SIGMA胎牛血清|F2442-500ml

名称：胎牛血清

货号：F2442-500ML

品牌：SIGMA

干细胞是在所有多细胞生物中发现的原始细胞。

它们保留了通过有丝分裂细胞分裂来更新自身的能力，并且可以分化成多种专门细胞类型。

哺乳动物干细胞的三大类是：源自胚泡的胚胎干细胞，在成人组织中发现的成年干细胞和在脐带中发现的脐带血干细胞。

在发育中的胚胎中，干细胞可以分化为所有专门的胚胎组织。

在成年生物中，干细胞和祖细胞可作为人体的修复系统，补充专门的细胞。

由于干细胞可以通过细胞培养而生长并转化为具有与诸如肌肉或神经等各种组织的细胞一致的特性的特化细胞，因此提出了将其用于医学治疗中。

特别是，胚胎细胞系，通过治疗性克隆产生的自体胚胎干细胞以及来自脐带血或骨髓的高可塑性成年干细胞被吹捧为有前途的候选者。

医学研究人员认为，干细胞疗法有可能从根本上改变人类疾病的治疗方法。

已经存在许多成人干细胞疗法，尤其是用于治疗白血病的骨髓移植。

在干细胞研究中，有时需要体外培养和分析细胞。细胞要养好，就要用好血清，如Ausbian品牌特级进口胎牛血清，它的内毒素小于3Eu/ml，使细胞更健康，客户做实验更加顺利。

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12、使用胰蛋白酶加入EDTA是为什么?

EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前，用EDTA清洗细胞，以消除来自培养基中所有的二价离子。

13、可否使用与原先不同的培养基?

不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应的细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，易造成细胞状态不好，最终造成细胞无法存活。

14、可否使用与原先不同的血清种类?

不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。

15、细胞为何生长不均匀?

细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致16、购买的细胞死亡或细胞存活率不佳

研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久。

17、细胞抱团怎么处理?

一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15 ml离心管中，静置20 min左右，小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。

18、细胞内有空泡，是否是正常现象?

部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等)，这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较高，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。

19、细胞传两代后开始逐渐死亡的原因

很可能是培养体系不适合细胞(未使用推荐的培养体系);或者消化过度，对细胞有严重影响;或者是传代比例不合适(具有密度依赖性的细胞，传代太稀;或者生长较快的细胞，传代较密，细胞严重堆叠生长)。

20、细胞生长逐渐变慢是什么原因?

细胞增殖变慢有以下原因：1. 消化过度 2. 传代过密 3.细胞营养不良 4.细胞频繁传代 5.细胞状态不佳或老化 6.细胞存在污染。

21、培养细胞时应使用5%或10%CO2?

一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7 g时，细胞培养时应使用10% CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5 g时，则应使用5% CO2培养细胞。

22、CO2培养箱之水盘如何保持清洁?

定期(每周一次)更换水盘里面的水，水盘的水必须使用无菌蒸馏水或无菌去离子，水盘中可添加1%硫酸铜以预防霉菌污染。

23、细胞接种密度多少合适?

依照细胞株基本数据上的接种密度或稀释分盘的比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长的一个重要原因。按照我们的经验：一般倍增时间24 h内的细胞，传代比率1:6-1:12为宜，倍增时间24-48 h的细胞，传代比率1:3-1:8为宜，倍增时间超过48h的细胞, 传代比率1:2-1:4为宜。

