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细胞培养过程中应该注意哪些问题?#1细胞培养步骤一般包括:解冻、培养、分盘、冻存。基本上都遵循这个步骤,细胞转染过程,我们往往发生在步骤3,在做细胞功能性实验时,往往在步骤2,解冻和冻存就是细胞的储藏和分离的过程。#2首先我们要获得细胞,一般受大家比较认可的细胞库有1962年ATCC建立的CELLLINES、中科院、DSMZ等机构。#3细胞解冻要求37度快速解冻,另外就是注意不同细胞的培养条件。#4同规格培养器皿所需要的细胞生长密度也不同,如下图:#5细胞生长会产生各种代谢废...
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耐药株是怎样炼成的?近年来,恶性肿瘤(癌症)已经成为严重威胁中国人群健康的主要公共卫生问题之一。为什么癌症容易复发,很难治愈呢?因为绝大部分抗肿瘤药物,最终都逃不过肿瘤细胞产生耐药性的命运,导致癌症继续发展。对于肿瘤细胞耐药的产生原因仍然处在研究之中,如何改善肿瘤细胞对化疗药物耐药依然是目前研究的热点和难点。01什么是耐药性?化疗是治疗恶性肿瘤的方法中有效的手段之一,指用化学药物的方法杀死肿瘤细胞。常用的药物包括细胞增殖的抑制剂、DNA损伤修复途径的抑制剂,如阿霉素(adri...
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小鼠视网膜神经节细胞RGC-5培养小技巧简介:培养条件:1640+10%FBS+1%P/S生长状态:贴壁生长不能“一放了之”。水在低于零度的条件下会结冰。将细胞悬浮在溶液中,随着温度降低,细胞外部的水分会首先结冰,所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏而引起细胞死亡;未结冰的溶液中电解质浓度升高,如果将细胞暴露在这样高溶质的溶液中且时间过长,细胞膜上脂质分子会受到损坏,细胞便发生渗漏,因此复温时大量水分会进入细胞内,造成细胞死亡。如果在溶液中加入冷冻保护剂,则可保护细胞免受溶...
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小鼠淋巴瘤细胞YAC-1培养技巧培养条件:1640+10%FBS+1%P/S生长状态:悬浮冻存细胞,不能“一放了之”。水在低于零度的条件下会结冰。将细胞悬浮在溶液中,随着温度降低,细胞外部的水分会首先结冰,所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏而引起细胞死亡;未结冰的溶液中电解质浓度升高,如果将细胞暴露在这样高溶质的溶液中且时间过长,细胞膜上脂质分子会受到损坏,细胞便发生渗漏,因此复温时大量水分会进入细胞内,造成细胞死亡。如果在溶液中加入冷冻保护剂,则可保护细胞免受溶质损伤和...
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正常小鼠睾丸Sertoli细胞TM4培养条件:DMEM/F12+2.5%FBS+5%马血清+1%P/S生长状态:贴壁生长冻存细胞,不能“一放了之”。水在低于零度的条件下会结冰。将细胞悬浮在溶液中,随着温度降低,细胞外部的水分会首先结冰,所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏而引起细胞死亡;未结冰的溶液中电解质浓度升高,如果将细胞暴露在这样高溶质的溶液中且时间过长,细胞膜上脂质分子会受到损坏,细胞便发生渗漏,因此复温时大量水分会进入细胞内,造成细胞死亡。如果在溶液中加入冷冻保护...
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小鼠杂交瘤(抗CD2)细胞OKT11培养条件:IMDM+20%FBS+1%PS生长状态:悬浮生长冻存细胞,不能“一放了之”。水在低于零度的条件下会结冰。将细胞悬浮在溶液中,随着温度降低,细胞外部的水分会首先结冰,所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏而引起细胞死亡;未结冰的溶液中电解质浓度升高,如果将细胞暴露在这样高溶质的溶液中且时间过长,细胞膜上脂质分子会受到损坏,细胞便发生渗漏,因此复温时大量水分会进入细胞内,造成细胞死亡。如果在溶液中加入冷冻保护剂,则可保护细胞免受溶质...
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小鼠乳腺癌细胞荧光素酶标记4T1+luc培养条件:1640+10%FBS+1%P/S生长状态:贴壁生长冻存细胞,不能“一放了之”。水在低于零度的条件下会结冰。将细胞悬浮在溶液中,随着温度降低,细胞外部的水分会首先结冰,所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏而引起细胞死亡;未结冰的溶液中电解质浓度升高,如果将细胞暴露在这样高溶质的溶液中且时间过长,细胞膜上脂质分子会受到损坏,细胞便发生渗漏,因此复温时大量水分会进入细胞内,造成细胞死亡。如果在溶液中加入冷冻保护剂,则可保护细胞免...
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