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人非小细胞肺癌细胞NCI-H524

人非小细胞肺癌细胞NCI-H524

产品型号: NCI-H524

所属分类:热卖细胞

产品时间:2020-03-10

简要描述:人非小细胞肺癌细胞NCI-H524
我司主要经营产品是国内传代细胞和细胞培养相关的生物试剂。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI无外泌体血清等高品质血清。常规液体培养基、胰酶、双抗、无血清冻存液、日本三菱产品、ELISA 试剂盒等产品。售后完善,我们以饱满的热情欢迎新老客户选购!

详细说明:

产品名称:人非小细胞肺癌细胞NCI-H524    

细胞规格:1-3×10^6细胞量

库存状态:现货

培养RPMI-1640+ 10% FBS

运输方式:常温顺丰运输和干冰顺丰运输

货 期:复苏细胞需要1-2周,冻存细胞的需要3-5天(特殊情况会有说明)

质 控:无支原体、无污染、符合标准

研究范围:仅供科研使用

人非小细胞肺癌细胞NCI-H524     

我司主要经营产品是国内传代细胞和细胞培养相关的生物试剂。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI无外泌体血清等高品质血清。常规液体培养基、胰酶、双抗、无血清冻存液、日本三菱产品、ELISA 试剂盒等产品。售后完善,我们以饱满的热情欢迎新老客户选购!

我司以客户为核心,以产品质量求生存,以售后服务求信誉。我们通过不断改进来提高效率,绝不以牺牲品质作为代价。“诚信、创新、严谨、专业”愿以饱满的热情期待各界朋友携手合作,共创辉煌!

细胞培养步骤

1. 剪切组织 先将所取得的组织,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手术镊去除黏附的结缔组织等非培养所需组织。再次清洗后,用手术刀将组织切成若干小块,移入青霉素小瓶或小烧杯中,加入适量缓冲液,用弯头眼科剪,反复剪切组织,直到组织成糊状,约1mm3大小。静置片刻后,用吸管吸去上层液体,加入适当的缓冲液再清洗一次。

2. 消化分离 消化分离的目的是将细小的组织块消化分离成细胞团或分散的单个细胞,以利于进一步的培养,常用的消化酶有胰蛋白酶和胶原酶。

3. 培养 细胞悬液用计数板进行细胞计数。用培养液将细胞数调整为(2~5)×105 细胞/毫升,或实验所需密度,分装于培养瓶中,使细胞悬液的量以覆盖后略高于培养瓶底部为宜。置CO2培养箱内,5%CO2,37℃静置培养。一般3~5d,原代培养细胞可以黏附于瓶壁,并伸展开始生长,可补加原培养液量1/2的新培养液,继续培养2~3d后换液,一般7~14d可以长满瓶壁,进行传代。

细胞培养注意事项

(1)无菌操作:细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因,必须加强各个环节的无菌操作观念,以预防为主,一旦污染,一般很难消除。

(2)培养液:所用的培养液必须满足细胞生存和生长的必要条件。由于细胞来源的动物种类、组织类型不同,对培养液的要求有一定的差异,必要时可用预实验的方法选择适当的培养液。

(3)血清:血清对于维持培养细胞的生存和促进细胞增殖起着关键性作用。可选择多种不同批号的血清进行小样分析。一旦确定某一厂家的某一批号血清后,就保持应用至实验完成。

(4)胶原酶溶液:必须新鲜配制,贮存时间过长(即使是-20℃低温保存),也将影响消化效力,导致消化时间过长,细胞损伤增加。

(5)L-谷氨酰胺:几乎所有细胞对谷氨酰胺都有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞会因生长不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,加有谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱贮存两周以上时,就应重新加入原来量的谷氨酰胺。

(6)静置培养:原代细胞在消化分离后,置于CO2培养箱的头24~48h (必要时72h)内,应处于绝对静置状态,切忌不时地取出培养瓶观察生长状况,这将使原代分离细胞难以贴壁,更谈不上伸展和增殖,初学者尤应注意。不必担心培养液中的营养成分会消耗光,在细胞增殖之前对营养的要求并不大。原代培养初期仅加一薄层培养液的目的也在于有利于细胞贴壁伸展。

细胞培养实验中不可或缺的除了培养基,胰酶也是非常重要的一个角色,虽然细胞培养试验基本技术大同小异,每种细胞的培养条件各不相同,但是,在细胞传代过程中都少不了这个步骤—胰酶消化。

细胞培养过程中为什么要使用胰酶呢?胰酶的作用是什么?

