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无外泌体血清的灭活处理步骤如下
发布时间:2022-10-19 点击量:347
  无外泌体血清不包含各种由蛋白质编码和调节的RNA,包括mRNA、miRNA、rRNA和snoRNA。它们中的大部分(>70%)仍然存在于通过长时间超速离心获得的无囊泡FBS中,这些FBS常用于研究细胞外囊泡(EV)和细胞间通讯。FBS相关的RNA将与细胞外囊泡RNA(exrna)一起被分离,这将干扰下游的RNA分析。因此,在实验设计过程中,有必要采取预防措施,减少FBS源RNA的干扰。
  
  1、内毒素含量低,经过三次纳米过滤。
  
  2、严格控制批次差异。
  
  3、可靠和可追溯的来源。
  
  4、每个批次都应提供相应的检验检疫报告。
  
  5、适用于各种特殊的细胞培养。
  
  6、对于干冰运输,建议储存温度为-20℃至-10℃。
  
 

无外泌体血清
 

 

  无外泌体血清是指直径为30-100纳米的盘状囊泡,其中含有多种蛋白质、mRNA、非编码RNA和其他分子。外泌体主要来自细胞内的多囊体,多囊体的外膜与细胞膜融合后释放到细胞外基质中。目前,大量文献报道,几乎所有类型的细胞都能产生和释放外泌体。在不同的生物液体(血液、尿液、脑脊液、唾液、牛奶、腹水)中发现大量的外泌体。不含外泌体的血清被细胞分泌和释放后,通过个别体液在体内扩散。被靶细胞摄取后,释放内部生物分子,参与细胞间交流,调节细胞功能。血清的灭活处理步骤如下。
  
  1、选用与血清瓶规格相同的对照瓶。
  
  2、在对照瓶中放入与血清体积相等的水。
  
  3、温度预检。在对照瓶中插入2-3支选定的温度计(以保证试验温度的准确性),放入水浴箱中,接通电源,调节温控旋钮,保持水浴箱中指示的温度为56℃。
  
  4、将无外泌体血清灭活血瓶和带温度计的对照瓶放入水浴箱,待温度计指示的温度升至56℃时,等待30分钟。
  
  5、大瓶游离外分泌血清灭活后,重新进行包装。
  
  6、储存:分包装后,取无外分泌体血清样品进行无菌试验,在-20~-70℃下储存。
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