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SBI无外泌体血清|EXO-FBS-50A-1使用说明书

SBI无外泌体血清|EXO-FBS-50A-1使用说明书

产品型号:

所属分类:SBI无外泌体血清

产品时间:2022-03-28

简要描述:SBI无外泌体血清|EXO-FBS-50A-1使用说明书
货号:EXO-FBS-50A-1
规格:50ml
外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm),现今,其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年,外泌体绵羊网织红细胞中被发现, 1987年Johnstone将其命名为“exosome"。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内内溶

详细说明:

SBI无外泌体血清|EXO-FBS-50A-1使用说明书

产品名称:去除无外泌体血清

货号:EXO-FBS-50A-1

品牌:SBI

规格:50ml

当外泌体在1980年被发现后,其被认为是细胞排泄废物的一种方式,如今随着大量对其生物来源、其物质构成及运输、细胞间信号的传导以及在体液中的分布的研究发现外泌体具有多种多样的功能。外泌体的功能取决于其所来源的细胞类型,其可参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等方方面面。有研究表明肿瘤来源的外泌体参与到肿瘤细胞与基底细胞的遗传信息的交换,从而导致大量新生血管的生成,促进了肿瘤的生长与侵袭。

外泌体.jpg


外泌体大家应该都很熟悉。1983年,在绵羊网织红细胞中第一次发现了现在生物学研究领域炙手可热的“小网红"——一种特殊囊泡结构,并与1987年正式被命名为“exosome"。

外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm),现今,其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。为细胞间通讯的重要媒介,它像一个信使,为细胞与胞外环境传递信息,保障机体的正常工作。

越来越多的科研人员投入到外泌体的研究中,根据PubMed统计显示,最近几年,外泌体研究呈爆炸增长。

外泌体的研究离不开细胞培养。以肿瘤相关外泌体研究为例,目前,收集肿瘤细胞外泌体主要有两种方法:

方法一

使用正常培液养细胞再换无血清培液收外泌体。

方法二

直接使用exosome-free FBS配制培养基用于培养细胞收外泌体。

首先,就是基本的离心条件了,目前超离比较好的就是贝克曼或者日立的了,这两家超离在行业内算是翘楚了。其次就是离心参数了:120000 g,4℃,离心14h,离心结果如图:

11.jpg


1:离心后,血清外泌体会富集在管底和管壁;

2:吸取血清时,只吸取澄清部分的血清,并且远离上图中标记的区域;

3:吸取70-80%的澄清的血清;(注意:动作慢,动作轻)

4:其余的浑浊血清留作正常细胞的的营养物添加使用,避免浪费。

5:如果觉得纯度不够,再把离心后收集的血清做二次超速离心。

6:针对超速离心后的血清,必须进行粒径检测(离心前样品和离心后样品),该数据可以放到文章补充材料中,用来证明无血清外泌体制备成功。

WINSERA® Fetal Bovine Serum 胎牛血清目录如下:

WINSERA®胎牛血清

货号

规格

库存状态

优级

FBS500-WS-002

500ML

现货

特级

FBS500-WP-002

500ML

现货

ES级别

FBS500-WE-002

500ML

现货

无外泌体血清

FBS050-EXO

50ML

现货

人胆囊上皮细胞永生化

人胆囊上皮细胞永生化+GFP

人前庭鞘膜瘤细胞永生化

人胰腺神经内分泌肿瘤细胞永生化

人胰腺癌细胞永生化

人胰腺癌相关成纤维细胞永生化

人风湿性关节滑膜成纤维细胞永生化

人主动脉内皮细胞永生化

人子宫内膜上皮细胞永生化

人肝窦内皮细胞永生化

人肠癌细胞永生化

人颈静脉球瘤细胞永生化

人副神经节瘤细胞永生化

人肠息肉上皮细胞永生化

人原代听神经瘤细胞永生化

人原代髓核细胞永生化

人原代神经鞘膜瘤细胞永生化

人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化

人眼睑皮脂腺癌细胞永生化

人主动脉瓣膜间质细胞永生化

人睾丸支持细胞永生化

人骨骼肌细胞永生化

人卵巢癌细胞永生化

人真皮成纤维细胞永生化

人原代甲状旁腺主细胞永生化

人原代乳腺上皮细胞永生化

人原代乳腺癌成纤维细胞永生化

人原代软骨细胞永生化

人脐静脉内皮原代细胞+GFP

人神经母细胞瘤细胞

人神经母细胞瘤细胞

小鼠肺成纤维细胞永生化

小鼠附睾脂肪干细胞永生化

小鼠肾小球系膜细胞永生化

小鼠胰腺星状细胞永生化

小鼠脂肪干细胞永生化

麝香鼠原代乳腺上皮细胞永生化

小鼠骨髓巨噬细胞永生化

小鼠角膜上皮细胞永生化

小鼠肝星状细胞永生化

大鼠脑微血管内皮细胞永生化

大鼠内皮祖细胞永生化

大鼠脂肪干细胞+RFP

鸡胚成纤维细胞永生化

鸡气管黏膜上皮细胞永生化

鸭脑微血管内皮细胞永生化

鸭胚成纤维细胞永生化

鸭胚肝间质细胞永生化

羊睾丸间质细胞永生化

湖羊瘤胃上皮细胞永生化

山羊乳腺上皮细胞永生化

猪脂肪干细胞永生化

猪扁桃体上皮细胞永生化

猪肝星状细胞永生化

猪骨骼肌卫星细胞永生化

猪子宫内膜上皮细胞永生化

猪鼻腔粘膜上皮细胞永生化

猪外周血单个核细胞(PBMC)永生化

猪主动脉内皮细胞永生化

猪小肠上皮细胞永生化

雪貂鼻腔粘膜上皮细胞永生化

兔子宫内膜上皮细胞永生化

兔肝脏间质细胞永生化

SBI无外泌体血清|EXO-FBS-50A-1使用说明书胎牛血清(FBS)已在真核细胞培养中使用了几十年了。然而,很少有人关注FBSRNA对培养的细胞会产生什么样的生物学效应。来自哈佛医学院的研究人员用RNA测序,证明了FBS含有蛋白质编码和调控的多种RNA,包括mRNAmiRNArRNAsnoRNA等。它们中的大多数(>70%)仍然存在于细胞外囊泡(EV)和细胞间通讯研究中常使用的长时间超速离心得到的无囊泡FBSvesicle-depleted FBS, vdFBS)中。FBS相关的RNA会在分离细胞外膜泡RNAexRNA)时一同被分离出来,这会对下游RNA分析造成干扰。许多进化上保守的FBS源的RNA种类会被错误地认为是人或小鼠细胞的转录本。值得注意的是,在FBS中含量丰富的一些miRNAs,如miR-122miR-451AmiR-1246,先前已被报道为在培养细胞来源的细胞外膜泡中富含的miRNAs,这可能是胎牛血清中miRNAs造成的假象。对公开可用的exRNA数据库的分析支持FBS污染的概念。此外,FBS转录本可被培养的细胞吸收,并影响高度敏感的基因表达谱技术的结果。因此,实验设计过程中采取减少FBSRNA干扰的预防措施是非常有必要的。






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