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HEK293人胚肾细胞产品说明书
发布时间:2022-08-22 点击量:184

产品名称:HEK293人胚肾细胞

细胞特性

1)来源:肾

2)2)形态: 上皮样

3)含量:>1x106

4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

细胞用途:仅供科研使用。细胞接收后的处理

1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。                      

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备90%DMEM(H)+10%FBS+2mM L谷氨酰胺。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 冻存细胞的复苏::

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

注意事项:

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

HEK细胞是最早公布的Ad5-转化的人类细胞系。HEK293细胞是人肾上皮细胞系,有多种衍生株,比如HEK293、HEK293A、HEK293T/17等都是来源于人胚胎肾细胞,其极少表达细胞外配体所需的内生受体,且比较容易转染。HEK293 细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad5)DNA的永生化细胞,表达腺病毒5的基因。商业化的HEK 细胞均来源于1977年Graham 转化的HEK细胞。目前, HEK293细胞系已经成为一个常用的表达目的蛋白质的细胞株。

HEK293细胞系及其衍生物广泛用于病毒包装的信号转导和蛋白质相互作用研究,以及快速小规模蛋白质表达和生物制药生产。最初的293细胞是1973年通过剪切5型腺病毒DNA转化从一个流产的亲子关系不明的人类胚胎的肾脏中获得的。人类胚胎肾细胞起初似乎不容易转化,经过多次尝试,仅在分离出一个转化克隆几个月后,细胞就开始生长,该细胞系称为HEK293或293细胞(ATCC编号CRL-1573)。已知有一个4kbp的腺病毒基因组片段整合在19号染色体上编码E1A/E1B蛋白,干扰细胞周期调控途径,抑制细胞凋亡。细胞遗传学分析证实HEK293系为亚三倍体。对HEK293系进行了多重荧光原位杂交分析发现每个克隆中也可见多种核型,几乎所有的细胞都存在相对于人类参考基因组的染色体改变。

HEK293人胚肾细胞

人胚肾细胞 HEK-293(293) MEM+10%FBS+1%P/S 贴壁+悬浮生长

人胚肾细胞 HEK-293A DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁+悬浮生长

人高转移鼻咽癌细胞系 5-8F  1640+10%FBS+1%P/S    贴壁生长

人鼻咽癌细胞 C666-1 1640+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

人鼻咽癌细胞 NPC/HK-1 1640+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

猪鼻甲黏膜成纤维细胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人卵巢癌细胞 A2780 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S   

人卵巢癌细胞+GFP A2780+GFP 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S  

人卵巢腺癌细胞 CAOV-3 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞 CoC1  1640+10%FBS+1%P/S  

人卵巢透明细胞癌细胞 ES-2 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞 HEY DMEM+10%FBS+1%P/S  

人卵巢癌细胞 HEY A8 DMEM+10%FBS+1%P/S

人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S

人正常卵巢上皮细胞系 IOSE-80(IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN) 1640+10%FBS+1%P/S

人卵巢颗粒细胞瘤细胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S

人卵巢腺癌细胞 OVCAR-3 1640(含NaHCO3 1.5g/L)+20%FBS+1%P/S + 0.01mg/ml牛胰岛素

人卵巢癌细胞 SK-OV-3 Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞荧光素酶标记 SK-OV-3+LUC Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

小鼠卵巢上皮癌细胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S  

仓鼠卵巢细胞 CHO DMEM+10%FBS+1%P/S

仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 CHO/dhFr- IMDM+10%FBS+P/S1%+0.05mM次嘌呤+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤。

中国仓鼠卵巢细胞k1 亚克隆系 CHO-K1 F12K+10%FBS+1%P/S

中国仓鼠卵巢细胞k1 亚克隆系 CHO-K1(悬浮) CHO GROW CD2培养基+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

中国仓鼠卵巢细胞 CTLA4 IG-24 DMEM+10%FBS+0.2mM脯氨酸+0.001mM氨甲蝶呤+1%P/S

仓鼠卵巢细胞 LEC-1 MEMα+10%FBS+1%P/S

人高转移肺癌细胞 95-D  1640+10%FBS+1%P/S

 人肺癌细胞 A549  F12K+10%FBS+1%P/S   

 人肺癌细胞+RFP A549+RFP F12K+10%FBS+1%P/S

 人肺癌细胞荧光素酶标记 A549+luc F12K+10%FBS+1%P/S

人肺癌细胞 Calu-1 MCCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S  

人肺癌细胞 DMS 53 Waymouth's MB 752/1 medium (Invitrogen, 11220-035)+10%FBS+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 HCC827 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞荧光素酶标记 HCC827+LUC 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H1299 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%(10mM)HEPES +1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H1437 1640+10%FBS+1%丙酮酸钠+1%hepes+1%PS

人经典小细胞肺癌细胞 NCI-h1688 1640+20% FBS+1%P/S 细胞涨的慢2-3周发货

人肺癌细胞 NCI-H1703 1640+10% FBS+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H1944 1640+10%FBS++1%PS

人肺癌细胞 NCI-H2126 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H2228 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人肺癌细胞 NCI-H23 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人肺癌细胞(淋巴结转移) NCI-H292 1640+10%FBS+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H358 1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌细胞 NCI-H446 1640+10%FBS+1%PS

人大细胞肺癌细胞 NCI-H460 [H460]  1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H524  1640+10%FBS+1%P/S

人大细胞肺癌细胞 NCI-H661[h661]  1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌细胞 NCI-H82 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 pc-9 1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌 SBC-2  1640+10%FBS+1%P/S   

人小细胞肺癌细胞 SHP-77 1640+10FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1% PS

小鼠肺癌细胞 LLC DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠肺癌细胞荧光素酶标记 LLC+LUC DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑髓母细胞瘤细胞 D283 Med  MEM+10%FBS+1%P/S

人脑髓母细胞瘤细胞 D341 Med MEM+1%丙酮酸钠+1%NEAA+10%FBS+1%P/S  

永生化人脑微血管内皮细胞 HCMEC/D3 内皮细胞培养体系(PriMed-iCell-002)

人脑胶质瘤细胞 HS683 DMEM+15%FBS+1%P/S  

人脑胶质细胞瘤细胞 KNS-89 DMEM +10%FBS+1%P/S

人脑胶质瘤 SNB-19 DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑胶质瘤 TJ905 DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤 U118MG(U-118MG) DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤 U87MG MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤+RFP U87MG+RFP MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

小鼠脑神经胶质母细胞 G422 DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠脑微血管内皮细胞株 bEnd.3 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S  

小鼠脑神经瘤细胞 neuro-2a MEM+10%FBS+1%P/S

小鼠脑神经瘤细胞荧光素酶标记 neuro-2a+luc MEM+10%FBS+1%P/S

大鼠脑胶质瘤细胞 C6 F12K +2.5%FBS+15%HS(马血清)+1%P/S

大鼠脑胶质瘤细胞绿色荧光标记 C6+LUC F12K +2.5%FBS+15%HS(马血清)+1%P/S

大鼠脑星形胶质细胞 CTX DMEM+10%FBS+1%P/S  

大鼠脑I型星形胶质细胞 CTX-TNA2 DMEM+10%FBS+1%P/S

大鼠脑间质细胞 DI TNC1 DMEM+10%FBS+1%P/S 


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