细胞名称:人胰腺神经内分泌肿瘤细胞永生化
培养条件:肿瘤细胞培养体系
生长状态:贴壁生长
备注:原代细胞永生化,提供免疫荧光鉴定报告
人源 肺微血管内皮细胞
人源 II型肺泡上皮细胞
人源 气管上皮细胞
人源 气管平滑肌细胞
人源 支气管上皮细胞
人源 支气管平滑肌细胞
人源 肺成纤维细胞
人源 肺动脉内皮细胞
人源 肺动脉平滑肌细胞
人源 心肌细胞
人源 主动脉内皮细胞
人源 心肌成纤维细胞
人源 心脏微血管内皮细胞
人源 主动脉瓣膜间质细胞
人源 冠状动脉内皮细胞
人源 冠状动脉平滑肌细胞
人源 颈动脉内皮细胞
人源 颈动脉平滑肌细胞
人源 食管上皮细胞
人源 食管平滑肌细胞
人源 食管成纤维细胞
人源 胃粘膜上皮细胞
人源 胃平滑肌细胞
人源 胃成纤维细胞
人源 小肠粘膜上皮细胞
人源 小肠平滑肌细胞
人源 小肠成纤维细胞
人源 结肠粘膜上皮细胞
人源 结肠平滑肌细胞
人源 结肠成纤维细胞
人源 胆囊上皮(永生化)细胞
人源 胆囊上皮细胞
人源 肝内胆管上皮细胞
人源 肝外胆管上皮细胞
人源 肝实质细胞
人源 肝星状细胞
人源 肝窦内皮细胞
人源 肝Kuffer细胞
人源 直肠成纤维细胞
人源 肝成纤维细胞
人源 直肠上皮细胞
人源 直肠平滑肌细胞
人源 胆囊微血管内皮细胞
人源 胆囊成纤维细胞
人源 胆囊平滑肌细胞
人源 胆囊动脉内皮细胞
人源 食管癌细胞
人源 食管纤维瘤细胞
人源 肾小管上皮细胞
人源 肾小球系膜细胞
人源 肾小球内皮细胞
人源 肾足细胞
人源 输尿管上皮细胞
人源 输尿管平滑肌细胞
人源 膀胱上皮细胞
人源 膀胱平滑肌细胞
人源 膀胱成纤维细胞
人源 前列腺上皮细胞
人源 前列腺成纤维细胞
人源 输卵管成纤维细胞
人源 甲状腺上皮细胞
人源 甲状腺成纤维细胞
人源 胰腺星状细胞
人源 胰岛细胞
人源 肾上腺皮质细胞
人源 肾上腺包膜成纤维细胞
人源 扁桃体动脉内皮细胞
人源 扁桃体动脉平滑肌细胞
人源 腮腺肿瘤细胞
人源 扁桃体间质细胞
人源 颌下腺囊肿细胞
人源 甲状腺微血管内皮细胞细胞培养问题----沉淀
当排除了污染后,细胞培养基的浑浊通常可以解释为金属、蛋白质和其他培养基成分的沉淀。沉淀物可能对细胞健康有害,因为他们可能通过整合作用等过程去除营养物质和其他需要的成分,从而改变培养基成分。
沉淀的原因
温度变化
温度是细胞培养中沉淀的主要原因之一。当暴露于端温度变化时,高分子量的血浆蛋白会从溶液中沉降。热失活和冻融循环会促进蛋白质的变性和沉淀。由于液体或复溶培养基在每次使用之间保持冷藏状态,盐可能会沉淀出来,特别是10倍或其他浓缩液中析出。
失水引起的浓度变化
如果培养基存在蒸发,培养基组分(包括盐)的浓度将增加。在培养基的表面特别容易形成晶体沉淀。
钙盐
在制备无血清培养基时,组分的添加顺序可能会导致不溶性分子的形成。钙盐特别容易沉淀。例如,CaCl2和MgSO4在溶液中反应形成CaSO4晶体。高压灭菌和pH值不稳定可能会加剧这一问题。
金属元素补充剂
铜、铁和锌金属元素是细胞生长所必需的,是无血清培养基的重要补充剂。其他血清成分的缺失可能会导致这些金属在培养基中沉淀,产生一个对细胞有毒的环境。铜和锌在氧化条件下更加容易沉淀。
污染
培养基浑浊可能是细菌或真菌污染造成的。
细胞培养中对沉淀的故障排除
温度
有关培养基的最佳储存和处理,应参阅制造商指南。避免重复的冻融循环。
钙盐
在逐个加入其他培养基组分之前,先将CaCl2单独溶解在去离子水中。
湿度
确保烧瓶和培养皿不存在蒸发。监测培养箱的湿度,密封培养器皿,防止干燥。
其他金属
加入铁结合蛋白转铁蛋白可防止铁在培养基中沉淀。
污染
丢弃被污染的细胞并对培养箱体进行消毒。遵循良好的实验室措施以避免污染。
有目的的沉淀
尽管通常在细胞培养中不希望有沉淀,但是沉淀可以用作上清液中蛋白质的纯化策略。例如,硫酸铵沉淀法有时被称为“盐析"技术,用于从杂交瘤上清液或血清中纯化抗体。
细胞培养做为生物学研究最基础的技术之一,可以说是渗透科研界的方方面面。工欲善其事,必先利其器。细胞好不好,就看你懂不懂细胞培养的各种技术了。
❤ 原代培养
从原代组织中分离细胞的常用的方法是酶解法(胰蛋白酶和胶原酶)。
用无菌的解剖刀和剪子将组织剪成3~4mm小片,用平衡液(无钙镁离子)清洗组织碎片后去除上清液,并加入0.25%的胰蛋白酶(Trypsin,100mg组织加入1ml胰蛋白酶)或者胶原酶(Collagenase,50~200单位/ml),孵育4-18h。离心取上清后,用平衡液清洗几次后,用*培养基悬浮细胞,进行培养。
❤ 传代培养
依据细胞生长的特点,传代方法有3种:
1. 悬浮生长细胞传代(离心法)
将悬浮细胞离心(1000 rpm, 3 min)去上清,收集沉淀物加新培养基,混匀后进行传代培养。
2. 半悬浮生长细胞传代(直接吹打法)
3.此类细胞(如Hela细胞)部分贴壁,但黏贴不牢,可用直接吹打法使细胞从瓶壁上脱落下来,进行传代。
3. 贴壁生长细胞传代(酶消化法)
去除瓶内培养液后,加入1-2ml 0.25%的胰蛋白酶液(以消化液覆盖整个瓶底为准)37℃静置2-10min(显微镜下动态监测)。移去蛋白酶液,加入培养液反复吹打瓶壁细胞,离心将细胞沉淀用培养液制成细胞悬液。吸取1/10—1/40细胞悬液,接种于含有适量新鲜培养液的新培养瓶中进行传代培养。
......
细胞培养是一个不断进步的过程,在平时做好积累,量变才会有质变。
人胰腺神经内分泌肿瘤细胞永生化,细胞状态良好,发货速度快,有需要联系苏州千舍销售!
相关同类产品: |
上一篇:人胆囊上皮细胞永生化+GFP
下一篇:人风湿性关节滑膜成纤维细胞永生化