胰酶是一种蛋白酶,酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基端肽链,通过在特定位置上降解蛋白,使细胞膜上与培养皿壁结合处蛋白降解,从而使两者分离。这时,细胞由于自身内部细胞骨架的张力以及培养液表面张力可成为球形。

使用胎牛血清培养细胞,在使用胰酶消化时发现血清可以终止此过程,这是什么原因?

血清终止的原理其实是竞争抑制,就是用过量的牛血清中含有的蛋白和胰酶结合,使胰酶失去消化细胞蛋白的机会。

为什么使用了胰蛋白酶消化,细胞还是成团的,这可能是什么原因导致的?

消化时间不够 ② 吹打力度不够 ③ 胰酶消化液浓度不够 ④ 细胞密度过高之后才消化传代 ⑤ 胰酶存储不当,或者使用了过期胰酶

胰酶分装冻存时要注意什么?

胰酶分装时尽量分装成多瓶,并遵守3次左右用完和只装2/3体积的原则。因为冷冻保存时体积会膨胀,多次使用同一瓶胰酶反复冻融会降低消化效果并增大污染的可能性。

怎么才能判断胰酶消化完全?

注意:不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才表示消化好了。

一般肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙状移动就可以了,就应该停止消化。

胰酶适用于哪些细胞消化?它的消化效果与哪些有关呢?

胰酶适用于消化细胞间质较少的软组织和传代细胞,如胚胎、上皮、肝、肾等组织,但对纤维性组织和较硬的癌组织效果较差。胰酶的消化效果主要与pH值、温度、胰酶浓度、组织块大小和硬度有关。

胰酶中的酚红有哪些作用?

酚红在培养基中被用来作为pH指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明:酚红可以模拟固醇类激素(特别是雌激素)的作用。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,建议用不含酚红的培养基。由于酚红干扰检测,在做流式细胞检测时,也会使用不含酚红的培养基或者胰酶。

在做细胞凋亡检测时,细胞为什么不能用含有EDTA的胰酶消化?

Annexin V(膜联蛋白)是Ca2+依赖的蛋白,EDTA会螯合Ca2+从而影响Annexin V,进而影响结果,因此需选用不含EDTA的胰酶。建议放入培养箱中进行消化,时间可以长一点。随时观察细胞情况,避免消化过度;也可使用细胞刮刀将细胞刮下,后用枪吹匀,比消化简单,还可避免使用胰酶带来的伤害。

 

MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐药株

HCT8/5-fu 人回肠直肠腺癌细胞五氟尿嘧啶耐药株

LOVO/5-FU 人结肠癌细胞五氟尿嘧啶耐药株

HCT116/L人结肠癌奥沙利铂耐药细胞

HL60/ADR人早幼粒急性白血病细胞耐阿霉素株

PC9GR(PC9R)人肺癌细胞耐吉非替尼

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HELA/DDP人宫颈癌耐顺铂细胞株

3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞

NIH/3T3小鼠胚胎细胞

Raw264.7小鼠单核巨噬白血病细胞

B16-F10小鼠黑色素瘤高转细胞

B16 小鼠黑色素瘤细胞

CT26.WT小鼠结肠癌细胞

SV40 MES 13小鼠肾小球系膜细胞

F9 小鼠畸胎瘤细胞

MLE-12 小鼠肺泡上皮细胞

Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤细胞

BV2 小鼠小胶质细胞  

DC2.4小鼠树突状细胞

U14 小鼠子宫颈癌细胞

M-NFS-60小鼠骨髓性白血病细胞

mMSC小鼠骨髓间充质干细胞

HL-1小鼠心肌细胞

TM3 小鼠睾丸间质细胞

k7m2.wt小鼠骨肉瘤成骨细胞

mc3t3 e1小鼠胚胎成骨细胞前体细胞

hepa1-6 小鼠肝癌细胞

SP2/0小鼠骨髓瘤细胞

HT22小鼠海马神经元细胞系

MC38小鼠结肠癌细胞

mpc5小鼠足细胞

4T1 小鼠乳腺癌细胞

ANA-1小鼠巨噬细胞

TM4 小鼠睾丸支持细胞

STO 小鼠胚胎成纤维细胞

bend.3 小鼠脑微血管内皮细胞

J774A.1小鼠单核巨噬细胞

H9C2 大鼠心肌细胞

PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化)

PC-12(高分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)

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Duckembyro 鸭胚胎成纤维细胞

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Hep3B人肝癌细胞

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U266 人骨髓瘤细胞

VCAP 人前列腺癌细胞

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ES-2 人卵巢透明细胞癌细胞

NCI-H1650人非小细胞肺癌细胞

H460 人大细胞肺癌细胞

HACAT 人永生化角质形成细胞

HCT116 人结肠癌细胞

HEK293 人胚肾细胞

HEPG2 人肝癌细胞

HGC27 人胃癌细胞(未分化)

HT-29 人结肠癌细胞

HUVEC 人脐静脉内皮细胞

KYSE150人食道癌细胞

L02(HL7702)人正常肝细胞  

LOVO 人结肠癌细胞

MCF-10A人正常乳腺上皮细胞

MCF7人乳腺癌细胞

LX-2 人肝星状细胞

MDA-MB-468人乳腺癌细胞

Hyclone胎牛血清 Sv30087.01

Hyclone胎牛血清 Sv30087.02

Hyclone胎牛血清 SH30084.03

Hyclone优等胎牛血清 SH30406.02

Hyclone优等胎牛血清 SH30406.05

Hyclone特级胎牛血清 SH30396.03

Hyclone特级胎牛血清 SH30070.03

Hyclone特级胎牛血清 SH30070.03E

Hyclone胎牛血清 SH30370.03

活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清,热灭活 SH30068.03HI

马血清SH30074.03

乌拉圭胎牛血清 SV30087. 03

Hyclone胎牛血清SH30071.03

Hyclone胎牛血清SV30160.03

胎牛血清FBS SFBS

新生牛血清 SNCS

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101

PAA 优等胎牛血清FBS A15-151

BI优等胎牛血清 04-001-1ACS

BI ES级别胎牛血清 04-002-1A

BI 间充质胎牛血清 04-400-1A

Corning胎牛血清 35-076-CV

PAN胎牛血清FBS P30-3302

PAN胎牛血清FBS ST30-3302

PAN ES级别胎牛血清 ST30-2602

PAN胎牛血清FBS Plus ST30-3302P

NTC优等胎牛血清 SFBE

Gemini优等胎牛血清 900-108

Gemini特级胎牛血清 100-500

Gemini科研用人AB血清100-512

TCB胎牛血清 101ZC

Sigma 特级胎牛血清 F2442

Sigma正常人AB血清 H4522

SBI 无外泌体血清 EXO-FBS-50A-1

胎牛血清10270106、10099-141、10091-148、10099-133、10100-147、16010159、A31608-02、16050-122、30067334、10437-028等优质胎牛血清

双抗 15140-122SV30010

胰酶 25200-056SH30042.01

GIBCO 胰酶 25200-072

DMEM高糖培养基 C11995500BT

DMEM低糖培养基 C11885500BT

PBS C10010500BT

1640培养基 C11875500BT

DMEM/F12 C11330500BT

MEM培养基 C11095500BT

α-MEM C12571500BT

DMEM低糖 SH30021.01

DMEM高糖 SH30022.01SH30243.01

DMEM/F-12 1:1 SH30023.01

MEM/EBSS SH30024.01

PBS缓冲液 SH30256.01

α-MEM SH30265.01

RPMI-1640 SH30809.01

DPBS SH30028.02



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