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如何挑选合适的elisa试剂盒?
更新时间:2022-05-11 点击量:597

如何挑选合适的elisa试剂盒?



1、查找待测样本的蛋白浓度

  可以通过NCBI的文献,给出的蛋白表达量参考值来比较elisa试剂盒给出的样本值与报道值是否一致。


2、试剂盒的应用种属、检测样本的种类

  除试剂盒特别说明外,一般不同种属不能通用。常见待测样本种类有:血清和血浆(不同抗凝剂),细胞上清,和细胞裂解液,试剂盒中不同样本的稀释液不混用。


3•.检测范围:

  立线性范围需测定9-11个浓度水平,每个浓度水平重复测定3-4次。

•验证标称线性参数:需测定4-6个浓度水平,每个浓度水平重复测定3-4次。

•所有样本应在一次运行中或几次间隔很短的运行中随机测定,最好在一天之内完成。


4、试剂盒的其它指标

a. 灵敏度:

•示例:人IL-13的低可检测浓度为0.1 pg/ml(6 次独立实验的平均值)。10 个零标准品浓度 OD 的平均值加上两倍SD,计算低可检测浓度。

•注意:灵敏度跟检测范围低点不相等。

b.•稳定性(重复性、精密性)

  •酶标板内精密度3 个已知浓度的样本酶标板内重复测定 20 次,评估酶标 板内的精密度。酶标板间精密度 3 个已知浓度的样本酶标板间重复检测 6 次,评估酶标板间的精密度。

  •试剂盒一般板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% (统计学概念)