NCI-H441 人肺腺癌细胞培养手册

NCI-H441 人肺腺癌细胞培养手册

货号：WS0395H

细胞介绍

NCI-H441建系于1982年（A.F.Gazdar，etal.)。该细胞分离自一名肺腺癌患者的心包液。该细胞能在半固体琼脂糖中形成克隆，并能表达肺泡表面活性蛋白A。该细胞在有血清培养基中倍增时间为58小时，在无血清培养基中倍增时间为99-138小时。

细胞特性

1） 来源：肺癌

2） 形态：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数 

4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

5）用途：仅供科研使用。

三、 细胞传代操作步骤

A. 贴壁细胞传代

1. 准备：吸弃旧培养基。

2. 冲洗：沿培养瓶侧壁缓慢加入PBS等冲洗液，轻轻晃动后吸弃，去除残留血清。

3. 消化：加入预热的胰酶（如T25加1ml），轻轻晃动使胰酶覆盖所有细胞。

4. 孵育：室温消化约2分钟（时间因细胞而异）。

5. 观察：在显微镜下观察，直至≥90% 细胞变圆、脱落。若未达到，可每30秒检查一次。

6. 终止：当细胞充分解离后，立即加入两倍胰酶体积的预热的培养基终止消化。

7. 吹打：用移液器轻轻吹打瓶壁，使细胞脱落并分散成单细胞悬液。

8. 离心：将细胞悬液转移至离心管，200 × g 离心 3-5分钟，弃上清。

9. 重悬与接种：用少量新鲜培养基重悬细胞沉淀，按适当比例稀释后，接种到新的培养瓶中。

10. 培养：放入培养箱。若使用普通瓶盖，务必旋松瓶盖以利气体交换。

B. 悬浮细胞传代

1. 收集与离心：将细胞悬液全部转移至离心管，1000 rpm 离心 5分钟，弃上清。

2. 重悬：加入1-2ml新鲜培养基，轻柔重悬细胞。

3. 接种：按1:2的比例将细胞悬液传至新T25培养瓶，并补充总培养基量至5-8ml。

4. 培养：放入培养箱继续培养。

四、 特殊问题处理：运输中脱落的贴壁细胞

部分贴壁不牢的细胞在运输中会脱落，属正常现象，按以下步骤处理：

1. 收集：将瓶内所有培养基转入无菌离心管，离心（1200rpm, 3-5min）弃上清。

2. 清洗：用PBS重悬细胞，再次离心（1200rpm, 3-5min）弃去PBS。

3. 消化：加入约1ml 0.25%胰酶，轻柔混匀（勿剧烈吹打），放入培养箱消化1-2分钟。

4. 终止与分散：取出后轻轻吹打使细胞团分散，迅速加入3-5ml培养基终止消化，离心（1200rpm, 3-5min）弃上清。

5. 重悬与接种：加入5ml培养基重悬，按比例接种到新培养瓶/皿中。

6. 观察：镜下观察。若细胞为单颗或仅有3-5个细胞的小团，可正常培养，待其贴壁生长。

大鼠主动脉平滑肌细胞 A7R5

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化) PC-12(低分化)

大鼠β胰岛素瘤细胞 RIN-M5F

大鼠脊髓前角运动神经元瘤细胞 VSC4.1

大鼠骨肉瘤细胞 UMR-106

大鼠脑I型星形胶质细胞 CTX-TNA2

大鼠垂体瘤细胞 MMQ

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(未分化) PC-12(未分化)

大鼠嗜碱性细胞白血病细胞 RBL-2H3

大鼠少突胶质前体细胞系 OLN-93

大鼠垂体瘤细胞 GH3

大鼠骨骼肌成肌细胞 L6

正常大鼠肾细胞 NRK-49F

大鼠皮肤成纤维样细胞 RS1

大鼠肺泡Ⅱ型细胞 RLE-6TN

大鼠胰腺外分泌腺肿瘤细胞 AR42J

大鼠小肠隐窝上皮细胞 IEC-6

大鼠神经胶质瘤细胞 C6

大鼠胚胎心肌细胞 H9c2(2-1)

大鼠背根神经节细胞 DRG

大鼠肝癌细胞 H4-II-E-C3

大鼠正常肝细胞 BRL3A

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化) PC-12(高分化)

