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人胶质母细胞瘤T98G产品说明书
发布时间:2022-08-22 点击量:142

产品名称人胶质母细胞瘤T98G

细胞特性

1)来源:脑

2)形态:成纤维细胞,贴壁生长

3)含量:>1x106

4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

细胞用途:仅供科研使用。细胞接收后的处理

1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。

3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。

4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。                      

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备1640 培养基;优质胎牛血清,10%;P/S双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 冻存细胞的复苏::

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。

注意事项:

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。

人胶质母细胞瘤T98G

胶质母细胞瘤(Glioblastoma)

1.要点(Key concepts)

■胶质母细胞瘤(WHO IV级)又称为多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiform),是恶性程度高的星形细胞瘤。可以从弥漫性星形细胞瘤进展而来(继发性胶质母细胞瘤),也可以是没有低度恶性前期病变的原发性胶质母细胞瘤。后者更为常见。

■原发性胶质母细胞瘤多发生于老年人,平均年龄55岁,临床病史短,常常少于3个月;继发性胶质母细胞瘤则常发生于小于45岁的年轻人,病史较长,少则不到1年,多则10余年,平均4~5年。

■ 浸润性扩散是弥漫性星形细胞瘤的特点,而胶质母细胞瘤则可更迅速向周围脑组织扩散。常见的扩散途径是通过胼胝体、内囊、穹隆、前联合以及视放射直接蔓延,其他的扩散途径包括脑脊液、血管周围间隙。通过血源性转移到颅外罕见。

■ 多灶性(multifocal)和多中心(multicentric)胶质母细胞瘤的区别在于,前者常见,病灶相距较近,镜下见相互之间有关联;后者少见,病灶之间相距较远,镜下见病灶间无关联。

■ 巨细胞胶质母细胞瘤(giant cell glioblastoma)和胶质肉瘤(gliosarcoma)是胶质母细胞瘤的亚型,分别占胶质母细胞瘤的5%和2%。

2.概述(Brief introduction)

■ 占脑星形细胞肿瘤的60%~75%。

■ 好发于中年人,45-75岁多见,约80%患者年龄大于50岁。男性略多于女性,男女比为1.28:1。

■ 多发生于大脑半球皮质下白质区,根据发生频率从高到低依次为颞叶、顶叶、额叶和枕叶。肿瘤常常浸润到邻近皮质,或通过胼胝体侵犯到对侧大脑半球。儿童胶质母细胞瘤常位于基底节和丘脑。人高转移鼻咽癌细胞系 5-8F  1640+10%FBS+1%P/S    贴壁生长

人鼻咽癌细胞 C666-1 1640+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

人鼻咽癌细胞 NPC/HK-1 1640+10%FBS +1%P/S 贴壁生长

猪鼻甲黏膜成纤维细胞 PT-K75 DMEM+10%FBS+1%P/S 贴壁生长

人卵巢癌细胞 A2780 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S   

人卵巢癌细胞+GFP A2780+GFP 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%P/S  

人卵巢腺癌细胞 CAOV-3 DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞 CoC1  1640+10%FBS+1%P/S  

人卵巢透明细胞癌细胞 ES-2 McCOY's 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞 HEY DMEM+10%FBS+1%P/S  

人卵巢癌细胞 HEY A8 DMEM+10%FBS+1%P/S

人高转移卵巢癌细胞 HO-8910PM 1640+10%FBS+1%P/S

人正常卵巢上皮细胞系 IOSE-80(IOSE80;NFHIOSE-80;IOSE80UBC;IOSE-Van; IOSE-VAN) 1640+10%FBS+1%P/S

