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哪些原因容易导致PAN胎牛血清沉淀:1.温度改变太大,血清由-20℃直接放入37℃解冻,因温度改变剧烈容易导致沉淀。2.血清在室温或4℃冰箱放置时间太久,血清中的不稳定成分会被破坏,影响细胞生长效果;导致血清品质变差,也会产生沉淀。3.血清分装冻存时,注意在不产生气泡的情况下摇晃均匀,避免因血清成分浓度改变产生沉淀。4.血清灭活后容易产生沉淀,如需使用灭活血清,请按56℃,30分钟,轻微摇晃原则操作,灭活温度过高、时间过长、摇晃不均都容易产生沉淀。5.如有血清沉淀,分装后进行...
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进口胎牛血清需要热灭活吗?何谓热灭活?一般是以56C,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。我需要灭活血清吗?–实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形...
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细胞培养为什么要加入胎牛血清许多临床和做科研的小伙伴们都要涉及到细胞培养,在细胞培养实验中,血清无疑成为影响实验成功与否的重要因素,而在众多血清之中,牛血清是最为常用的。牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,其中含有丰富的细胞生长所必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。牛血清是一种成分复杂的混合物,而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。牛血清主要成分有蛋白质,多肽类,激素类,其他成分如氨基酸、葡萄糖、微量元...
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关于胎牛血清热灭活的问题成为常规操作的血清热灭活至少70%的研究者对血清的灭活仅仅是因为遵照常规操作,或者说认为是理所当然的。常规灭活建议的温度在45℃到62℃之间,而时间则从15分钟到60分钟不等,其中常用的手法是56℃热处理30分钟。随着血清采集、处理、加工工艺的提高,许多早先认为是热灭活的原因已经不再成立,只有少数对血清进行热灭活的研究者在实验中证实了这一步骤的有效性和必要性。热敏补体与热灭活热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质,但是在胎牛血清中对补体的灭活则...
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教你一眼判断血清的质量淡黄色,透明——2小时以内的国产新生牛血清,胆红素含量较少;金黄色,透明——产下较长时间的新生牛血清,一般超过2小时了;金黄色,不透明——产下几天或更久的小牛血清;淡黄色,带一点微红,透明——等级最高的进口胎牛血清,如特级的北美;淡红色,透明——普通的进口胎牛血清;红色偏深,透明——普通的进口胎牛血清,南美的居多,采血环节不够严谨;红色偏暗,透明——普通胎牛血清,保存不好,血红蛋白氧化了;红色,不透明——进口小牛血清,透明度越差,牛龄越大。
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PAN胎牛血清的解冻正确方法胎牛血清的正确存放与解冻是各位实验家尤为关注的一个问题,在保证质量的前提下,胎牛血清的正确存放与解冻的方法总结如下:1)胎牛血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃的冰箱使之全融。但必须注意的是,溶解过程中必须规则的摇晃均匀;2)长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下存储血清,避免反复冻融。3)建议血清硬保存在-20℃条件下。若存放于4℃时,请勿超过1个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装...
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如何避免细胞培养过程中的污染?主要还是考虑无菌环境,尽量做好操作台的灭菌,别把培养基滴落在生物安全柜的入风口,别在培养箱里把培养基打翻。这两个地方霉菌一旦滋生,那你就只能等着用甲醛熏蒸了。紫外无法杀灭霉菌,酒精也不行,只能用甲醛熏蒸,但是一定要注意安全。复苏的时候,水浴锅也需要进行灭菌处理。一旦出现污染,不要急,能救的就用抗生素救一下,但是一般情况下,选择扔掉。避免交叉感染,要不只能整个实验室消毒了。如果细胞发生微生物污染时,应如何处理?原则上:直接灭菌后丢弃之。当重要的培养...
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