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大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1

大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1

产品型号: INS-1

所属分类:大鼠细胞

产品时间:2019-12-31

简要描述:大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1
我司主要经营产品是国内传代细胞和细胞培养相关的生物试剂。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI无外泌体血清等高品质血清。常规液体培养基、胰酶、双抗、无血清冻存液、日本三菱产品、ELISA 试剂盒等产品。售后完善,我们以饱满的热情欢迎新老客户选购!

详细说明:

产品名称:大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1

货号:QS-R007

细胞规格:1-3×10^6细胞量

库存状态:现货

培养RPMI1640+10%FBS+0.05mM 2-qiu基乙chun+0.11g/L丙酮酸钠

冻存条件:80%完全培养液+10%FBS+10%DMSO

运输方式:常温顺丰运输和干冰顺丰运输

货 期:复苏细胞需要1-2周,冻存细胞的需要3-5天(特殊情况会有说明)

质 控:无支原体、无污染、符合标准

研究范围:仅供科研使用

我司是一家专注于生命科学技术领域的高科技企业,在广大用户的帮助和支持下,经过不懈的努力,已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一,一站式采购商城,代理亚洲、欧美国家300多种品牌,200万种以上产品。公司的服务和业务网络遍及全国,在同行获得一致好评。

大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1

我司主要经营产品是国内传代细胞和细胞培养相关的生物试剂。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI无外泌体血清等高品质血清。常规液体培养基、胰酶、双抗、无血清冻存液、日本三菱产品、ELISA 试剂盒等产品。售后完善,我们以饱满的热情欢迎新老客户选购!

我司以客户为核心,以产品质量求生存,以售后服务求信誉。我们通过不断改进来提高效率,绝不以牺牲品质作为代价。“诚信、创新、严谨、专业”愿以饱满的热情期待各界朋友携手合作,共创辉煌!

细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,由于不同细胞来源不同的组织器官环境,其体外培养所需的养分不尽相同,选择合适的培养基对细胞的培养至关重要。

按培养基的来源可分为合成培养基和天然培养基(目前使用的培养基绝大部分是合成培养基)。按其物质状态可分为干粉培养基和液体培养基两类,干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌(可灵活配制配比),液体培养基由专业商家提供(用户可直接使用,非常方便)。

合成培养基成分

主要成分有:氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质。

氨基酸:是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。因此,各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2 周以上时,还应重新加入原来量的谷氨酰胺。

维生素:在细胞培养中,尽管血清是维生素重要来源,但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。

碳水化合物:是细胞生长主要能量来源,其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。

无机盐:培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外,通过提供钠,钾和钙离子,帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg~320 mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES 时需按以下“缓冲系统”方法调节钠离子浓度。

缓冲系统:大多数细胞所需pH 在7.2 - 7.4。但是,细胞培养zui适pH 值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH (7.4 - 7.7), 而传代转化细胞系则需要偏酸pH (7.0 - 7.4)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2 体系进行缓冲,因此,气相中的CO2 浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2 浓度设定在5%,培养液中NaHCO3 的加入量为1.97g/L;如果CO2 浓度维持在10%,培养液中NaHCO3 的加入量为3.95g/L。同时,细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES 是一种非离子缓冲液,在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES 缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES 引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色。

其它成分:

在一些较为复杂的培养液中还包括其它一些成分,如:

(1)非必需氨基酸:有些细胞需要额外添加。

(2)丙酮酸钠:是糖酵解的中间产物,可直接进出细胞,作为替代碳源添加。

(3)胰岛素:可以促进细胞增殖。

(4)qing化可的松:可促进表皮细胞生长。
(5)IL-2:促进淋巴细胞生长,NK92依赖等。

(6)地塞米松:激素类,促进部分细胞生长。

(7)肾上腺素:促进部分细胞生长。

(8)转铁蛋白:为细胞内化和细胞代谢提供所需的铁。

(9)2-qiu基乙chun(2-Mercaptoethanol,2-Me):2-Me的活性部分是硫氢基,其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽,能诱导细胞的增殖,为非特异性的激活作用。另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA 合成,增加植物凝集素(PHA)对淋巴细胞的转化作用。

液体培养基保存

液体培养基应于4℃冰箱避光保存,实验前放入37℃预热。未加血清液体培养基有效期为12个月。液体培养基中的L-谷氨酰胺会随着储存时间的延长而慢慢分解。如果细胞生长不良,可以再添加适量L-谷氨酰胺。

干粉培养基保存

4℃冰箱避光保存,有效期36个月。

血清

细胞培养液中添加的血清有牛血清、马血清、人血清等,其中牛血清是zui常用的血清,分为胎牛、新生牛和小牛血清。胎牛血清是从母牛破腹取出的胎牛中分离出的血清,价格昂贵。新生牛血清是从刚出生的尚未哺乳的小牛中分离出来的血清,如厂家能做到这一点,新生小牛血清的质量与胎牛血清的质量相差不大。小牛血清,如小牛出生后已哺乳,从这种小牛中取出的血清中可能含有较多的生物活性物质,其质量明显不如前两种。

血清的质量,种类及使用的浓度都有可能影响细胞的生长,而不同批次的血清支持细胞生长的能力也不同,尤其是对克隆细胞的生长,某些批次血清可能含有毒性或抑制细胞生长的物质。因此,在购买大量血清之前,必须对血清支持细胞生长能力进行检测,然后再大量购买质量好的同一批号的血清,并注意以下几点:

(1)需要长期保存的血清必须储存于-20℃–-70℃低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

(2)一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清。

(3)瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃ 进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

(4)热灭活是指56℃, 30 分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

(5)切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。

(6)血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm, 5 分钟去除,也可不用处理。

(7)显微镜下“小黑点”:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”,常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。

 



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