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人脑神经母细胞瘤细胞SK-N-AS说明书

更新时间:2025-10-20点击次数:22

人脑神经母细胞瘤细胞SK-N-AS说明书

人脑神经母细胞瘤细胞SK-N-AS说明书


一、产品概述

种属

别称

SKN-AS; SKNAS

组织来源

脑,来源于转移部位:骨髓

疾病

神经母细胞瘤

传代比例/细胞消化

1:2传代,消化2-3分钟

wan全培养基配置

DMEM培养基;10%胎牛血清;1%双抗

简介

来自低分化胚胎神经母细胞瘤儿童的骨髓转移

形态

上皮细胞样

生长特征

贴壁生长

倍增时间

每周 2 3

STR

Amelogenin: X CSF1PO: 10,12 D13S317: 9 D16S539: 14 D5S818: 11,12 D7S820: 11,13 TH01: 9.3

TPOX: 11,12 vWA: 16,17

培养条件

气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%

冻存条件

冻存液:90%FBSDMSO 10%,

或使用非程序冻存液:货号JY-H040

保藏机构

ATCC; CRL-2137

产品使用

仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

二、 贴壁细胞接收注意事项

贴壁细胞经过快递运输颠簸会出现漂浮脱落等情况: 收到先放培养箱静置稳定。如有脱落需收集处理,处理细节请查阅以下信息,原瓶内为运输培养液,血清含量只有5%,需及时更换专用wan全培养基。 收到细胞后请把细胞图片状态发此群里面, 根据图片可以给出接下来的处理建议(传代或者换液),一次建议一比二传代至2T25。 贴壁细胞传代步骤: 准备工作:胰酶和wan全培养基(需要提前37度复温)、PBS(常温)避免细胞遇冷受刺激

1) 吸出原培养液

2) 加入2ml左右PBS,轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃

3) 加入1ml左右0.25%EDTA的胰酶,轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞。

4) 根据不同的细胞放入培养箱时及时关注消化时间,消化约2-3min,显微镜下看到细胞中间的细胞明显分离变圆细胞间隙变大,显微镜下看细胞呈单个游离状态,侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化,可以轻拍培养瓶侧身。(消化时主要看消化状态,如果没有变圆,侧立时不能滑落时,可以适当延长消化时间,每30s观察一次细胞)

5) 加入3ml10%血清的培养基终止消化,轻轻吹打细胞使之脱壁并在液体里反复轻轻吹打(不要太用力)使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液。

6) 收集细胞悬液离心,1000rpm/min(约250g5分钟,离心完吸出上清丢弃。

7) 加入新鲜wan全培养基,吹打几下混匀细胞即可,按需接种到新培养瓶,补wan全培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

8) 检查培养箱二氧化碳,温度和水盘。

这个是贴壁细胞传代的方法,特别注意的是第4步消化过程,消化至到细胞wan全变圆以后侧立培养瓶细胞可以出现滑落时再终止消化。

消化成游离状态,后续轻轻稍微吹一下即可很好的分散细胞

后续处理建议:传代后2-3天换液一次即可,(如细胞第二天全部贴壁培养基颜色变黄,可以换液,)无需每天换液(换液太勤可能会损失细胞影响细胞状态)换液时候如果没有特殊情况也可以不用PBS清洗

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