收集肿瘤细胞外泌体

外泌体的研究离不开细胞培养。以肿瘤相关外泌体研究为例，目前，收集肿瘤细胞外泌体主要有两种方法：

方法一

使用正常培液养细胞再换无血清培液收外泌体。

方法二

直接使用exosome-free FBS配制培养基用于培养细胞收外泌体。

首先，就是基本的离心条件了，目前超离比较好的就是贝克曼或者日立的了，这两家超离在行业内算是翘楚了。其次就是离心参数了：120000 g，4℃，离心14h，离心结果如图：

1：离心后，血清外泌体会富集在管底和管壁；

2：吸取血清时，只吸取澄清部分的血清，并且远离上图中标记的区域；

3：吸取70-80%的澄清的血清；（注意：动作慢，动作轻）

4：其余的浑浊血清留作正常细胞的的营养物添加使用，避免浪费。

5：如果觉得纯度不够，再把离心后收集的血清做二次超速离心。

6：针对超速离心后的血清，必须进行粒径检测（离心前样品和离心后样品），该数据可以放到文章补充材料中，用来证明无血清外泌体制备成功。