市场上的胎牛血清种类繁多,鱼龙混杂,使人难以分辨真伪及品质。好不容易在众多品牌中挑选出诚心如意的产品后,那我们就可以安心使用了嘛?
不尽然,我们汇总小伙伴经常咨询的一些问题。
1、为何上次购买的同一货号的血清培养细胞状态差异那么大?如何避免此影响?
答:因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,每个批号的组分和组分含量都是不固定的,因此批间差异是可能存在的。
为了避免批间差异对细胞的影响,建议先进行批号测试,筛选合适的批号,备好库存(血清未开封时,在-20℃下可保存5年)。如需更换血清批次或产地,建议先试用后再大量订购。
2、我购买的血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何预防和处理沉淀?
答:血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。
造成沉淀的另一个原因是温度的改变。热灭活,反复冻融,长期储存于2-8℃或者室温。
预防措施与建议:因此不立即使用的血清应保存在-20℃或以下
3、如何减少沉淀物的产生?
答:我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作:·解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃ 至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至 37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
·解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生
·请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
·血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,则毋须做此步骤。
·若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
4、需要对新买的血清进行过滤吗?
答:不需要,血清在ISO13485认证的厂房中生产,经过3次0.1μm过滤,出厂经过检测并且会使用三种以上的细胞株进行培养测试及无菌检测,污染几率非常低。通常细胞污染有非常多的可能性,根据协助使用者进行分析检测,结果表明绝大部分都是因人为操作失误导致污染。因此买来的血清不需要再次进行过滤。
5、如何解冻血清?
答:血清解冻需采用逐步解冻法:将血清从-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天,然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻规律摇晃均匀(小心勿造成气泡),减少沉淀生成。切勿直接将血清从-20℃转入37℃解冻,这样因温差较大易造成蛋白质凝结并出现沉淀。
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