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挑选 ELISA 试剂盒,必须了解的 12 个妙招
发布时间:2020-11-19 点击量:77

挑选 ELISA 试剂盒,必须了解的 12 个妙招

ELISA Kit 的诞生,是为了帮助科研工作者省掉繁琐的实验过程,提高科研效率。如果选对了试剂盒,用对了实验技巧,就会让您的实验效率事半功倍。

市场上各种厂家、品牌,各种种属、因子,质量良莠不齐,如何浪里淘金,选择既符合研究需求,又品质上乘的 ELISA 试剂盒呢?

大师兄教你 12 招,挑选合适 ELISA 试剂盒

1、查找待测样本的蛋白浓度

可以通过 NCBI 的文献,uniprot,pax-dab 上给出的蛋白表达量参考值来比较 ELISA 试剂盒中给出的样本值与报道值是否一致

2、试剂盒的应用种属、检测样本的种类

除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用

3、试剂盒的检测范围

也就是标曲范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标曲范围内,对于浓度很高的样本,可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本

4、试剂盒中的稀释线性及回收率

a. 稀释线性:一般指样本稀释线性,是将样本梯度稀释下来,看各稀释梯度浓度是否成线性;参考样本稀释线性可以选择样本的较好稀释倍数

b. 稀释线性也有做加标稀释线性的情况,加标稀释线性是将标准品加入样本中测定加入的标准品浓度测定是否准确;同样也是确定待测样本稀释倍数的参考指标。一般线性和回收率的范围在 80%-120% 比较合适

5、试剂盒的其它指标

a. 灵敏度:试剂盒能够检测到的样本较低浓度的能力,如果待检指标含量很低,需要选择高灵敏度的 ELISA 试剂盒

b. 板间和板内的变异系数(CV%): 反映板内和不同板之间是否均匀,CV% 一般小于 10% 比较好

6、试剂盒的有效期

试剂盒的有效期一般是半年至一年,样本准备时间需要考虑到试剂盒的有效期

7、试剂盒的特异性

ELISA 试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分,抗体对有关。若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗

8、重复性

科学实验讲求重复性,一般 ELISA 试剂盒,其板内和板间变异系数应该控制在 11% 和 15% 以内

9、简便性

试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利,越容易受到用户欢迎。这也不妨作为选择试剂盒的一个指标

10、经济性

进口分装试剂盒因为省去不少物流和报关费用,与国外原装进口试剂相比价格上有比较大的优惠,而且能提供比较灵活的包装规格,特别是 48T 等小包装,目前很多客户因为对品牌的信任度问题,主要还是选择国外原装进口,但是国内进口分装比较成熟的公司仍然是一个非常好的选择

11、美誉度

一个品牌不光要有知名度,更重要的是美誉度。通过行业调查公司以及网络,相关宣传资料等可以找到美誉度高的 ELISA 试剂盒供应商,这个反映的不仅是产品质量的问题,对供应商的售前售后服务也是一个非常严格的检验

12、文献引用

产品的文献引用特别是高质量的 SCI 文章的引用是很多用户都关心的问题,这是业界对产品认可的一个非常重要指标,而且对相关用户的科研有一定的借鉴作用

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