VivaCell特级血清C04001-500的优势之处
产品名称:特级胎牛血清 C04001-500
适用:绝大多数癌细胞和无限细胞系(如:肝癌、乳腺癌、神经母瘤、结肠癌、宫颈癌)
1、如何解冻血清呢?
血清解冻需采用逐步解冻法:将血清首先置于2-8℃冰箱中12-24小时使之缓慢部分溶解,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。
2、如何正确保存血清呢?
需要长期保存的血清必须储存于-20℃以下的冰箱(未开封血清有效期为5年)。若存放于4℃,请勿超过1个月,若一次无法用完一瓶,建议将血清无菌分装并冷冻。
3、什么是热灭活,有必要作热灭活吗?
热灭活溶解细胞是指以56℃,30分钟水浴处理已经解冻的血清,使血清中的补体灭活。
激活的补体参与溶解细胞、刺激平滑肌收缩,刺激细胞和血小板释放组胺以及激活淋巴细胞和巨噬细胞。研究人员用多个批号的血清作过补体结合试验,结果显示,即使是未稀释的血清,也不会使红细胞溶解;另一方面,细胞生长实验显示,多数细胞在使用热灭活血清培养时生长速率降低,原因是高温处理影响了血清的质量。除此之外,灭活后的血清,颗粒状沉淀物会显著增加。
在免疫学研究中,培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
建议:若非必须,不要对血清进行热灭活。不仅能节约时间,还能确保血清的质量。
4、如何正确的进行热灭活呢?
将需要进行处理的血清置于56℃水浴30分钟,建议加放空白对照(同体积水)使用温度计测温,以测得温度为56℃时为计时起始点,加热过程中可不时轻度旋转混匀血清。
5、为何血清存在批间差?
因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。每个批号的组分和百分比含量都是不固定的,所有批间差是可能存在的。 建议先进行批号测试,筛选出合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用再订购。
6、需要对新买的血清进行过滤吗?
血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。
7、如何挑选适合细胞生长的血清?
原代或是正常细胞株建议使用BI特级胎牛血清,对生长条件要求高的细胞和干细胞可选用专用特级胎牛血清,或胚胎干细胞专用金牌胎牛血清。
由于血清有批间差异,细胞种类不同,我们建议客户购买前可先申请试用样品,通过筛选得到满意的血清批号,之后根据项目需求可进行批量囤货,以保证该项目所需血清质量的一致性,可排除不同批号血清对于实验带来的影响。
8、除了对血清进行检测,还有何更直观的方式分辨血清质量呢?
目测法:我们可根据血清的颜色,沉淀,澄清度等进行区分。
颜色:颜色根据血清蛋白含量的不同,可表现出黄色或者红色。进口血清质量好的呈现出淡黄、微红色,较差质量呈现出橘红色或鲜红色。热灭活血清或保存不当的,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红色,甚至咖啡色。
沉淀:血清中的沉淀主要是有纤维蛋白的凝聚产生。沉淀产生的原因很多,使用时反复冻融会增加沉淀。进口血清过滤分装前很少反复冻融,因此成品清澈。
澄清度:进口血清是由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡。国产血清绝大多数为新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深。
9、胎牛血清和新生牛血清有什么区别呢?
取血年龄不同:牛血清按照牛取血时间或牛龄可进行区分。
a.胎牛血清(Foetal Bovine Serum,简称FBS)指的是取自未出生,母牛剖腹得来的胎牛。
b.国产胎牛血清(并无明确定义,但通常以此称)的指的是出生4-6小时,且未进行哺乳进食的牛,有时还称作国产新生牛。
c.新生牛血清(Newborn Calf Serum,简称NBCS)指的是出生14天-3个月进行取血的牛。
d.成年牛血清(Adult Bovine Serum,简称ABS)指的是取血时牛龄通常超过12个月的牛。
提示:以上取血牛龄的差异主要是受当地国家畜牧业的发展及法规限制影响,因为牛血多为畜牧业副产业,并未有专门为取血而养的牛。
组分与比例不同:这几种不同牛龄血清所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组分与比例不同。常规来说,年龄越小的牛血清,细胞培养效果越好。胎牛血清培养效果好于新生牛,且因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低。
用途与用法不同:根据细胞所需生长条件可确定。
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