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SBI无外泌体血清EXO-FBS-50A-1使用说明
更新时间:2020-12-15 点击量:2730

SBI无外泌体血清EXO-FBS-50A-1使用说明

产品名称:无外泌体血清|去除外泌体胎牛血清

货号:EXO-FBS-50A-1

规格:50ml

备注:少量现货,干冰运输......

一、外泌体的基本信息

⊙外泌体的大小:外泌体的直径约40-150nm

⊙从研究上来讲并不太严格区分外泌体(exosomes)或微泡(microvesicles)

⊙外泌体属于胞外囊泡类,除了外泌体之外细胞还分泌微泡以及其它的膜囊泡

⊙外泌体的直接比微泡的要小,后者直径为100nm-1μm

⊙外泌体的数量:人体中大约有1014个,近乎于平均每个细胞产生1000-10000个

⊙外泌体的细胞源:人体中几乎所有类型的细胞均能产生外泌体

⊙外泌体具有异质性,即使是同一种细胞分泌的外泌体都有可能具有很大功能区别

⊙外泌体的存在:外泌体几乎存在于所有的组织、细胞间隙、体液中

什么是外泌体?

答:Exosome,中文名外泌体,是一种能被大多数细胞分泌的微小膜泡,具有脂质双层膜结构,直径大约40-100 nm。细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体,它的主要来源是细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到细胞外基质中。外泌体天然存在于体液中,包括血液、尿液、唾液、脑脊液及乳汁中,参与细胞间通讯。

外泌体研究,应选用血浆还是血清?

答:血清是血液凝固之后收集的液体,所以其中少了纤维蛋白原,凝血因子,以及多了很多凝血产物。纤维蛋白原可转化为纤维蛋白,具有凝血功能。在凝血过程中血小板会分泌大量的外泌体,有研究发现血清中有接近50%的外泌体来自额外的分泌。

血浆=血液-血细胞  

血清=血浆-纤维蛋白原-凝血因子

所以一般实验选择血浆,在特殊情况下,如研究与血小板相关的疾病的时候,当然是血清更适合。

外泌体研究的主要应用
外泌体的功能取决于其所来源的细胞类型,其可参与到机体免疫应答、抗原提呈、细胞迁移、细胞分化、肿瘤侵袭等方方面面。有研究表明肿瘤来源的外泌体参与到肿瘤细胞与基底细胞的遗传信息的交换,从而导致大量新生血管的生成,促进了肿瘤的生长与侵袭。
肿瘤

  • 肿瘤转移。来自白血病干细胞的外泌体促进急性骨髓性白血病(AML)细胞的增殖、迁移和抑制细胞凋亡。
  • 治疗靶标。利用外泌体递送小干扰RNA来沉默KRAS G12D,从而特异性高效靶向至胰腺癌细胞,以显著降低RAS活化、癌细胞增殖和转移过程。

免疫

  • β细胞将含有蛋白质和miRNA的外泌体释放到细胞外,并可转移到其他代谢器官或免疫内皮细胞,有利于维持葡萄糖体内平衡或造成胰岛素抵抗。

心血管

  • 外泌体介导miR-155从平滑肌细胞转移到内皮细胞导致了内皮细胞的损伤促进动脉粥样硬化

分子标记

  • 疾病诊断。在酒精性肝病、NASH、病毒性肝炎、药物性肝损伤和肝细胞癌中发现循环EVs的水平上升。
  • 预后标志。

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苏州千舍带你了解下外泌体! 外泌体到底是个啥?莫愁:外泌体么,简单点讲就是:“老司机,带带我……”。大概就是在细胞内部由细胞内多泡体形成的一个囊泡,装载了一堆乱七八糟的东西,然后分泌出体外,然后进入另一个细胞,把这堆乱七八糟的东西卸车的一个过程。

外泌体大小跟病毒差不多大,反正是蛮小的了。

所以外泌体的研究方法基本是这样的:

首先,用无外泌体的血清培养基进行培养,否则就干扰了。

接着,就是低速离心去除细胞。

然后通过过滤,刚刚也说过大小了哈,过滤后,把细胞微泡去除掉,剩下的就是外泌体了。

接着高速离心,富集外泌体:

然后,研究的套路一般都是进行外泌体的鉴定,可以通过电镜,或者WB来鉴定,因为外泌体是有标志物的,像下面这样:

这时候可以选择细胞内质网的特异性分子Calnexin来作为阴性对照。

用外泌体也可以做流式分析,但是,外泌体做流式分析,但是,你要记住外泌体很小,跟病毒差不多大。所以做流式前要用包被了抗体的珠子(beads)先结合上外泌体,然后进行流式的分析,就像这样:

实关键还是在外泌体内部的那些miRNA和mRNA的抽提和鉴定,研究外泌体的具体机制,还是靠上车的这堆货。

现在大概了解外泌体研究要做些什么了吧?

一般来说,这个老司机带上车的都是些miRNA和mRNA,不过大概也有lncRNA,有的时候不巧也会有点DNA。下面就是外泌体里一般的RNA分布,有蛮多miRNA,所以老司机外泌体有可能会参与某些调控机制。

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