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告客户书:买来的WinSera血清需要过滤吗?
发布时间:2022-07-14 点击量:328

告客户书:买来的WinSera血清需要过滤吗?

 

WinSera血清使用前是否需要过滤?

本公司血清在ISO 13485认证的厂房中生产,经过3次0.1 μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常非常非常低(重要的事情说三遍)。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。

因此买来的血清不需要再次进行过滤。

几种血清的比较:

项目

等级

提取血清体积/只牛

成年牛血清(5-8L) > 小牛血清 (2L) > 国产胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L)

培养细胞的效果

胎牛血清 > 国产胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清

价格

胎牛血清 > 国产胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清

这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行细胞培养。

胎牛血清成分已知的已有上千多种,以下为主要成分表:

成分

浓度

成分

浓度

蛋白和多肽

-

磷脂

0.7-3.0 mg/ml

白蛋白

20-50mg/ml

丙酮酸

2-10 ug/ml

胎球蛋白

10-20mg/ml

碳水化合物

-

纤连蛋白

1-10 ug/ml

葡萄糖

0.6-1.2 mg/ml

球蛋白

1-15 mg/ml

乳酸

0.5-2.0 mg/ml

α-抗胰蛋白酶

0.5-2.5 mg/ml

多胺

-

转铁蛋白

2-4 mg/ml

丁二胺,亚精胺

0.1-1.0 uM

生长因子

-

尿素

170-300 ug/ml

EGF, PDGF, IGF-I, IL-1

1-100 ng/ml

无机物

-

氨基酸

 0.01-1.0 uM

钙,氯化物,钾,磷

-

脂质

-

激素

-

胆固醇

10 uM

胰岛素

1-100 ng/ml

脂肪酸

0.1-1.0 uM

皮质醇

10-200 nM

亚油酸

0.01-0.1 uM

维生素 

10 ng-10 ug/ml

导致细胞污染的原因主要有以下几方面:

环境:水浴锅、培养箱水盘、细胞培养箱内壁、超净台、桌面及试剂瓶身、细胞房空气消毒。

操作:细胞复苏、传代、冻存等过程中也可带入污染。

试剂:血清、基础培养基、胰酶、辅助试剂、营养添加物等。

耗材:培养皿或培养瓶、枪头。

细胞本身:本身携带污染、细胞老化、分化等。


WINSERA®胎牛血清

货号

规格

库存状态

优级

FBS500-WS-002

500ML

现货

特级

FBS500-WP-002

500ML

现货

ES级别

FBS500-WE-002

500ML

现货

无外泌体血清

FBS050-EXO

50ML

现货

如何进行污染源排查?

血清:其他试剂保持不变,仅更换血清。

基础培养基:其他试剂保持不变,仅更换基础培养基。

PBS:其他试剂保持不变,仅更换PBS。

胰酶:若细胞复苏的很好,一传代就污染,可以尝试其他试剂保持不变,更换消化用胰酶,看细胞状态。

细胞反复复苏都会出现污染,那可保持培养体系不变,培养其他类型且适用于此培养体系的细胞,观察是否有污染出现。整个营养体系:基础培养基、血清、营养添加物都可使用控制变量法进行排查。


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