人卵巢颗粒细胞瘤细胞 KGN D/F12+10%FBS+1%P/S

人卵巢腺癌细胞 OVCAR-3 1640(含NaHCO3 1.5g/L)+20%FBS+1%P/S + 0.01mg/ml牛胰岛素

人卵巢癌细胞 SK-OV-3 Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

人卵巢癌细胞荧光素酶标记 SK-OV-3+LUC Mccoy`s 5A +10%FBS+1%P/S

小鼠卵巢上皮癌细胞 ID8 DMEM+10%FBS+1%P/S  

仓鼠卵巢细胞 CHO DMEM+10%FBS+1%P/S

仓鼠卵巢细胞,二氢叶酸还原酶缺陷 CHO/dhFr- IMDM+10%FBS+P/S1%+0.05mM次嘌呤+0.016mM胸腺嘧啶+100nM氨甲喋呤。

中国仓鼠卵巢细胞k1 亚克隆系 CHO-K1 F12K+10%FBS+1%P/S

中国仓鼠卵巢细胞k1 亚克隆系 CHO-K1(悬浮) CHO GROW CD2培养基+1%L-谷氨酰胺+1%P/S

中国仓鼠卵巢细胞 CTLA4 IG-24 DMEM+10%FBS+0.2mM脯氨酸+0.001mM氨甲蝶呤+1%P/S

仓鼠卵巢细胞 LEC-1 MEMα+10%FBS+1%P/S

人高转移肺癌细胞 95-D  1640+10%FBS+1%P/S

 人肺癌细胞 A549  F12K+10%FBS+1%P/S   

 人肺癌细胞+RFP A549+RFP F12K+10%FBS+1%P/S

 人肺癌细胞荧光素酶标记 A549+luc F12K+10%FBS+1%P/S

人肺癌细胞 Calu-1 MCCOY'S 5A+10%FBS+1%P/S  

人肺癌细胞 DMS 53 Waymouth's MB 752/1 medium (Invitrogen, 11220-035)+10%FBS+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 HCC827 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞荧光素酶标记 HCC827+LUC 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H1299 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%(10mM)HEPES +1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H1437 1640+10%FBS+1%丙酮酸钠+1%hepes+1%PS

人经典小细胞肺癌细胞 NCI-h1688 1640+20% FBS+1%P/S 细胞涨的慢2-3周发货

人肺癌细胞 NCI-H1703 1640+10% FBS+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H1944 1640+10%FBS++1%PS

人肺癌细胞 NCI-H2126 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺 +1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 NCI-H2228 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人肺癌细胞 NCI-H23 1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人肺癌细胞(淋巴结转移) NCI-H292 1640+10%FBS+1%P/S

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H358 1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌细胞 NCI-H446 1640+10%FBS+1%PS

人大细胞肺癌细胞 NCI-H460 [H460]  1640+10%FBS+1%P/S+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

人非小细胞肺癌细胞 NCI-H524  1640+10%FBS+1%P/S

人大细胞肺癌细胞 NCI-H661[h661]  1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌细胞 NCI-H82 1640+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1%P/S

人肺癌细胞 pc-9 1640+10%FBS+1%P/S

人小细胞肺癌 SBC-2  1640+10%FBS+1%P/S   

人小细胞肺癌细胞 SHP-77 1640+10FBS+1%L-谷氨酰胺+1%丙酮酸钠+1% PS

小鼠肺癌细胞 LLC DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠肺癌细胞荧光素酶标记 LLC+LUC DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑髓母细胞瘤细胞 D283 Med  MEM+10%FBS+1%P/S

人脑髓母细胞瘤细胞 D341 Med MEM+1%丙酮酸钠+1%NEAA+10%FBS+1%P/S  

永生化人脑微血管内皮细胞 HCMEC/D3 内皮细胞培养体系(PriMed-iCell-002)

人脑胶质瘤细胞 HS683 DMEM+15%FBS+1%P/S  

人脑胶质细胞瘤细胞 KNS-89 DMEM +10%FBS+1%P/S

人脑胶质瘤 SNB-19 DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑胶质瘤 TJ905 DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤 U118MG(U-118MG) DMEM+10%FBS+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤 U87MG MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

人脑星形胶质母细胞瘤+RFP U87MG+RFP MEM+10%FBS+1%L-谷氨酰胺+1%NEAA+1%P/S

小鼠脑神经胶质母细胞 G422 DMEM+10%FBS+1%P/S

小鼠脑微血管内皮细胞株 bEnd.3 DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)+10%FBS+1%P/S  

小鼠脑神经瘤细胞 neuro-2a MEM+10%FBS+1%P/S

小鼠脑神经瘤细胞荧光素酶标记 neuro-2a+luc MEM+10%FBS+1%P/S

大鼠脑胶质瘤细胞 C6 F12K +2.5%FBS+15%HS(马血清)+1%P/S

大鼠脑胶质瘤细胞绿色荧光标记 C6+LUC F12K +2.5%FBS+15%HS(马血清)+1%P/S

大鼠脑星形胶质细胞 CTX DMEM+10%FBS+1%P/S  

大鼠脑I型星形胶质细胞 CTX-TNA2 DMEM+10%FBS+1%P/S

大鼠脑间质细胞 DI TNC1 DMEM+10%FBS+1%P/S  

 

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