原代细胞培养应用？

原代细胞培养应用原代细胞培养越来越多地用作细胞和分子生物学的主要工具，为研究细胞的正常生理学和生物化学（例如，代谢研究、衰老、信号研究），药物和有毒化合物的作用提供了出色的模型系统。细胞诱变和致癌作用。它也可用于药物筛选以及大规模开发生物化合物（例如，疫苗、治疗性蛋白质）。3D细胞培养：由于原代细胞是未转化的且不会永生化，因此它们紧密模拟了活体模型，产生了更具生理意义的结果，可用于模拟3D组织。这些细胞可以作为模型系统来研究细胞生物学和生物化学，研究细胞与致病因子（如细菌、病...

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细胞培养相关知识大合集~~

1细胞的复苏【概述】复苏细胞要求快速融化的手段，这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化。避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损害。【用品】培养液、吸管、离心管、培养瓶【步骤】[1]打开水浴锅，将温度调至37℃；[2]从液氮中取出冻存的细胞株，用镊子夹住冻存管（戴防护面罩），迅速置入37℃的水浴锅中，不断振摇冻存管，使之尽快融化，要在1-2min内完成复温；[3]*融化后，取出冻存管，移至超净工作台，用75%酒精擦洗消毒，用无菌吸管吸取细胞悬液移至无菌离...

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流式细胞术及常见问题分析

目前，流式细胞术广泛应用于细胞表面和细胞内分子表达特征的分析，界定不同种类的细胞群，测定分离出的亚类纯度，分析细胞的大小和总量，它可以同时分析单个细胞的多个参数。它主要用于检测标记在抗体上的荧光强度，这些荧光抗体则可以检测与特定细胞分子结合的蛋白或配体，如与DNA结合的溴化丙啶(PI)等。染色步骤包括：将培养的细胞或组织样品制成单细胞悬液，然后将细胞放入管子或酶标板中与荧光标记或未标记的抗体孵育。之后将细胞放入流式细胞仪中进行分析。悬浮缓冲液中染色的细胞样品通过流式细胞仪时，...

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千舍--荧光标记的选择指南

对于流式检测最初的一步就是选择何种方法，通常是何种荧光物质标记的抗体。厂家根据需要开发了各种荧光标记的抗体，进行选择时首先要满足的就是所选择的抗体必须在流式上能够检测，各单位买的流式仪功能不*一致，首先要和检测方进行联系，看能否检测。在附表里我将常用的荧光标记物质的激发波长和检测波长给出，可以参考。有几个原则一起说一下：1、流式检测时*荧光物质直接标记的抗体，如果没有直接标记的抗体，用间接发，即二抗上标记荧光分子同样可以。不过这增加了处理的难度，处理步骤增多，往往会不同程度影...

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免疫荧光单标记和双标记的方法？及千舍热卖细胞？

免疫荧光单标记和双标记的方法1.免疫荧光单标记方法免疫荧光单标记是指只标记一种蛋白质分子，方法比较简单，只要按照染色步骤去做，通常不存在太多的问题。但要注意固定液的选择，固定液选择的合适与否，可能会直接影响染色结果。具体染色方法如下。1)所需材料与试剂(1)培养在盖玻片或玻璃培养皿中融合程度达到60％一70％的细胞。(2)一抗、FITC或TRITC标记的二抗。(3)4％多聚甲醛固定液或冷丙酮固定液(一20℃预冷20min)。(4)封闭液。(5)0．01mol／LPBS缓冲液。...

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耐药细胞株是如何构建的？

目前已知的体外建立耐药细胞株的方法主要有以下几种：大剂量药物冲击法、药物浓度递增法、药物浓度递增与大剂量药物冲击相结合法、转基因结合药物筛选法。其中药物浓度递增法和大剂量药物冲击法成为临床建立肿瘤细胞化疗耐药模型的常用方法。①药物浓度递增法是指最初使用低浓度的药物刺激细胞，等待细胞适应低浓度的环境之后，再略微提高药物浓度，继续等待细胞适应目前的环境，经过反复的培养和加压，最终使细胞可以在高浓度的药物环境下生存②大剂量药物冲击法是在细胞培养时加入超高药物浓度的药物，但是孵育的时...

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如何养出“漂亮“的悬浮细胞？

实验室培养的细胞种类可以大致分为贴壁细胞和悬浮细胞两种，只有极少数类型细胞同时存在两种状态。悬浮细胞是指不需要依赖支持物，可在培养基中以悬浮状态生长的一类细胞，如淋巴细胞和大部分血液系统来源细胞。（如小鼠白血病细胞WEHI-3,人白血病细胞K-562,HL-60）。工业上也有越来越多的贴壁传代细胞被驯化出来，进行全悬浮的培养。目前在工业中应用的主要有SP2/0、NS0、CHO、BHK和HEK293细胞等，它们主要用于重组蛋白质生产；在兽用生物制品中常用的传代细胞主要有采用全悬...

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什么是细胞支原体污染？怎么办？

支原体污染一直是细胞培养的“头号敌人”，但是支原体的存在却十分普遍，它的“不请自来”总是让我们措手不及。世界上有近60%的实验室正在遭受支原体污染的困扰，今天就让我们来好好认识这个“刺头”吧！什么是支原体？支原体结构简单，具有高度多形性、无细胞壁、增殖缓慢、可在人工培养基中存活并增殖的特点。除此之外，它的“个头”很小，只有0.1-0.3um，可通过一般的滤菌器。支原体主要以二分裂方式繁殖，亦可以出芽方式繁殖，分枝形成丝状后断裂呈球杆状颗粒。大部分支原体繁殖速度比细菌慢，适宜生...

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