代谢废物太多，要...

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细胞培养常见问题汇总

细胞培养常见问题汇总新买或惠赠的细胞1.新买的或惠赠的细胞如何处理？不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手应赶紧做这几件事：检测瓶子是否破裂；培养基是否漏出，是否浑浊；是否有支原体污染；迅速扩增冻存。2.能否使用与原先培养条件不同的培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供培养条件不同的培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活。3.购买的细胞死亡或存活率不佳可能原因？常见原因可能有：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品...

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胎牛血清的作用

胎牛血清的作用胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基，因为胎牛未进食过母乳，所以IgG含量低，且含有丰富的细胞生长必须的营养成份，故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。01提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。02提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。03有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。04是细胞贴壁、铺展在塑料...

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透析胎牛血清具体适用于实验中有哪些常见场景？

那么，透析胎牛血清具体适用于实验中有哪些常见场景？我们来详细讲讲。一、实验过程中需要标记氨基酸使用放射性标记小分子，对生物合成过程进行监测，以研究蛋白质等大分子的生化性质、合成、加工、细胞内传送、分泌和降解过程。这时，常将细胞放在含有充足养分和放射性标记氨基酸（如35S标记的蛋氨酸或半胱氨酸）的培养液中进行标记。为避免外源未标记的氨基酸的干扰，这时所用的血清就是透析胎牛血清，不含蛋氨酸和半胱氨酸，基础培养基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。这种方法常见于生化代谢调控与疾病的机理研究...

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无外泌体胎牛血清（Exo-FBS）

无外泌体胎牛血清（Exo-FBS）英文名称：ExosomedepletedFetalBovineSerum品牌：winsera货号：规格：50mL/瓶贮存：-20℃说明：该产品仅供科研使用胎牛血清（FetalBovineSerum,FBS）是大多数细胞培养重要的生长支持物。天然来源的FBS会含有大量的外泌体（exosome）等囊泡（ExtracellularVesicles）成分。由于FBS来源的外泌体会对研究结果产生巨大干扰，因此，外泌体研究时必须使用去除外泌体后的FBS进...

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