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新品推荐:10099-141C(澳洲)
发布时间:2020-06-16 点击量:63

新品推荐:10099-141C(澳洲)

品名:澳洲胎牛血清

货号:10099-141C

规格:500ml

产地:澳洲

品牌:Gibco

备注:干冰运输,少量现货,毕业季,促销中.......

助力科研,进口胎牛血清大促销,科研用户购血清有豪礼......

目前,市场上存在着不同等级的FBS。由于FBS关乎细胞活力和实验重复性等重要的参数,故在质量方面是绝对不能含糊的。若质量不稳定,则有可能导致实验失败。科罗拉多大学的癌症生物学家Matthew Sikora就比较倒霉,因为连续几批血清没有通过初步筛查,他的实验室已经停滞了几个月。

“仅从人力和耗材上考虑,失败的实验已经浪费了超过4.5万美元。我们认为,血清的变化也许能解释我们为什么无法获得一致的结果,”Sikora博士说。“研究人员若不测试他们的血清,也会陷入麻烦,付出昂贵的代价。”那么,研究人员在评估FBS的质量时,需要考虑哪些标准呢?

可追溯性

对于科学家而言,大的风险也许是FBS的纯度大打折扣,这可能导致细胞培养实验的效果不佳。许多FBS的卖家与多个产地签订短期供应协议来采集原材料,以便降低成本。他们将这些产品混合,稀释不同来源的影响。然而,终结果就是质量不稳定,产品供应和价格出现波动。

针对这一问题,国际血清行业协会(ISIA)实施了供应链可追溯性的行业标准,这对确保FBS各个批次的质量、安全性和重复性起了关键作用。一些公司提供化学分析,说明原产国的统计概率。也许好的方法是追溯到动物,以确保产品的来源。

FBS的供应商是否在整个供应链中都保留原产地的可追溯记录?他们是否持有文件,支持各个阶段的处理、运输和商业交易?他们能否展示独特来源的可追溯性,以确保重复性和低病毒风险?在考虑购买FBS时,这都是你需要考虑的问题。

不知你是否听说过,地域性风险评估(GBR)是定性评估一个国家或地区的动物感染疾病(如疯牛病)的可能性。这种方法依赖世界动物卫生组织(OIE)的监控系统,将每个国家或地区的疯牛病风险进行分类。OIE评估各个国家的兽医服务、疾病诊断能力、觉察症状能力及其他因素,以避免疯牛病的传播。

新西兰和澳大利亚都获得了GBR 1级,这意味着它们目前是没有疯牛病和口蹄疫的。这两个国家都是出了名的病毒风险低的国家。由于环境受到保护,以及严格的农业法规和入境要求,再加上它们都是岛国,动物们不太可能受到其他地区疾病的影响。这对于那些敏感的细胞系和实验而言特别有用。对科学家来说,好处是花在重复实验或检验新批次上的时间将大大减少。

因此选择正确的,靠谱的胎牛血清及厂家极其重要↓↓↓↓

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千舍生物---优质胎牛血清的供应商,我们不生产血清,只是优质胎牛血清的搬运工!涉及品牌诸多,品质保真可靠,其中Gibco10099-141C、gibco10091-148、gibco 10270-106、gibco16000-044、Hyclone SV30087.03、Hyclone SH30071.03、Hyclone SH30070.03、Hyclone sh30160.03、BI 04-001-1acs 、gemini 900-108、gemini 100-500、gemini 100-512等、康宁 35-076-CV、SIGMA F2442等……常备现货!另有科研用人AB血清、超低Igg血清、透析型胎牛血清、活性炭处理胎牛血清等!

如何成为细胞培养大神?

问世间谁人无忧,唯神仙逍遥自在。

 

作为一名终日泡在实验室的实验君,

 

如何在细胞实验中无所不能,超脱轮回

 

做到一个人人羡慕的细胞大神呢?

 

且看向这里,成为细胞大神的六个细节。

 

1. 过滤体系

  自从出现瓶装培养基之后,培养基过滤的需求就减少了。有些时候,一些特定细胞培养支持物的添加可能会引入一些新的污染。另外,一般认为,当液体长时间接触瓶口外的空气后好重新过滤;所以一般不建议 管/瓶 对 管/瓶 的倾倒。这时,很多人会选择Millipore的滤嘴配合针筒进行再过滤。结果发现,完成500 ml培养基过滤后,手疼腰酸!过滤杯的出现完美的解决了这个问题,所以,大体积尽量使用过滤杯吧,可靠且轻松,快捷。

