产品名称：人胶质母细胞瘤T98G

细胞特性

1）来源：脑

2）形态：成纤维细胞，贴壁生长

3）含量：>1x106

4）污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5）规格：T25瓶或者1mL冻存管包装运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：（1）干冰运输，收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏；（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

收到细胞后请拍照，3天内如果发现污染，请及时拍照与我们联系。

细胞用途：仅供科研使用。细胞接收后的处理：

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的*培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4）备注：运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。                      

一．培养基及培养冻存条件准备：

1） 准备1640 培养基；优质胎牛血清，10%；P/S双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二． 细胞处理：

1） 冻存细胞的复苏：：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4-6mL*培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，*培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml*培养基的培养瓶（或皿）中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3. 轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的*培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例；

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中，可使用血球计数板计数，来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min，去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80度冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

注意事项：

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

人胶质母细胞瘤T98G

胶质母细胞瘤（Glioblastoma）

1.要点（Key concepts）

■胶质母细胞瘤（WHO IV级）又称为多形性胶质母细胞瘤（glioblastoma multiform），是恶性程度高的星形细胞瘤。可以从弥漫性星形细胞瘤进展而来（继发性胶质母细胞瘤），也可以是没有低度恶性前期病变的原发性胶质母细胞瘤。后者更为常见。

■原发性胶质母细胞瘤多发生于老年人，平均年龄55岁，临床病史短，常常少于3个月；继发性胶质母细胞瘤则常发生于小于45岁的年轻人，病史较长，少则不到1年，多则10余年，平均4～5年。

■ 浸润性扩散是弥漫性星形细胞瘤的特点，而胶质母细胞瘤则可更迅速向周围脑组织扩散。常见的扩散途径是通过胼胝体、内囊、穹隆、前联合以及视放射直接蔓延，其他的扩散途径包括脑脊液、血管周围间隙。通过血源性转移到颅外罕见。

■ 多灶性（multifocal）和多中心（multicentric）胶质母细胞瘤的区别在于，前者常见，病灶相距较近，镜下见相互之间有关联；后者少见，病灶之间相距较远，镜下见病灶间无关联。

■ 巨细胞胶质母细胞瘤（giant cell glioblastoma）和胶质肉瘤（gliosarcoma）是胶质母细胞瘤的亚型，分别占胶质母细胞瘤的5%和2%。

2.概述（Brief introduction）

■ 占脑星形细胞肿瘤的60%～75%。

■ 好发于中年人，45-75岁多见，约80%患者年龄大于50岁。男性略多于女性，男女比为1.28:1。

■ 多发生于大脑半球皮质下白质区，根据发生频率从高到低依次为颞叶、顶叶、额叶和枕叶。肿瘤常常浸润到邻近皮质，或通过胼胝体侵犯到对侧大脑半球。儿童胶质母细胞瘤常位于基底节和丘脑。人高转移鼻咽癌细胞系 5-8F  1640+10%FBS+1%P/S    贴壁生长

人鼻咽癌细胞 C666-1 1640+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

人鼻咽癌细胞 NPC/HK-1 1640+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

猪鼻甲黏膜成纤维细胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人卵巢癌细胞 A2780 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S   

人卵巢癌细胞+GFP A2780+GFP 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S  

人卵巢腺癌细胞 CAOV-3 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞 CoC1  1640+10%FBS+1%P/S  

人卵巢透明细胞癌细胞 ES-2 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞 HEY DMEM+10%FBS+1%P/S  

人卵巢癌细胞 HEY A8 DMEM+10%FBS+1%P/S

人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S

人正常卵巢上皮细胞系 IOSE-80（IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN） 1640+10%FBS+1%P/S

人卵巢颗粒细胞瘤细胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S

人卵巢腺癌细胞 OVCAR-3 1640(含NaHCO3 1.5g/L)+20%FBS+1%P/S + 0.01mg/ml牛胰岛素

人卵巢癌细胞 SK-OV-3 Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞荧光素酶标记 SK-OV-3+LUC Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

