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细胞培养常见问题的解答
发布时间:2020-04-23 点击量:200

                                                 细胞培养常见问题的解答

1.何时须更换培养基?

视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本资料上之更换时间,按时更换培养基即可。

2.可否使用与原先培养条件不同之培养基?

不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活。

3.如何选用特殊细胞系培养基?

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,选MEM做粘附细胞培养、 RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。 

4.培养细胞时应使用5 %或10% CO2?或根本没有影响?

一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统,而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7 g时,细胞培养时应使用10 % CO2;当培养基中NaHCO3为每公升1.5 g时,则应使用5 % CO2培养细胞。

5.冷冻管应如何解冻?

取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。

6.怎样离心回收细胞?

欲回收动物细胞,其离心速率一般为300xg (约1000rpm),5 - 10分钟,过高之转速,将造成细胞死亡。

7.细胞冷冻培养基之成份为何?

动物细胞冷冻保存时经常使用的冷冻培养基是含5 - 10 %DMSO (dimethyl sulfoxide)和90 - 95 %原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意:由于 DMSO稀释时会放出大量热能,故不可将DMSO直接加入细胞液中,必须使用前先行配制完成。

8.应如何避免细胞污染?

细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染的好方法。

9.购买之细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形?

研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少,大都是因为离心过程操作上的失误,造成细胞的物理性损伤,以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心,应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。

10.购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?

研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。 培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久。

11.什么培养基中可以省去加酚红?

酚红在培养基中用作PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用,(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。

