细胞培养常见问题的解答
1.何时须更换培养基?
视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本资料上之更换时间,按时更换培养基即可。
2.可否使用与原先培养条件不同之培养基?
不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。
3.如何选用特殊细胞系培养基?
培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,选MEM做粘附细胞培养、 RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。
4.培养细胞时应使用5 %或10% CO2?或根本没有影响?
一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7 g时,细胞培养时应使用10 % CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5 g时,则应使用5 % CO2培养细胞。
5.冷冻管应如何解冻?
取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。
6.怎样离心回收细胞?
欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg (约1000rpm),5 - 10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡。
7.细胞冷冻培养基之成份为何?
动物细胞冷冻保存时经常使用的冷冻培养基是含5 - 10 %DMSO (dimethyl sulfoxide)和90 - 95 %原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于 DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成。
8.应如何避免细胞污染?
细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染的好方法。
9.购买之细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?
研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。
10.购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?
研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。 培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久。
11.什么培养基中可以省去加酚红?
酚红在培养基中用作PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。
苏州千舍生物细胞库细胞明细
293(HEK-293) | 人胚肾细胞 |
5637 | 人膀胱癌细胞 |
293A | 人胚肾细胞 |
22RV1 | 人前列腺癌细胞 |
293T | 人胚肾细胞 |
3T3-L1 | 小鼠胚胎成纤维细胞 |
4T1 | 小鼠乳腺癌细胞 |
6T-CEM | 人T细胞白血病细胞 |
769-P | 人肾细胞腺癌细胞 |
786-O(786-0) | 人肾透明细胞癌细胞 |
95-D | 人高转移肺癌细胞 |
A172 | 人脑胶质瘤细胞 |
A2780 | 人卵巢癌细胞 |
A-375 | 人恶性黑色素瘤细胞 |
A-431 | 人表皮癌细胞 |
A549 | 人非小细胞肺癌细胞 |
A-673 | 人非小细胞肺癌细胞 |
A9 | 小鼠皮下结缔组织细胞 |
AAV-293 | 人胚肾细胞 |
Acc-2 | 人涎腺腺样囊性癌细胞 |
ACHN | 人肾癌细胞 |
AGS | 人胃腺癌细胞 |
Ana-1 | 小鼠巨噬细胞 |
Anglne | 人卵巢癌细胞 |
AR42J | 大鼠胰腺外分泌细胞 |
ARPE-19 | 人视网膜上皮细胞 |
AsPC-1 | 人转移胰腺腺癌细胞 |
AtT-20 | 小鼠垂体瘤细胞 |
B16 | 小鼠黑色素瘤细胞 |
