血清使用需要注意的问题

血清使用需要注意的问题

（一）被误判为污染的“小黑点"

经过热处理的血清，往往沉淀物会增多，而这些沉淀物在倒置显微镜下观察像是污染物，常常会让研究者误以为血清遭到污染。然而，把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物进一步增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。

我们的经验是拿到镜下去观察是否为细菌状或真菌状形态。还有就是做无菌培养，取一点血清在培养皿中，在培养箱里培养几天，观察沉淀物是否有变化。一般情况下，这些沉淀物并不会影响血清的正常使用，Lab里往往用0.22μM的滤膜过滤一下就继续使用了。

（二）解冻血清

解冻血清时，请遵循推荐的分步解冻方法（-20℃→4℃→室温）。实验表明，如果血清解冻温度过高（如-20℃→37℃），很容易产生沉淀。解冻血清时，请随时摇匀，使温度和成分均匀，减少沉淀的发生。请不要长时间将血清放置在37℃环境中，如果放置时间过长，血清会变得混浊，血清中的许多不稳定成分会受到破坏，从而影响血清的质量。血清的热灭活很容易引起沉淀物的增加，我们认为这一步是不必要的。如需对血清进行热灭活，请遵循56℃、30min原则，随时摇匀。如果温度过高、时间过长或摇晃不均匀，沉淀物就会增加。

血清中出现沉淀物的原因有很多，但最常见的是血清中脂蛋白的变性，解冻后血清中还会存在纤维蛋白（形成凝块的蛋白质之一），这也是产生沉淀物的主要原因之一。然而，这些絮状沉淀物虽然并不影响血清本身的质量，但有可能会被误判为污染物。如果要去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装在无菌离心管中，以1200rpm的速度离心，然后将上清液加入培养基中进行过滤。

（三）保存血清

避免血清出现非污染性沉淀物的最好方法就是减少血清反复冻融的次数，所以血清少量分装冻存是一个好方法。建议血清保存在-20～-5℃之间。如果以4℃保存，不要超过一个月。如果一次不能用完一瓶，建议将血清分装到无菌离心管中，然后再冻存。

中文名 英文名称 货号 规格

WinSera® 优级胎牛血清 Fetal Bovine Serum FBS500-WS-002 500ml

WinSera® 特级胎牛血清 Fetal Bovine Serum FBS500-WP-002 500ml

WinSera®干细胞专用胎牛血清  Stem cells Qualified FBS500-WE-002(ES) 500ml

WinSera® 无外泌体血清  Exosome-depleted FBS FBS050-EXO 50ml

WinSera® AB血清 Human Serum AB HU050-S-011 100ml

WinSera®热灭活胎牛血清  Heat Inactivated FBS FBS500-WH-002 500ml

WinSera®碳吸附胎牛血清  Dextran Stripped FBS FBS500-WCS-002 500ml

WinSera®透析胎牛血清  Fetal Bovine Serum, Dialyzed FBS500-WDF-002 500ml

WinSera®超低IGg胎牛血清  Low IgG FBS FBS500-WLG-002 500ml

WinSera®新生牛血清 NewbornCalfSerum NCS500-W-002 500ml

产品名称：优级胎牛血清

品牌：WinSera

货号：FBS500-WS-002

规格：500ml

适用范围及应用领域

1、疫苗的研发生产:人用疫苗：如冠疫苗、乙肝、甲肝、狂犬病疫苗、乙脑、人用出血热等

兽用疫苗：猪瘟疫苗、禽感疫苗、兽用狂犬病疫苗等

2、生物医药及细胞培养领域:细胞培养；

抗原抗体的研发生产等；

为细胞制备提供的环境及增殖营养；

3、科研领域:高校科研

合同研究组织（科研外包CRO模式）医院科研及检验用血清

诊断试剂的研发及生产

FBS500-WS-002胎牛血清培养细胞种类

1、常用细胞：VERA、293、293T、SF9、CHO细胞

2、神经细胞：PC12、SH-SY5Y

3、原代细胞：牛/猪睾丸原代细胞、原代 肿瘤细胞、大/小鼠原代神经细胞、原代肿瘤细胞

4、肿瘤细胞:HELA、HEPG2、A549二倍体细胞:MRC-5、KMB-17、2BS、SV-1

5、免疫细胞培养T细胞、B细胞、NK细胞、DC细胞干细胞培养间充质干细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞单抗制备B细胞、骨髓瘤(SP0、SP2)、融合细胞(杂交瘤细胞等)

血清沉淀是污染吗？

无论是较大的絮状纤维蛋白还是小黑点样的磷酸钙，都容易被误认为是细菌污染，但其实血清沉淀并不是污染。由于在37℃的温度下培养，会加剧纤维蛋白的析出和磷酸钙颗粒产生，可采用空培方式验证污染，血清按所需比例加入无菌培养基中（不加双抗），放培养箱中过夜，观察空培外观，若为澄清，则血清无污染。还可以通过将血清接种在细菌培养基上进行培养，观察是否存在细菌增殖，并且进行革兰氏染色，用油镜观察直接判断是否为微生物污染。

血清沉淀会影响细胞生长吗？

血清出现沉淀是血清的正常特性，各品牌的血清均有沉淀的出现，过于澄清的血清并不代表更高的品质，也可能是在加工过程中提前进行“预老化"，即反复冻融尽可能的去除纤维蛋白原的结果。

血清沉淀的多少与血清的使用效果没有必然关系，血清沉淀并不会影响细胞的正常生长。