苏州千舍生物细胞库细胞明细

293(HEK-293)人胚肾细胞
5637人膀胱癌细胞
293A 人胚肾细胞
22RV1人前列腺癌细胞
293T人胚肾细胞
3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞
4T1小鼠乳腺癌细胞
6T-CEM人T细胞白血病细胞
769-P人肾细胞腺癌细胞
786-O(786-0)人肾透明细胞癌细胞
95-D人高转移肺癌细胞
A172人脑胶质瘤细胞
A2780人卵巢癌细胞
A-375人恶性黑色素瘤细胞
A-431人表皮癌细胞
A549人非小细胞肺癌细胞
A-673人非小细胞肺癌细胞
A9小鼠皮下结缔组织细胞
AAV-293人胚肾细胞
Acc-2人涎腺腺样囊性癌细胞
ACHN人肾癌细胞
AGS人胃腺癌细胞
Ana-1小鼠巨噬细胞
Anglne人卵巢癌细胞
AR42J大鼠胰腺外分泌细胞
ARPE-19人视网膜上皮细胞
AsPC-1人转移胰腺腺癌细胞
AtT-20小鼠垂体瘤细胞
B16小鼠黑色素瘤细胞
Bcap-37人乳腺癌细胞
BEL-7402人肝癌细胞
BEL-7404人肝癌细胞
BGC-823人胃癌细胞
BHK-21仓鼠肾细胞
BIU-87人膀胱癌细胞
BRL 3A大鼠正常肝细胞
BNL CL.2小鼠胚胎肝细胞
BRL大鼠肝细胞
BS-C-1非洲绿猴肾细胞
BT-474人乳腺导管癌细胞
BT-549人乳腺管癌细胞
BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞
C127小鼠乳腺癌细胞
C2C12小鼠成肌细胞
C-33 A人子宫颈癌细胞
C4-2人前列腺癌细胞
C6大鼠脑胶质瘤细胞
Ca Ski人宫颈癌肠转移细胞/人宫颈癌上皮细胞
CA46人Burkitts淋巴瘤细胞
Caco-2人结直肠腺癌细胞
CaES-17人食管癌细胞
Caki-1人肾透明细胞癌细胞
Calu-1人肺癌细胞
Calu-3人肺腺癌细胞
Caov-3人乳突状卵巢腺癌细胞
CCD-1095Sk人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞
L2大鼠肺泡上皮细胞
CCRF-CEM人急性淋巴白血病细胞
CFPAC-1人胰腺癌细胞
CHL仓鼠肺细胞
CHO仓鼠卵巢细胞
CHO-K1仓鼠卵巢细胞亚株
CNE人鼻咽癌细胞
CoC1人卵巢癌细胞
CoC1/DDP人卵巢癌细胞CoC1顺铂耐药亚株
COLO 205人结肠癌细胞
COLO 320DM人结肠癌细胞
COS-1非洲绿猴SV40转化的肾细胞
COS-7非洲绿猴SV40转化的肾细胞
CRFK猫肾细胞
CT26.WT小鼠结肠癌细胞
Daudi人淋巴瘤细胞
DH82犬巨噬细胞(狗肾恶性组织细胞增生症细胞)
DLD-1人结肠腺癌细胞
DU 145人前列腺癌细胞
EAC 小鼠艾氏腹水癌细胞
Eca-109人食管癌细胞
EL4小鼠淋巴瘤细胞
ES-2人卵巢透明细胞癌细胞
WB-F344大鼠肝上皮样干细胞
F81猫肾细胞
F9小鼠畸胎瘤细胞/小鼠胚胎癌细胞
FaDu人咽鳞癌细胞
FRhK-4恒河猴胚肾细胞
GBC-SD人胆囊癌细胞
GNM人口腔鳞癌颈淋巴结转移癌细胞
H4人脑神经胶质瘤细胞
H-4-II-E大鼠肝细胞瘤
H9c2(2-1)大鼠胚胎心肌细胞
Hacat人永生化角质形成细胞
HBL-100人整合SV40基因的乳腺上皮细胞
HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞
HCC1937人乳腺癌细胞
HCC827人非小细胞肺癌细胞
HCCC-9810人肝内胆管癌细胞
HCT 116人结肠癌细胞
HCT-15人结肠癌细胞
HCT-8人盲肠腺癌细胞
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HEC-1-B人子宫内膜腺癌细胞
HeLa人宫颈癌细胞
Hep 3B(Hep 3B2.1-7)人肝癌细胞
Hep G2人肝癌细胞
HEp-2人喉表皮癌细胞
Hepa 1-6小鼠肝癌细胞
HFL1人胚肺成纤维细胞
HGC-27人胃癌细胞(未分化)
HIC人小肠癌细胞
HK-2人肾皮质近曲小管上皮细胞
HL-60人早幼粒急性白血病细胞
HL-7702(L-02)人肝正常细胞
HMy2.CIR人B淋巴母细胞
HO-8910人卵巢癌细胞
Hs 578T人乳腺癌细胞
Hs-746T人胃癌细胞
HSC-T6大鼠肝星形细胞
HT-1080人纤维肉瘤细胞
HT-29人结肠癌细胞
HuH-6人肝母细胞瘤细胞
HuH-7人肝癌细胞
HuT 102人T淋巴瘤细胞
HUVEC(HUV-EC-C)人脐静脉血管内皮细胞
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IMR-32人神经母细胞瘤细胞
J82人膀胱移行细胞癌
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JEG-3人绒毛膜癌细胞
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Jurkat, Clone E6-1人急性T淋巴细胞白血病细胞/人淋巴细胞瘤细胞
K-562人慢性骨髓性白血病细胞
KB人口腔表皮样癌细胞
KG-1人急性骨髓性白血病细胞
KLE人子宫内膜癌细胞
KU812人外周血嗜碱性白血病细胞
L1210小鼠白血病细胞
L6大鼠成肌细胞
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]小鼠成纤维细胞
Lec1仓鼠卵巢细胞
Li-7人肝癌细胞
LLC小鼠肺癌细胞
LLC-MK2恒河猴肾细胞
LM/TK(LMTK-)小鼠胸腺激酶缺陷细胞
Lncap clone FGC人前列腺癌细胞
LoVo人结肠癌细胞
LS 174T人结肠腺癌细胞
LTEP-a-2人肺腺癌细胞
MA-782小鼠乳腺癌细胞
MADB106大鼠乳腺癌细胞
MCF-7人乳腺癌细胞
MDA-MB-231人乳腺癌细胞
MDA-MB-435S人乳腺导管癌细胞
MDA-MB-453人乳腺癌细胞
MDBK(NBL-1)牛肾细胞
MDCK(NBL-2)犬肾细胞
ME-180人子宫颈表皮癌细胞
MFC小鼠胃癌细胞
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MGC80-3人胃癌细胞
MLTC-1小鼠睾丸间质细胞瘤细胞
MOLT-4人急性淋巴母细胞白血病细胞
MRC-5人胚肺成纤维细胞 
MS1小鼠胰岛内皮细胞
MSTO-211H人肺癌细胞株
NAMALWA人Burkitt's淋巴瘤细胞
NCI-H1299人非小细胞肺癌细胞
NCI-H1650人非小细胞肺癌细胞
NCI-H292人肺癌细胞(淋巴结转移)
Neuro-2a[N2a]小鼠脑神经瘤细胞
NCI-N87人胃癌细胞
NG108-15[108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞
NIH/3T3小鼠胚胎细胞
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
NRK正常大鼠肾细胞
NRK-52E大鼠肾小管导管上皮细胞
OK负鼠肾小管细胞
OP9小鼠骨髓基质细胞
OS-RC-2人肾癌细胞
OVCAR-3人卵巢癌细胞
P19小鼠畸胎瘤细胞
P388D1小鼠淋巴样瘤细胞
P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞
P815小鼠肥大细胞瘤细胞
PA317小鼠成纤维细胞
PANC-1人胰腺癌细胞
PC-3人前列腺癌细胞
PIEC猪髋动脉内皮细胞 
PK-15猪肾细胞
QGY-7701人肝癌细胞
Raji人Burkitt's淋巴瘤细胞
RAW 264.7小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
RBE人肝胆管癌细胞
RBL-2H3大鼠嗜碱性细胞白血病细胞
RD人恶性胚胎横纹肌瘤细胞
RF/6A猴脉络膜-视网膜内皮细胞
RH-35大鼠肝癌细胞
RKO人结肠腺癌细胞
RL95-2人子宫内膜癌细胞
RM-1小鼠前列腺癌细胞
RSC96大鼠雪旺细胞
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