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SIGMA特级胎牛血清价格

SIGMA特级胎牛血清价格

产品型号:

所属分类:SIGMA胎牛血清

产品时间:2022-03-17

简要描述:SIGMA特级胎牛血清价格

名称:胎牛血清

货号:F8687-500ML

品牌:SIGMA
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详细说明:

SIGMA特级胎牛血清价格

产品名称:特级胎牛血清

货号:F8687-500ML  F2442-500ML

品牌:SIGMA

规格:500ml

产品名称:特级胎牛血清

货号:0500

规格:500ml

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如何从T25瓶中转移sf9细胞?能用蛋白酶消化吗?

我们推荐使用脱落细胞的方法,此技术破坏性最小,生活力最高。通过使用巴斯德吸液管,让细胞上培养基流动。作为一种选择你也可以轻轻拍打培养瓶。只有在绝对必要的情况下,才使用胰消化细胞。

38.胰消化一个T25瓶的sf9细胞:

1. 去除培养基。

2. 2ml 1xPBS(足以覆盖细胞表面)洗涤细胞,去除PBS

3. 加入2ml 1xEDTA(恰好覆盖细胞表面)。

4. 37 ℃孵育510分钟。在仪器下检测看到5分钟后它们正在向上移动。

5. 向细胞中加入2ml 细胞培养液,移入锥形管,用2ml培养液洗瓶壁,移入同一锥形管中。(培养基中的FBS终止了胰的活性。)

6. 离心(1100rpm)沉淀细胞。去除培养基。

7. 用新的培养基重新悬浮细胞。传代。

39.Sf9, Sf21, high Five细胞悬浮培养时,肝素的使用量是多少?

为了防止悬浮培养细胞聚集的形成,使用肝素浓度为10单位/毫升细胞悬液。

40.在重新冻存sf9细胞前,它可以传多少代?随着传代的次数的增加,它的感染能力会降低吗?

通常情况当细胞经过30次传代后,应该返回冻存。无论什么时候计数时,都应该检查细胞活力。如果超过95%的细胞保持有活力和在大约30小时左右加倍,细胞仍然可以使用。如果活力和加倍时间下降,它们的感染力将不在是有效的。

41.贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,在放置几天后颜色变紫?

这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。

42. 细胞培养基偶然被冻,可否继续使用?

如果细胞培养基偶然被冻,您应该熔化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生,培养基可以正常使用,如果出现沉淀,只能丢弃这些培养基。

43. 无血清培养与有血清培养使用的抗生素量一样吗?

当在无血清培养基中添加抗生素时,降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下,抗生素不被灭活,可能对于细胞达到毒性水平。

44. 培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗?

一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

45.培养基及其它添加物和试剂可反复冻融吗?

大部分添加物和试剂最多可以冻融3次,如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,将会影响它的性能。

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SIGMA特级胎牛血清价格保存血清最好方法是什么?

    我们建议血清应保存在-5℃-20℃。但是若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的无菌容器内,再放回冷冻。反复冻融会对血清的品质造成不良影响。

如何解冻血清才不会使产品质量受损?

    我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。

血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?

    血清在解冻过程(包括没有*解冻)或储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如凝集素、纤维蛋白原和玻连蛋白等)可能会聚集成团,形成絮状沉淀或外观混浊;在运输过程中,由于时间较长,所以往往有少许解冻,因此也可能稍有沉淀,但这些都不影响血清性能。

    若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。

何谓热灭活?

    一般是以56℃30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。

有必要作热灭活吗?

    实验显示,经过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或*没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热灭活的血清,沉淀物的形成,会显著增多,这些沉淀物在导致显微镜下观察,像是小黑点",常常会让研究者认为血清遭受污染,而把血清放进37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。

    因此我们建议您,若非必须,您可以不做热灭活处理血清。这样,不仅节省您宝贵时间,更确保血清的质量。只在做免疫学研究或培养干细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时才推荐做热灭活。我公司也有已经热灭活的血清可供选择。

如何减少沉淀物的产生?

    我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作:

    ● 解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃4℃至室温),若血清解冻时,改变的温度太大(如-20℃37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。

    ● 解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。

    ● 请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。

    ● 血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,则毋须做此步骤。

若必须做血清的热灭活,请遵守56℃30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。




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