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体内细胞培养及操作步骤1、瘤细胞悬液接种(1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞。(2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液。(3)培养细胞应用PBS洗两遍。(4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml。(5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些。(6)次日注意观察动物一般情况。初次接种...
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GEMINI胎牛血清货号:900-108美国GeminiBio是被FDA认可的提供细胞培养用的生物产品和化学试剂的公司,产品包括人和动物的血清和其它用于细胞培养的相关产品,细胞因子重组蛋白等。Gemini公司,成立于1985年,位于加利福尼亚南部Calabasas市,1999年,迁至加利福尼亚北部Woodland市。Gemini公司在销售的动物血清产品,全部来自于澳洲的子公司,血源主要为澳大利亚、新西兰、巴拿马、乌拉圭、巴西和阿根廷等。Gemini始终以“为客户提供高质量产品...
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WinSera无外泌体血清的常见问题?能不能用无血清培液养,能不能用正常培液养到70%换无外泌体血清的培液?有些paper确实会使用无血清培养液培养细胞然后收上清分离外泌体,论坛中也有已经发表文章的朋友使用该方法,该方法是使用含有外泌体的血清培养细胞到一定密度,然后吸去培液,PBS洗数次之后换无血清培液进行培养即可。但是目前很多高档次的paper基本都是使用含无外泌体血清的培液进行细胞培养的,无外泌体血清可以按照之前hzangs的推文介绍的方法制备。如果你的无外泌体血清比较珍...
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怎么做好微生物污染的预防?微生物污染在细胞培养中是非常常见的,也是令人头大的一件事情。所以我们一定要将问题扼杀于摇篮之中,规范实验中的各个步骤,确保细胞“宝宝”在无污染的情况下健康成长。1.实验进行前,准备好所需的试剂和器材。玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:1)高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140℃2小时以上。2.培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻璃瓶取*培养基5-10ml置培养箱内培养2-3天,肉眼见无浑浊...
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细胞凋亡是程序性细胞死亡的最佳表征形式,不会引起炎症反应,对器官发育、组织重塑、免疫反应和肿瘤抑制至关重要。研究表明细胞凋亡有两种主要途径:内在或线粒体途径、外在或死亡受体途径。内在或线粒体途径是通过内在途径的细胞凋亡,可由任何引起氧化应激、线粒体紊乱和DNA损伤的刺激物触发,例如癌症治疗剂、缺氧、缺血再灌注损伤和电离辐射。线粒体损伤可导致线粒体外膜透化,促进细胞色素释放到细胞质中,释放的细胞色素然后结合Apaf-1,从而通过激活procaspase9并形成称为“凋亡体”的复...
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黑色素瘤中肿瘤细胞和CD8+T细胞的互作异质性导致了不同患者免疫治疗临床获益的巨大差异。先前研究揭示出肿瘤微环境细胞的空间分布和功能状态具有高度异质性。而黑色素瘤中,肿瘤细胞和CD8+T细胞之间是否存在串扰倾向,以及这种串扰倾向如何影响患者的临床预后尚不清楚。本研究利用公开的单细胞转录组数据,在黑色素瘤中发现了肿瘤细胞和CD8+T细胞的异质性功能状态和他们之间广泛的配体-受体互作。此外,基于细胞间通信强度和细胞状态活性之间的关联,作者确定了肿瘤中间状态和CD8+T细胞耗竭状态...
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市场上的胎牛血清种类繁多,鱼龙混杂,使人难以分辨真伪及品质。好不容易在众多品牌中挑选出诚心如意的产品后,那我们就可以安心使用了嘛?不尽然,我们汇总小伙伴经常咨询的一些问题。1、为何上次购买的同一货号的血清培养细胞状态差异那么大?如何避免此影响?答:因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。为了避免批间差异对细胞的影响,建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需...
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