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人乳腺癌顺铂耐药株MCF7/DDP培养手册

更新时间:2025-03-12点击次数:147

细胞名称:人乳腺癌顺铂耐药株MCF7/DDP     

货号:WS148((MCF7)STR鉴定)

规格:1×10⁶cells/T25培养瓶

用途:仅供科研使用

一、细胞介绍

该细胞为由MCF7细胞构建的耐DDP药物细胞株。

二、细胞特性

1) 来源:乳腺癌组织

2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长

3) 含量:>1x106  细胞数

4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

5)  用途:仅供科研使用。

三、培养基及培养冻存条件准备

1)详见说明书。

  血清我们推荐 FBS500-WP-002

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

四、 细胞处理

1) 冻存细胞的复苏

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3. 轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

注意:细胞传代1~2次后仍能保持增殖,即可提高药物浓度至0.5ug/mL继续培养;若此过程中细胞停止增殖,且状态较差,则需降低药物浓度(降低一半药物浓度)或使用不含药物的培养基培养,至细胞密度约8×105个/mL,且生长状态较好时,再更换为所需的药物浓度。

3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

下面T25瓶为例;

1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml.

1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。

注意:细胞冻存过程中,不可添加药物。

2. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。


人原代软骨细胞永生化
人主动脉内皮细胞永生化
人风湿性关节滑膜成纤维细胞永生化
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人乳腺癌成纤维细胞永生化
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人眼脉络黑色瘤细胞c918c918
人肝癌细胞BEL-7402BEL-7402
人前列腺增生细胞BPH-1BPH-1
人胃癌细胞FU97 FU97 
人子宫颈癌细胞HT-3HT-3
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人肺腺癌细胞EPLC-272HEPLC-272H
人多发性骨髓瘤细胞MM.1SMM.1S
人子宫体肉瘤细胞MES-SAMES-SA
人甲状腺癌细胞(未分化)8305C(未分化)8305C
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人弥漫大B细胞淋巴瘤细胞 OCI-LY7OCI-LY7
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