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iPS细胞培养基的使用说明
更新时间:2023-03-28 点击量:758

iPS细胞培养基

货号:WS-IPS-100

规格:500mL

储存条件:基础培养基2 ~ 8℃,添加剂-80 ~ -20℃;混匀后2 ~ 8℃,2周内使用完毕。

产品简介:

iPS细胞培养基是一种适用于无饲养层培养、化学成分明确、并且不含动物源蛋白的人多潜能干细胞(hESC/hiPSC)wan全培养基。iPS细胞培养基是在James Thomson实验室开发的Essential 8培养基的基础上,由公司改良研发出的最新型多潜能干细胞wan全培养基。hESC/hiPSC在iPS细胞培养基中可以快速增殖,而分化的细胞则无法在该培养基中生长,从而选择性扩增并获得高纯度多潜能干细胞。

产品内容:

名称

规格

数量

iPS细胞基础培养基

500mL

1瓶

iPS细胞添加剂

20mL

1支

试剂准备:

iPS细胞wan全培养基:将iPS细胞添加剂加入iPS细胞基础培养基中形成iPS细胞wan全培养基(推荐每2mL添加剂与50mL基础培养基混合)。

iPS细胞wan全培养基可在2-8℃稳定储存2-3周。

疑难解答:

•是否还需要往iPS细胞wan全培养基中补充或添加成分?

不需要。iPS细胞培养基中各个成分的质量和浓度都经过了优化实验,wan全支持人ESC/iPSC的长期培养,您无需再自行添加。

•培养基中有沉淀状物质是否是质量问题?

添加剂在解冻过程中,若有少量沉淀析出,属于正常现象,不影响使用,请充分混匀后与基础培养基混合。但添加剂不能在37℃解冻,否则会析出大量沉淀,影响培养基的效价。如果培养基中出现大量沉淀,请不要使用。

•是否能在37 ℃反复水浴iPS细胞wan全培养基?

不能。频繁地在4℃和37℃之间转换会导致iPS细胞wan全培养基中含有的因子失活,iPS细胞wan全培养基在使用前平衡至室温即可。

• iPS细胞在传代后不贴壁怎么解决?

造成iPS传代后不贴壁的最可能的原因:

① 细胞消化时间不合适;②消化后吹打次数不合适,使得完成传代后细胞集落过大或过小。

• iPS分化怎么处理?

①细胞在刚复苏或传代时,小的细胞团不呈现标准的克隆形态,培养几天或传代后可恢复。②如果iPS分化的表现为干细胞克隆形态良好,克隆周边出现散在的分化细胞,可通过高比例传代(≥1:10),使得分化细胞的密度减少,低密度的分化细胞可被iPS培养体系筛选去除,如未wan全去除,可用细胞刮或巴斯德管刮除。

③如果iPS分化的表现为克隆内部松散,边缘不平滑,在分化比例小或分化不严重的情况下,可通过连续传代2 ~ 3次恢复,如果分化严重,建议弃除。

• 细胞复苏率低是什么原因?

细胞复苏需使用iPS细胞复苏培养基,可大大提高细胞的复苏效率。复苏过程中,转移细胞、吹打混匀和重悬细胞时,吹打力度要轻柔,并尽量减少吹打次数,细胞接种后,即刻在显微镜下观察细胞团块的大小,4 ~ 10个细胞的团块为最佳。如果吹打力度过大或次数过多,

导致细胞分散成单细胞,细胞复苏率将偏低。