小鼠卵巢上皮癌细胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S  

仓鼠卵巢细胞 CHO DMEM+10%FBS+1%P/S

仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 CHO/dhFr- IMDM+10%FBS+P/S1%+0.05mM次嘌呤+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤。

中国仓鼠卵巢细胞k1 亚克隆系 CHO-K1 F12K+10%FBS+1%P/S

中国仓鼠卵巢细胞k1 亚克隆系 CHO-K1（悬浮） CHO GROW CD2培养基+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

中国仓鼠卵巢细胞 CTLA4 IG-24 DMEM+10%FBS+0.2mM脯氨酸+0.001mM氨甲蝶呤+1%P/S

仓鼠卵巢细胞 LEC-1 MEMα+10%FBS+1%P/S

人高转移肺癌细胞 95-D  1640+10%FBS+1%P/S

 人肺癌细胞 A549  F12K+10%FBS+1%P/S   

 人肺癌细胞+RFP A549+RFP F12K+10%FBS+1%P/S

 人肺癌细胞荧光素酶标记 A549+luc F12K+10%FBS+1%P/S

人肺癌细胞 Calu-1 MCCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S  

人肺癌细胞 DMS 53 Waymouth's MB 752/1 medium (Invitrogen, 11220-035)+10%FBS+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 HCC827 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞荧光素酶标记 HCC827+LUC 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H1299 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%（10mM）HEPES +1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H1437 1640+10%FBS+1%丙酮酸钠+1%hepes+1%PS

人经典小细胞肺癌细胞 NCI-h1688 1640+20% FBS+1%P/S 细胞涨的慢2-3周发货

人肺癌细胞 NCI-H1703 1640+10% FBS+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H1944 1640+10%FBS++1%PS

人肺癌细胞 NCI-H2126 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H2228 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人肺癌细胞 NCI-H23 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人肺癌细胞(淋巴结转移) NCI-H292 1640+10%FBS+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H358 1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌细胞 NCI-H446 1640+10%FBS+1%PS

人大细胞肺癌细胞 NCI-H460 [H460]  1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H524  1640+10%FBS+1%P/S

人大细胞肺癌细胞 NCI-H661[h661]  1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌细胞 NCI-H82 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 pc-9 1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌 SBC-2  1640+10%FBS+1%P/S   

人小细胞肺癌细胞 SHP-77 1640+10FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1% PS

小鼠肺癌细胞 LLC DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠肺癌细胞荧光素酶标记 LLC+LUC DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑髓母细胞瘤细胞 D283 Med  MEM+10%FBS+1%P/S

人脑髓母细胞瘤细胞 D341 Med MEM+1%丙酮酸钠+1%NEAA+10%FBS+1%P/S  

永生化人脑微血管内皮细胞 HCMEC/D3 内皮细胞培养体系（PriMed-iCell-002）

人脑胶质瘤细胞 HS683 DMEM+15%FBS+1%P/S  

人脑胶质细胞瘤细胞 KNS-89 DMEM +10%FBS+1%P/S

人脑胶质瘤 SNB-19 DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑胶质瘤 TJ905 DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤 U118MG（U-118MG） DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤 U87MG MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤+RFP U87MG+RFP MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

小鼠脑神经胶质母细胞 G422 DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠脑微血管内皮细胞株 bEnd.3 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S  

小鼠脑神经瘤细胞 neuro-2a MEM+10%FBS+1%P/S

小鼠脑神经瘤细胞荧光素酶标记 neuro-2a+luc MEM+10%FBS+1%P/S

大鼠脑胶质瘤细胞 C6 F12K +2.5%FBS+15%HS（马血清）+1%P/S

大鼠脑胶质瘤细胞绿色荧光标记 C6+LUC F12K +2.5%FBS+15%HS（马血清）+1%P/S

大鼠脑星形胶质细胞 CTX DMEM+10%FBS+1%P/S  

大鼠脑I型星形胶质细胞 CTX-TNA2 DMEM+10%FBS+1%P/S

大鼠脑间质细胞 DI TNC1 DMEM+10%FBS+1%P/S