2. 培养基的选择

关于血清质量,业界流行的澳洲来源 > 北美来源 >南美来源的说法。这一点从价格上也可见一斑。实际情况是优质血清的市场现实是供不应求,所以很多时候大家就将就了之。如果有好的选择,尽量使用澳洲来源的血清。

对于培养基而言,情况显然是供大于求的,而且品牌甚多:Sigma,Gibco,Hyclone以及各种国产培养基等,当然一些国外厂商基于竞争及成本的考虑也推出了本土化的培养基。一些人认为培养基能用就行,反正细胞就在那里长着,也没出现大规模的伤亡就忽视了培养基的重要性。但是,实验是对完美的追求,多处将就会导致结果的将就,得不偿失!从细胞培养的实际表现(活力,增殖周期,状态等)看,原装进口培养基 > 进口分装培养基 > 大部分国产培养基。所以,别再将就培养基了!

3. 支原体检测

  支原体污染和细胞培养机会形影不离,堪称细胞培养的恶梦。前些年有报道说全球超过60%的实验室的细胞存在细胞污染的现象。从早期表现看,支原体污染会让你感觉不到,可能仅仅是细胞增速有些减缓;于是还是快乐的做的实验,结果实验数据不是很理想。事实是,支原体污染会影响细胞代谢,改变细胞功能等。

  药典检测支原体是培养法,时间以周记,这显然不符合科研”快”的需求。PCR法应运而生,Sigma的LookOut Mycoplasma PCR Detection Kit,扩增的是支原体基因组上16S核糖体RNA基因。此区域高度保守,因此可检测多达19种支原体。但是PCR后的电泳也是一件麻烦的事情,qPCR就是解决方案:LookOut Mycoplasma qPCR Detection Kit。

4. 胰酶的使用

胰酶适合大部多数细胞的消化:HEK293,CHO,HeLa等,而这类细胞我们往往将他定义为“糙”。当然,细胞本身肯定是不糙的,同样相当金贵。只不过这些细胞对胰酶的耐受性好,一定浓度下的胰酶对细胞状态影响不大。

有些细胞就非常金贵了,堪称“娇嫩”,比如:干细胞/">干细胞等,就不太适合利用胰酶进行消化。另外,如果消化组织进而分离细胞时使用胰酶也是值得小心的。一个好的解决方案是寻找一些温和的替代品:Accutase、Accumax或EZ-LIFT。这些消化剂剂大的特点是可替代胰酶,消化后无需用血清失活。尤其是EZ-LiFT™干细胞/">干细胞传代试剂,这是一种无酶、化学成分限定的干细胞解离试剂,只选择性传代未分化的多能干细胞,避免人工进行群落筛选或细胞刮铲的步骤,不需要使用ROCK抑制剂即可产生高细胞活性,还可以拯救高度分化的ips细胞培养物。

5. 细胞计数

细胞计数是细胞培养的日常。血球计数器、载破片、盖玻片的组合折磨的每一个技术者的眼睛及耐心。所幸的是,一些公司根据血球计数的原理开发出了自动的计数仪,插入装有细胞的盖玻片即可。事实上,基于血球计数原理的另外一个问题是计数的准确性。一般认为CV可能在20%以上,这就非常糟糕了,打算加入10000个细胞,很可能计入了15000个细胞,这是绝对不能接受的。

另外一个计数方法是基于库尔特原理---类似与流式的方法,将细胞挨个数一遍。看到这个,可能想得是:这么大的一起,这么麻烦怎么做日常计数?Merck的做法是将这个设备小型化了:Sceptor,整体和一把1 ml移液枪类似。15秒内完成细胞技术且CV小于5%。

细胞计数器Sceptor及其数据呈现形式

6. 细胞冻存

细胞传代过程中涉及细胞冻存。这么说其实是很有歧义的,严格意义上说获得细胞系完成检测后一件事就是大批量冻存细胞,而后开始进行该细胞相关实验。常规来说,一株细胞的使用周期不宜过长,这样能排除反复传代过程中细胞生物学特性的改变。所以,很多时候他人惠赠的细胞系可能会存在传代过多的问题,一个好的方案是从ATCC或ECACC(欧洲细胞库)购买细胞,这些平台的细胞背景干净,传代次数少。

DMSO是常用的细胞冻存保护剂,市面上品牌众多,质量参差不齐。如果使用劣质DMSO冻存细胞,可能从实验的一步开始就已经出了细胞品质不好的问题。推荐使用Sigma的DMSO,较多细胞冻存验证的;或者直接使用其DMSO无血清细胞冻存培养基,确保细胞赢在起跑线。

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