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胎牛血清注意事项
发布时间:2022-03-30 点击量:182

胎牛血清注意事项


如果不能短期内使用完毕,解冻后请适当分装。血清结冰时体积会增加约10%,因此在分装血清时须使分装瓶预留一定体积空间,否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。
热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中需有规则地摇晃均匀。热处理的目的是灭活血清中的补体(complement)。除非必须,一般不推荐对血清进行热处理。因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与的反应有:细胞毒作用、平滑肌细胞收缩、肥大细胞和血小板释放组胺、增强吞噬作用、促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化等。
瓶装血清解冻需采用缓慢解冻法:把在-15 ~ -40℃低温冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解冻约1天,待全部解冻后再分装。在解冻过程中每隔约2小时可轻轻摇晃均匀(尽量避免产生气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃或更低 温度进入37℃水浴解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀,从而使用血清的质量下降。
血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可不用处理。如果必须要处理,可400g离心5分钟去除。但不宜过滤去除,因为絮状物可能阻塞滤膜。
经过热处理的血清中沉淀物会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察像“小黑点",而且由于这些“小黑点"的布朗运动在显微镜下被放大,感觉是在游动,所以经常被误认为血清被微生物污染。通常这些小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清存在微生物污染,则应立即停止使用,更换另一批次的血清。可将适量血清用培养液稀释至10%浓度后培养1-3天,观察小黑点是否急剧增多,或取适量血清在LB平板上涂板培养观察是否产生菌落,以确定是否存在微生物污染。
请勿将血清在37℃放置过长时间,否则血清会逐渐变浑浊,同时血清中的有效成分也会逐渐失活而影响血清质量。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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