细胞培养中的“黑点”

培养中常出现一些黑点，是污染吗？首先肉眼观察培养液是否变浑浊，如果变浑浊，基本可以确定是污染；如果肉眼观察培养液没有变浑浊：在显微镜下观察黑点大小和形状是否规则，是否运动，是做布朗运动还是呈直线型快速移动。如果黑点大小不规则，做布朗运动，黑点可能是细胞碎片（可能是细胞状态不佳或者消化过度引起的），也可能是血清反复冻融产生的蛋白沉淀引起的，也可能是细胞的代谢产物。如果黑点大小一致，快速移动，很可能是细菌污染。如何预防细胞培养中黑点的产生?掌握细胞传代的最佳时机，不要细胞长老了再...

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购买细胞注意事项

购买的细胞死亡或细胞存活率不佳研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久。细胞抱团怎么处理？一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细...

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胎牛血清品质的正确认识

胎牛血清品质的正确认识1）胎牛血清是品质高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少；2）应取自剖腹产的胎牛，新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛；3）由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清的解冻正确方法胎牛血清的正确存放与解冻是各位实验家尤为关注的一个问题，在保证质量的前提下...

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ELISA试剂盒常见问题

ELISA试剂盒常见问题01问：看说明书里，如果样本浓度高，可以不用稀释，直接加原液。这个直接加血清原液，你们自己亲自做过吗？因为之前我们用别家的，他们说明书里，加样是：10微升样品加40微升样品稀释液。咨询他们如果如果浓度高，可以加原液吗？他们说可以，可能他们没做过，说可以。可我们做了，不可以。问他们，又说是可能离子浓度不够。答：ELISA试剂盒检测范围是固定的，样本是否稀释是根据样本实际浓度来选择的，但前提条件样本要落在检测范围内，浓度高于检测范围，稀释样本达到检测范围内...

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ELISA试剂盒代测之 固体样本处理问题

固体样本处理问题01组织样本操作流程：1、组织样本必须保持鲜重，如果是冻存的组织，应该室温平行2小时以上，然后用生理盐水冲洗干净，再用滤纸把周围的水分吸干，称重！组织重量不能低于50mg。2、组织匀浆液选取是PBS（PH=7.2-7.4，浓度为0.01mol/L）匀浆的比例为1:10，相当于1g组织加9ml的匀浆液。3、组织匀浆后，离心取上清，离心转数为5000转，但不能超过5000转，时间为15分钟。4、实验中老师样本提取的是200mg的样本加1.8ml的匀浆液。02土壤样...

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细胞培养中出现黑点是是什么 ? 如何处理?

细胞培养中出现黑点是是什么?如何处理?1.一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸；(2)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；(3)培养原代细胞中出现小黑点，可...

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胎牛血清和新生牛血清的有何区别，如何选择？

胎牛血清和新生牛血清的有何区别，如何选择？两者所含的促细胞因子、促贴附因子、IgG等其他活性物质等组分与比例均有不同，进口和部分国产胎牛血清通过心脏穿刺采血，而还有部分国产胎牛血清采自出生后8小时内的胎牛血。Cell-Box采血工作人员经过长达18个月以来的血源地筛选，通过一系列指标检测及试验对照，以极其苛刻的标准要求精选了国内外优质的血源地，并签署了合作协定。每批次血清经过批量混合后，连续3级0.1um精过滤制成。在定量灌装后，又通过一系列的指标检测、多种细胞的培养测试和符...

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细胞培养中出现黑点是污染吗 ? 如何处理?

1.一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸；(2)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长；(3)培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除...

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