大鼠空肠胶质细胞 EGCCRL-2690

大鼠雪旺细胞 RSC96

大鼠肾小球系膜细胞 HBZY-1

大鼠胶质肉瘤细胞 9L/lacZ

大鼠胰岛细胞瘤细胞 INS-1

大鼠肝上皮样干细胞 WB-F344

正常大鼠肾细胞 NRK-52E

大鼠小胶质细胞 HAPI

小鼠乳腺癌细胞 AT-3

小鼠肺上皮细胞 TC-1

小鼠鳞状细胞癌细胞 SCC7

小鼠垂体瘤细胞 AtT-20

小鼠淋巴结上皮细胞 SVEC4-10

小鼠胚胎纤维细胞 STO

小鼠睾丸间质细胞 TM3

小鼠急性骨髓性白血病 C1498

小鼠主动脉血管平滑肌细胞 MOVAS

小鼠黑色素瘤细胞 B16

小鼠乳腺癌细胞 E0771

小鼠树突状瘤细胞 DC2.4

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 RAW264.7

小鼠成纤维细胞 NCTCclone929

小鼠脑微血管内皮细胞株 bend.3

小鼠胚胎成纤维细胞 C3H/10T1/2

小鼠心肌细胞　 HL-1

小鼠脑神经瘤细胞 Neuro-2a

小鼠胚胎成纤维细胞 MEF

小鼠肾小管上皮细胞 TCMK-1

小鼠单核巨噬细胞 J774A.1

小鼠胚胎肌母 C2C12

小鼠前脂肪胚胎成纤维细胞 3T3-L1

小鼠肺泡上皮细胞 MLE-12

小鼠乳腺上皮细胞 HC11

小鼠视网膜神经节细胞株 RGC-5

小鼠结肠癌细胞株 MC-38

小鼠淋巴瘤细胞(NK靶细胞) YAC-1

小鼠T淋巴瘤细胞（鸡OVA基因修饰） E.G7-OVA

小鼠正常肝细胞 NCTC1469

小鼠肺泡巨噬细胞 MH-S

小鼠肺腺癌细胞 LA7120

小鼠肾小球足细胞 mpc-5

小鼠T淋巴细胞 CTLL-2

小鼠主动脉内皮细胞 MAEC

正常小鼠睾丸Sertoli细胞 TM4

小鼠淋巴细胞白血病 L1210

小鼠腹水瘤细胞 S-180

小鼠杂交瘤（抗CD2）细胞 OKT11

小鼠小脑细胞 C8-D1A

小鼠睾丸间质细胞瘤细胞 MLTC-1

小鼠下丘脑神经元细胞 GT1-7

小鼠黑色素瘤细胞 B16-F10

小鼠结肠癌细胞 CT26.WT

小鼠皮下结缔组织细胞 L Wnt-3A

小鼠血管内皮瘤细胞 EOMA

小鼠神经干细胞 NE-4C

小鼠胰岛β细胞株 Min6

小鼠B细胞淋巴瘤 A20

小鼠肝癌细胞 Hepa1-6

小鼠小胶质细胞 Bv-2

小鼠乳腺癌细胞 4T1

小鼠胚胎瘤细胞 ATDC5

小鼠胰腺癌细胞 PANC02

小鼠胶质瘤细胞 GL261

小鼠肺癌细胞 LLC

小鼠骨肉瘤成骨细胞 K7M2wt

小鼠乳腺癌细胞 EMT6

小鼠海马神经元细胞 HT22

小鼠小肠内分泌细胞系 STC-1

小鼠乳腺上皮细胞 EpH4-Ev

小鼠肝细胞 AML12

小鼠膀胱癌细胞 MB49

小鼠巨噬细胞 Ana-1

小鼠肾小球系膜细胞 SV40-MES-13

小鼠胚胎肝细胞 BNLCL.2

小鼠肥大细胞瘤细胞 P815

小鼠肾癌细胞 Renca

小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株 G422

小鼠骨髓瘤细胞 SP2/0

小鼠精原细胞系 GC-1spg

小鼠肾髓质细胞 mIMCD-3

小鼠前列腺癌细胞 RM-1

小鼠宫颈癌细胞 U14

小鼠卵巢癌细胞 ID8

小鼠皮下结缔组织细胞 L-WRN

小鼠胰腺腺泡癌细胞 266-6

小鼠骨髓基质细胞　 OP9

小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 MC3T3-E1

人子宫颈表皮癌细胞MS751 MS751

小鼠肝癌 H22

小鼠淋巴瘤细胞 EL4

小鼠骨样细胞 MLO-Y4

小鼠胰岛内皮细胞 MS1

猪肾传代细胞 IBRS-2

恒河猴胚肾细胞 FRHK-4