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苏州千舍生物教你如何查询细胞资料和培养基相关知识
发布时间:2020-03-10 点击量:282

苏州千舍生物教你如何查询细胞资料和培养基相关知识

培养基是细胞培养中不可缺少的营养成分,但是最基础的培养基却给实验者带来了一系列的问题。

别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。

1.怎样查到一个特定细胞株的相关知识和培养条件?

ATCC(American Type Culture Collection)收集了绝大多数细胞的详细资料。打开ATCC网页的Cells and hybridomas链接,输入细胞名称就可以搜索ATCC的细胞数据库。数据库中有每一种细胞的详细描述,包括细胞的来源,培养和冻存条件,以及相关文献等资料。或者在链接web.expasy.org/cellosaurus/ 中输入细胞代号查询相关资料。

2.如何选用特殊细胞系培养基?

培养某类型细胞没有固定的培养条件。MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样容易生长。总之,shou 选MEM、DMEM做贴壁细胞培养;RPMI1640做悬浮细胞培养;各种目的无血清培养shou 选AIMV培养基SFM。新的细胞培养时要详查资料。

3.自己新配制的液体培养基能保存多久?

我们建议将新配制的培养基放置于4℃,避光保存尽量在一周内使用完毕。培养基越新鲜越好。

4.培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗?

一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在一到两周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

5.培养基中是否须添加抗生素?

除了特殊筛选系统外,一般正常培养状态下,培养基中不应添加任何抗生素。

为防止细菌、真菌污染,可以加入青霉素-链霉素双抗溶液,其培养基中的终浓度为青霉素100U/ml,链霉素为100ug/ml。

6.液体培养基可以放-20℃保存吗?

不可以!因为在-20℃下,培养基中的盐容易析出,培养基融化后,有的盐可能无法重新溶解,从而导致培养基渗透压降低,培养细胞时,细胞容易破裂而死亡。

7.为何培养基保存于4℃冰箱中,颜色会偏暗红色,且pH值越来越偏碱性?

培养基保存于4℃冰箱中, 培养基内之CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果, 将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时, 可以通入无菌过滤之CO2, 以调整pH 值。

8.为什么你公司液体培养基1640颜色发黄,是pH值不对吗?

不是。因为配方原因,1640为碱酚红型,其中酚红的浓度只有DMEM的四分之一,所以是因为酚红浓度低,而非PH值低。

9.培养液pH是怎样影响细胞生长的?

由于大多数细胞适宜PH值为7.2-7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对PH值要求也不完全相同,原代细胞培养一般对PH值变动耐受差,无限细胞系耐受力强。 但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更有利于细胞的生长。因此,配制培养用液时可把液体的PH值稍微调的偏酸一些。液体在经过0.1um或0.2um滤膜过滤时,PH值会向上浮动0.2左右。

10.培养液渗透压是怎样影响细胞生长的?

当细胞内、外环境的分子浓度不同时就会产生渗透压。这种情况下,水分通过渗透流入或流出细胞,从而改变细胞的内环境。高渗透压迫使水分从细胞中扩散出来导致细胞收缩,这种情况会使DNA和蛋白遭到破坏,细胞周期停滞以及最终使细胞死亡;反之,低渗透压使水分流入细胞内,使细胞肿胀破裂。

11.为什么有客户要求培养基中不含酚红?

研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,细胞培养,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加酚红的培养基。

12.酚红的作用是什么?

酚红在培养基中被用来作为PH值指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。

13.你公司干粉培养基里含NaHCO3吗?

所有的干粉培养基中都不含NaHCO3 。请依据说明书或包装袋上的标注,在干粉培养基完全溶解后添加NaHCO3 。

 

14.NaHCO3的作用是什么?

与CO2一起形成缓冲系统,保持培养基PH值稳定。

15.我们实验室培养箱CO2浓度一直以来都是5%,这样可以吗?

当然不可以,不同的培养基要求添加NaHCO3的量不一样,如DMEM要求添加3.7g/L,为了保持PH值稳定,必须用高浓度的CO2平衡,一般不低于8%,而1640等要求添加NaHCO3 2.2g/L,还有些培养基要求添加更少,那么这些培养基就要求较低的浓度平衡,一般是5%。

16.培养基中丙酮酸钠的作用是什么?

丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。

丙酮酸钠的贮存液浓度一般为50mM,-20℃保存,培养基中的终浓度为1mM.

17.谷氨酰胺的作用是什么?

几乎所有的细胞对谷氨酰胺都有较高的要求。谷氨酰胺脱掉氨基后,可作为培养细胞的能量来源,参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。

谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20℃冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。

18.可否使用与原先培养条件不同的培养基?

不能!!每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同的培养基,细胞大多无法立即适应,造成细胞无法存活。

我司主要经营产品是国内传代细胞和细胞培养相关的生物试剂。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI无外泌体血清等高品质血清。常规液体培养基、胰酶、双抗、无血清冻存液、日本三菱产品、ELISA 试剂盒等产品。售后完善,我们以饱满的热情欢迎新老客户选购!

