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如何储存和解冻PAN胎牛血清才不会使产品质量受损?
更新时间:2023-03-24 点击量:536

如何储存和解冻PAN胎牛血清才不会使产品质量受损?

未拆封的血清,一般情况下应存放于-10℃至-20℃,在产品规定的效期内均可使用,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至合适大小的无菌离心管内,再放回冷冻。

将血清从冷冻冰箱取出后,先置于28℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融,或通过水浴锅促使其溶解。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。wan全溶解后建议尽快使用,若长时间储存在2-8℃,血清中的各种(脂)蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可见的混浊。

总而言之:血清推荐在-10-20℃条件储存,并避免反复冻融。

PAN胎牛血清中絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?

1.将冷冻保存的血清取出后,置4℃冰箱静止过夜;

2.待血清融化后,上下颠倒,轻轻混匀,继续42-3小时;

3.轻轻吸取上层血清,分装,余底下50ml左右;

4.低速离心5分钟,去掉沉淀。


若解冻后发现有絮状沉淀物出现,该怎么处理?

胎牛血清中沉淀物的出现有许多种原因,但普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解冻后,也会存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响胎牛血清本身的质量。若欲去除这些絮状沉淀物,可以将胎牛血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。

解冻胎牛血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20至4至室温),若胎牛血清解冻时改变的温度太大(如-20至37),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将胎牛血清置于37太久。若在37放置太久,胎牛血清会变得混浊,同时胎牛血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响胎牛血清的质量。胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。

如何避免血清中产生沉淀?

1.解冻时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一;

2.分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡);

3.切勿由-20直接至37水浴锅解冻,较大的温差,易造成蛋白质凝结而发生沉淀;

4.切勿将血清置于37过长时间,否则可能使之浑浊,其中一些不稳定的组分也会因此受到影响,最终降低血清的品质;

5.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤;

6.若必须做血清的热灭活,请遵守56,30分钟的原则,并且保持摇晃均匀。温度过高、时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。