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ELISA试剂盒代测之 固体样本处理问题
发布时间:2022-06-06 点击量:191



固体样本处理问题




01
组织样本操作流程:


1、组织样本必须保持鲜重,如果是冻存的组织,应该室温平行2小时以上,然后用生理盐水冲洗干净,再用滤纸把周围的水分吸干,称重!组织重量不能低于50mg。


2、组织匀浆液选取是PBS(PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol/L)匀浆的比例为1:10,相当于1g组织加9ml的匀浆液。


3、组织匀浆后,离心取上清,离心转数为5000转,但不能超过5000转,时间为15分钟。


4、实验中老师样本提取的是200mg的样本加1.8ml的匀浆液。


02
土壤样本处理方式


土壤样本处理一般分为2个步骤,第一个步骤是测定含水率,第二个步骤是进行匀浆,按照10%混匀离心取上清待检。具体操作如下。


第一部分:


1、称取土壤500mg左右,必须保持鲜重,按照重量和体积比加入1:10的PBS溶液(PBS的浓度为0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4),例如称取的是0.5g加入5ml的PBS,称取的重量不要求保持一致,但匀浆的比例都是按照1:10的关系来。


2、进行涡旋震荡,充分混匀,涡旋时间30秒。


3、离心取上清,离心转速为4000转每分,时间为15分钟左右,取上清液待检。


第二部分:


称取500mg左右的样本,进行烘干,前后称取重量,测定含水率。(这个是为后期剔除掉含水率)


03
粪便处理(免疫学)


1、称取样本中的重量不小于50mg,一般以1g为基准,但不严格要求固定样本每个重量必须达到相同的水平。


2、匀浆的比例选取10%,相当于1g粪便加9ml的匀浆液来进行匀浆。


3、匀浆液选取PBS(PH=7.2-7.4,浓度为0.01mol/L)。


4、离心取上清,离心转速选用5000转每分,时间是15分钟。取上清液待检!


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