Bcap-37 | 人乳腺癌细胞 |
BEL-7402 | 人肝癌细胞 |
BEL-7404 | 人肝癌细胞 |
BGC-823 | 人胃癌细胞 |
BHK-21 | 仓鼠肾细胞 |
BIU-87 | 人膀胱癌细胞 |
BRL 3A | 大鼠正常肝细胞 |
BNL CL.2 | 小鼠胚胎肝细胞 |
BRL | 大鼠肝细胞 |
BS-C-1 | 非洲绿猴肾细胞 |
BT-474 | 人乳腺导管癌细胞 |
BT-549 | 人乳腺管癌细胞 |
BxPC-3 | 人原位胰腺腺癌细胞 |
C127 | 小鼠乳腺癌细胞 |
C2C12 | 小鼠成肌细胞 |
C-33 A | 人子宫颈癌细胞 |
C4-2 | 人前列腺癌细胞 |
C6 | 大鼠脑胶质瘤细胞 |
Ca Ski | 人宫颈癌肠转移细胞/人宫颈癌上皮细胞 |
CA46 | 人Burkitts淋巴瘤细胞 |
Caco-2 | 人结直肠腺癌细胞 |
CaES-17 | 人食管癌细胞 |
Caki-1 | 人肾透明细胞癌细胞 |
Calu-1 | 人肺癌细胞 |
Calu-3 | 人肺腺癌细胞 |
Caov-3 | 人乳突状卵巢腺癌细胞 |
CCD-1095Sk | 人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞 |
L2 | 大鼠肺泡上皮细胞 |
CCRF-CEM | 人急性淋巴白血病细胞 |
CFPAC-1 | 人胰腺癌细胞 |
CHL | 仓鼠肺细胞 |
CHO | 仓鼠卵巢细胞 |
CHO-K1 | 仓鼠卵巢细胞亚株 |
CNE | 人鼻咽癌细胞 |
CoC1 | 人卵巢癌细胞 |
CoC1/DDP | 人卵巢癌细胞CoC1顺铂耐药亚株 |
COLO 205 | 人结肠癌细胞 |
COLO 320DM | 人结肠癌细胞 |
COS-1 | 非洲绿猴SV40转化的肾细胞 |
COS-7 | 非洲绿猴SV40转化的肾细胞 |
CRFK | 猫肾细胞 |
CT26.WT | 小鼠结肠癌细胞 |
Daudi | 人淋巴瘤细胞 |
DH82 | 犬巨噬细胞(狗肾恶性组织细胞增生症细胞) |
DLD-1 | 人结肠腺癌细胞 |
DU 145 | 人前列腺癌细胞 |
EAC | 小鼠艾氏腹水癌细胞 |
Eca-109 | 人食管癌细胞 |
EL4 | 小鼠淋巴瘤细胞 |
ES-2 | 人卵巢透明细胞癌细胞 |
WB-F344 | 大鼠肝上皮样干细胞 |
F81 | 猫肾细胞 |
F9 | 小鼠畸胎瘤细胞/小鼠胚胎癌细胞 |
FaDu | 人咽鳞癌细胞 |
FRhK-4 | 恒河猴胚肾细胞 |
GBC-SD | 人胆囊癌细胞 |
GNM | 人口腔鳞癌颈淋巴结转移癌细胞 |
H4 | 人脑神经胶质瘤细胞 |
H-4-II-E | 大鼠肝细胞瘤 |
H9c2(2-1) | 大鼠胚胎心肌细胞 |
Hacat | 人永生化角质形成细胞 |
HBL-100 | 人整合SV40基因的乳腺上皮细胞 |
HBZY-1 | 大鼠肾小球系膜细胞 |
HCC1937 | 人乳腺癌细胞 |
HCC827 | 人非小细胞肺癌细胞 |
HCCC-9810 | 人肝内胆管癌细胞 |
HCT 116 | 人结肠癌细胞 |
HCT-15 | 人结肠癌细胞 |
HCT-8 | 人盲肠腺癌细胞 |
HEC-1-A | 人子宫内膜腺癌细胞 |
HEC-1-B | 人子宫内膜腺癌细胞 |
HeLa | 人宫颈癌细胞 |
Hep 3B(Hep 3B2.1-7) | 人肝癌细胞 |
Hep G2 | 人肝癌细胞 |
HEp-2 | 人喉表皮癌细胞 |
Hepa 1-6 | 小鼠肝癌细胞 |
HFL1 | 人胚肺成纤维细胞 |
HGC-27 | 人胃癌细胞(未分化) |
HIC | 人小肠癌细胞 |
HK-2 | 人肾皮质近曲小管上皮细胞 |
HL-60 | 人早幼粒急性白血病细胞 |
HL-7702(L-02) | 人肝正常细胞 |
HMy2.CIR | 人B淋巴母细胞 |
HO-8910 | 人卵巢癌细胞 |
Hs 578T | 人乳腺癌细胞 |
Hs-746T | 人胃癌细胞 |
HSC-T6 | 大鼠肝星形细胞 |
HT-1080 | 人纤维肉瘤细胞 |
HT-29 | 人结肠癌细胞 |
HuH-6 | 人肝母细胞瘤细胞 |
HuH-7 | 人肝癌细胞 |
HuT 102 | 人T淋巴瘤细胞 |
HUVEC(HUV-EC-C) | 人脐静脉血管内皮细胞 |
IBRS-2 | 猪肾细胞 |
