编号：WS-HCT002                    

细胞株名称：HCT116/L人结肠癌耐奥沙利铂细胞株

种属：人

组织来源：结肠癌

生长特性：贴壁生长

形态特征：上皮细胞

微生物及支原体检测：阴性

安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。

培养条件：

wan全培养基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+2000ng/ml  L

血清我们推荐用:

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培养条件：37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

传代方法：

收到细胞后，在倒置镜下(最好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。

2. 加0.7-1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，用力拍打瓶壁，期间每隔 5-10s放到显微镜下观察，直至50-70%的细胞脱落后，加入2ml 以上wan全培养基中止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加wan全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的第一次传代一般是一传二。

注：1、观察细胞最好在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。..

冻存方法：

  冻存液：90%胎牛血清，10%DMSO

  储存：液氮储存