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人胰腺癌细胞 PATU8988S

人前列腺癌 PC-3

人肺癌细胞 pc-9

人胰腺导管腺癌细胞 PL45

人肝癌细胞 PLC/PRF/5

人胚肾细胞 ProPakA.6

人正常肝细胞 QSG-7701

人淋巴瘤细胞 Raji

人B淋巴瘤细胞 RAMOS RA1

人肝胆管癌细胞 RBE

人横纹肌肉瘤细胞 RD

人急性非B非T淋巴细胞白血病细胞 REH

人子宫内膜癌细胞 RL95-2

人多发性骨髓瘤细胞 RPMI8226

人结肠腺癌细胞 RKO

人膀胱移行细胞乳头瘤 RT4

人前列腺正常细胞 RWPE-1

人前列腺正常细胞 RWPE-2

人小细胞肺癌 SBC-2

人膀胱鳞癌细胞 SCaBER

人神经母细胞瘤细胞 sh-sy5y

人神经母细胞瘤细胞 sh-sy5y转染突变型

人神经母细胞瘤细胞 sh-sy5y转染野生型

人子宫颈鳞癌细胞 SIHa

人乳腺癌细胞 SK-BR-3

人乳腺癌细胞 SK-BR-3+IUC

人肝腹水腺癌细胞 SK-HEP-1

人低分化肺腺癌细胞 SK-LU-1

人皮肤黑色素瘤细胞 SK-MEL-2

人皮肤黑色素瘤细胞荧光素酶标记 SK-MEL-2+LUC

人肺鳞癌细胞 SK-MES-1

人神经上皮瘤细胞 SK-N-MC

人肾母细胞瘤细胞 SK-NEP-1

人神经母细胞瘤细胞 SK-N-SH

人卵巢癌细胞 SK-OV-3

人卵巢癌细胞荧光素酶标记 SK-OV-3+LUC

人肝癌细胞 smmc-7721

人脑胶质瘤 SNB-19

人肝癌细胞 snu-1

人肝癌细胞 Snu-182

人膀胱上皮永生化细胞 sv-huc-1

人滑膜肉瘤细胞 SW982 [SW-982]

人结肠腺癌细胞 SW1116

人肾上腺皮质小细胞癌细胞 SW-13

人肾上腺皮质小细胞癌细胞 SW1353

人胰腺癌细胞 SW1990

人结肠腺癌细胞 SW480

人甲状腺癌细胞 SW579

人结直肠腺癌细胞 SW620

人结直肠腺癌细胞+GFP SW620+GFP

人结直肠癌细胞氟尿嘧啶耐药株 SW620/5FU

人膀胱移行细胞癌 SW780

人膀胱移行细胞癌细胞 T24

人乳腺导管癌细胞 T47D

人胶质母细胞瘤 T98G

人食管癌细胞 TE-1

人食管癌细胞 TE-12

人单核细胞白血病细胞 thp-1

人脑胶质瘤 TJ905

人乳头状甲状腺癌细胞株 TPC-1

24、培养中常出现一些黑点，是污染吗?

首先肉眼观察培养液是否变浑浊，如果变浑浊，基本可以确定是污染;如果肉眼观察培养液没有变浑浊：在显微镜下观察黑点大小和形状是否规则，是否运动，是做布朗运动还是呈直线型快速移动。如果黑点大小不规则，做布朗运动，黑点可能是细胞碎片(可能是细胞状态不佳或者消化过度引起的)，也可能是血清反复冻融产生的蛋白沉淀引起的，也可能是细胞的代谢产物。如果黑点大小一致，快速移动，很可能是细菌污染。

25、如何预防细胞培养中黑点的产生?

掌握细胞传代的最佳时机，不要细胞长老了再传代;掌握好消化时间，防止消化过度产生细胞碎片;减少血清等试剂的冻融次数;将培养液的PH调到最佳;严格控制水质和器皿的清洁。26、黑点已经产生了，如何进行处理?

如果判定黑点是污染，请及时将细胞处理后丢弃。其他情况，可参照以下进行：

如果是悬浮细胞：收集细胞上清慢速离心(500-600 rpm/min，5-6 min)并更换新的培养瓶;如果是贴壁细胞：将细胞用PBS洗2-3遍，洗的时候，轻轻拍打培养瓶，让贴壁不牢的碎片和颗粒脱落，再弃去PBS，消化时先加低浓度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右，让细胞间隙中的颗粒和碎片脱落下来，去掉低浓度胰酶，然后正常消化细胞，将收集的细胞悬液慢速离心(500-600 rpm/min，5-6 min)并更换新的培养瓶，并可以尝试适当增加血清浓度进行培养。

27、培养用dish,flask是否相同？

不同厂牌的dish或flask，其所coating的polymer不同，制造程序亦不同，虽对大部分细胞没有太大之影响，惟少数细胞则可能因使用厂牌不同之dish或flask而有显著之生长差异。

 

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