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Gibco MEM液体培养基(C11095500BT)

Gibco MEM液体培养基(C11095500BT)

产品型号: C11095500BT

所属分类:Hyclone培养基

产品时间:2020-05-14

简要描述:Gibco MEM液体培养基(C11095500BT)

产品名称:MEM液体培养基

货号:C11095500BT

规格:500ml

保存温度:2-8度

苏州千舍批发供应hyclone液体培养基,Gibco胎牛血清,无外泌体血清,Gibco液体培养基,SERANA胎牛血清

详细说明:

Gibco MEM液体培养基C11095500BT

产品名称:MEM液体培养基

货号:C11095500BT

规格:500ml

保存温度:2-8度

苏州千舍批发供应hyclone液体培养基,Gibco胎牛血清,无外泌体血清,Gibco液体培养基SERANA胎牛血清

苏州千舍生物对液体培养基常见问题总结:

1. 液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?

  要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。

  2. 液体培养基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。

  几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ?C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ?C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中,其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色,-24?C保存。

  3.液体培养用液pH对细胞生长的影响

  由于,大多数细胞适宜pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。

  但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。

  4.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?

  不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力zui强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为:

  (1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;

  (2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。

  (3)0.25% 胰蛋白酶

  溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。

  多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。

  Gibco MEM液体培养基C11095500BT购买苏州千舍细胞注意事项:

  一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;

  收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。

  二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:

  1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。

  2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:

  1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;

  2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;

  3) 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。

  三、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

  注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。

  四、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?

  (1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;

  (2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;

  (3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;

  (4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;

 (5)视具体情况而定。

  五、细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?

  (1)客户造成细胞污染,不重发;

  (2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;

  (3)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;

  (4)细胞培养时经其它处理的,不重发;

  (5)细胞收到2天内,未告知,不重发;

  (6)视具体情况而定。

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Gibco液体培养基, MEM液体培养基,货号:C11095500BT

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Gibco各款血清:10099-141澳洲、16000-044北美、10270-106南美,10437-028墨西哥10091-148新西兰胎牛血清

Hyclone各款血清:30084.03澳洲、30087.02南美、sv30087.03乌拉圭

小牛血清,BI胎牛血清(04-001-1ACS、04-002-1A、04-400-1A

★SIGMA血清(F2442),PAN(ST30-3302、ST30-2602)

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Gibco培养基:C11995500BT(DMEM高糖)、C10010500BT(PBS)、C11875500BT(1640)

Hyclone培养基:SH30021.01、SH300243.01、SH30265.01、SH30256.01 

公司常备现货:lipo2000(0.75ml)11668-027、(1.5ml)11668-019
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