IMR-32 | 人神经母细胞瘤细胞 |
J82 | 人膀胱移行细胞癌 |
JAR | 人胎盘绒毛膜癌细胞 |
JEG-3 | 人绒毛膜癌细胞 |
JeKo-1 | 人套细胞淋巴瘤细胞 |
Jurkat, Clone E6-1 | 人急性T淋巴细胞白血病细胞/人淋巴细胞瘤细胞 |
K-562 | 人慢性骨髓性白血病细胞 |
KB | 人口腔表皮样癌细胞 |
KG-1 | 人急性骨髓性白血病细胞 |
KLE | 人子宫内膜癌细胞 |
KU812 | 人外周血嗜碱性白血病细胞 |
L1210 | 小鼠白血病细胞 |
L6 | 大鼠成肌细胞 |
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] | 小鼠成纤维细胞 |
Lec1 | 仓鼠卵巢细胞 |
Li-7 | 人肝癌细胞 |
LLC | 小鼠肺癌细胞 |
LLC-MK2 | 恒河猴肾细胞 |
LM/TK(LMTK-) | 小鼠胸腺激酶缺陷细胞 |
Lncap clone FGC | 人前列腺癌细胞 |
LoVo | 人结肠癌细胞 |
LS 174T | 人结肠腺癌细胞 |
LTEP-a-2 | 人肺腺癌细胞 |
MA-782 | 小鼠乳腺癌细胞 |
MADB106 | 大鼠乳腺癌细胞 |
MCF-7 | 人乳腺癌细胞 |
MDA-MB-231 | 人乳腺癌细胞 |
MDA-MB-435S | 人乳腺导管癌细胞 |
MDA-MB-453 | 人乳腺癌细胞 |
MDBK(NBL-1) | 牛肾细胞 |
MDCK(NBL-2) | 犬肾细胞 |
ME-180 | 人子宫颈表皮癌细胞 |
MFC | 小鼠胃癌细胞 |
MG-63 | 人骨肉瘤细胞 |
MGC80-3 | 人胃癌细胞 |
MLTC-1 | 小鼠睾丸间质细胞瘤细胞 |
MOLT-4 | 人急性淋巴母细胞白血病细胞 |
MRC-5 | 人胚肺成纤维细胞 |
MS1 | 小鼠胰岛内皮细胞 |
MSTO-211H | 人肺癌细胞株 |
NAMALWA | 人Burkitt's淋巴瘤细胞 |
NCI-H1299 | 人非小细胞肺癌细胞 |
NCI-H1650 | 人非小细胞肺癌细胞 |
NCI-H292 | 人肺癌细胞(淋巴结转移) |
Neuro-2a[N2a] | 小鼠脑神经瘤细胞 |
NCI-N87 | 人胃癌细胞 |
NG108-15[108CC15] | 小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞 |
NIH/3T3 | 小鼠胚胎细胞 |
NR8383 | 大鼠肺泡巨噬细胞 |
NRK | 正常大鼠肾细胞 |
NRK-52E | 大鼠肾小管导管上皮细胞 |
OK | 负鼠肾小管细胞 |
OP9 | 小鼠骨髓基质细胞 |
OS-RC-2 | 人肾癌细胞 |
OVCAR-3 | 人卵巢癌细胞 |
P19 | 小鼠畸胎瘤细胞 |
P388D1 | 小鼠淋巴样瘤细胞 |
P3X63Ag8 | 小鼠骨髓瘤细胞 |
P815 | 小鼠肥大细胞瘤细胞 |
PA317 | 小鼠成纤维细胞 |
PANC-1 | 人胰腺癌细胞 |
PC-3 | 人前列腺癌细胞 |
PIEC | 猪髋动脉内皮细胞 |
PK-15 | 猪肾细胞 |
QGY-7701 | 人肝癌细胞 |
Raji | 人Burkitt's淋巴瘤细胞 |
RAW 264.7 | 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞 |
RBE | 人肝胆管癌细胞 |
RBL-2H3 | 大鼠嗜碱性细胞白血病细胞 |
RD | 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞 |
RF/6A | 猴脉络膜-视网膜内皮细胞 |
RH-35 | 大鼠肝癌细胞 |
RKO | 人结肠腺癌细胞 |
RL95-2 | 人子宫内膜癌细胞 |
RM-1 | 小鼠前列腺癌细胞 |
RSC96 | 大鼠雪旺细胞 |
RWPE-1 | 人前列腺上皮细胞 |
S-180 | 小鼠腹水瘤细胞/小鼠肉瘤细胞 |
Saos-2 | 人成骨肉瘤细胞 |
SCaBER | 人膀胱鳞癌细胞 |
Sf21 | 昆虫卵巢细胞 |
Sf9 | 昆虫卵巢细胞 |
SGC-7901 | 人胃癌细胞 |
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