细胞培养过程中为什么会产生小黑点？

细胞培养过程中为什么会产生小黑点？

1、生产工艺 在细胞培养过程中加入胎牛血清出现了小黑点，并且随着培养过程小黑点越来越多，这与胎牛血清的生产工艺有很大关系。目前胎牛血清的生产主要有两种工艺：① 自然凝聚生产获得血清，该生产控制要求严格，自然凝集的胎牛血几乎不会出现小黑点。② 离心生产血清，该工艺可能会导致小黑点的产生。

2、细胞老化在细胞的表面出现小黑点，表明细胞老化，在细胞间隙间出现的小黑点，说明细胞营养不足导致细胞碎片化，需要更换细胞或者更换等级更高的血清。

3、实验污染细胞培养中出现的小黑点也有可能是因为出现了污染。当有小黑点形成后判断是细胞污染还是细胞碎片，首先通过在镜下观察小黑点运动状态，很多会动的小黑点只是发生布朗运动的细胞碎片，而细菌在运动上则较为活跃和浮躁。然后判断培养基的浑浊程度，如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。

如何避免胎牛沉淀出现及培养基中小黑点的生成？

采用正确的解冻方法1、2℃~8℃解冻；2、解冻的过程中间断摇匀（隔一段时间轻柔摇匀）；3、室温或者水浴溶解均易造成沉淀增多。

正确使用和保存

1、非必须不用热灭活（热灭活会使血清中部分蛋白质变性析出，影响血清品质）；2、不宜37℃预热，血清和培养基通常室温预热即可；3、避免反复冻融；4、避免紫外线照射；5、避免2-8℃长期保存，分装后-