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MCF7/Taxol人乳腺癌紫杉醇耐药株

HCT8/5-fu 人回肠直肠腺癌细胞五氟尿嘧啶耐药株

LOVO/5-FU 人结肠癌细胞五氟尿嘧啶耐药株

HCT116/L人结肠癌奥沙利铂耐药细胞

HL60/ADR人早幼粒急性白血病细胞耐阿霉素株

PC9GR(PC9R)人肺癌细胞耐吉非替尼

LOVO/ADR人结肠癌细胞阿霉素耐药株

HNE1/DDP人鼻咽癌细胞顺铂耐药株

SGC7901/5-fu人胃癌细胞五氟尿嘧啶耐药株

A549/DDP人肺癌细胞顺铂耐药株

MCF-7/DDP人乳腺癌细胞顺铂耐药株

A549/ADR人肺癌细胞阿霉素耐药株

SGC7901/DDP人胃癌细胞顺铂耐药株

SKOV3/DDP人卵巢癌细胞顺铂耐药株

HELA/DDP人宫颈癌耐顺铂细胞株

3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞

NIH/3T3小鼠胚胎细胞

Raw264.7小鼠单核巨噬白血病细胞

B16-F10小鼠黑色素瘤高转细胞

B16 小鼠黑色素瘤细胞

CT26.WT小鼠结肠癌细胞

SV40 MES 13小鼠肾小球系膜细胞

F9 小鼠畸胎瘤细胞

MLE-12 小鼠肺泡上皮细胞

Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤细胞

BV2 小鼠小胶质细胞  

DC2.4小鼠树突状细胞

U14 小鼠子宫颈癌细胞

M-NFS-60小鼠骨髓性白血病细胞

mMSC小鼠骨髓间充质干细胞

HL-1小鼠心肌细胞

TM3 小鼠睾丸间质细胞

k7m2.wt小鼠骨肉瘤成骨细胞

mc3t3 e1小鼠胚胎成骨细胞前体细胞

hepa1-6 小鼠肝癌细胞

SP2/0小鼠骨髓瘤细胞

HT22小鼠海马神经元细胞系

MC38小鼠结肠癌细胞

mpc5小鼠足细胞

4T1 小鼠乳腺癌细胞

ANA-1小鼠巨噬细胞

TM4 小鼠睾丸支持细胞

STO 小鼠胚胎成纤维细胞

bend.3 小鼠脑微血管内皮细胞

J774A.1小鼠单核巨噬细胞

H9C2 大鼠心肌细胞

PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化)

PC-12(高分化) 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化)

AR42J 大鼠胰腺外分泌细胞

IEC-6 大鼠小肠引窝上皮细胞

RT4-D6P2T 大鼠神经鞘瘤细胞

INS-1 大鼠胰岛细胞瘤细胞

NRK-52E 大鼠肾小管导管上皮细胞

BHK-21 仓鼠肾成纤维细胞

PK-15 猪肾细胞

Duckembyro 鸭胚胎成纤维细胞

vero 绿猴肾细胞

Hep3B人肝癌细胞

HPAC人胰腺癌细胞

HT-1376 人膀胱癌细胞

JAR 人胎盘绒毛癌细胞

KNS-89 人脑胶质细胞瘤细胞

LN229 人胶质瘤细胞

LNCaP clone FGC 人前列腺癌细胞

MDA-KB2 人乳腺细胞

MDA-MB-361 人乳腺癌细胞

MET-5A 人膜间皮细胞

MGC-803 人胃癌细胞

NCI-H1650 人肺支气管癌细胞

RT4 人膀胱移行细胞乳头瘤

SK-N-MC 人神经上皮瘤细胞

SK-N-SH 人神经母细胞瘤细胞

SW982 人滑膜肉瘤细胞

T98G 人胶质母细胞瘤

U251MG(KO) 人类星形胶质细胞瘤细胞

U266 人骨髓瘤细胞

VCAP 人前列腺癌细胞

hTERT-HPNE 人胰腺导管细胞

ES-2 人卵巢透明细胞癌细胞

NCI-H1650人非小细胞肺癌细胞

H460 人大细胞肺癌细胞

HACAT 人永生化角质形成细胞

HCT116 人结肠癌细胞

HEK293 人胚肾细胞

HEPG2 人肝癌细胞

HGC27 人胃癌细胞(未分化)

HT-29 人结肠癌细胞

HUVEC 人脐静脉内皮细胞

KYSE150人食道癌细胞

L02(HL7702)人正常肝细胞  

LOVO 人结肠癌细胞

MCF-10A人正常乳腺上皮细胞

MCF7人乳腺癌细胞

LX-2 人肝星状细胞

MDA-MB-468人乳腺癌细胞

Hyclone胎牛血清Sv30087.01

Hyclone胎牛血清Sv30087.02

Hyclone胎牛血清SH30084.03

Hyclone胎牛血清 SH30406.02

Hyclone胎牛血清 SH30406.05

Hyclone胎牛血清 SH30396.03

Hyclone胎牛血清 SH30070.03

Hyclone特级胎牛血清 SH30070.03E

Hyclone胎牛血清 SH30370.03

活性炭/葡聚糖胎牛血清 SH30068.03

活性炭/葡聚糖处理胎牛血清,热灭活 SH30068.03HI

马血清SH30074.03

乌拉圭胎牛血清 SV30087. 03

Hyclone胎牛血清SH30071.03

Hyclone胎牛血清SV30160.03

胎牛血清FBS SFBS

新生牛血清 SNCS

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101

PAA 优等胎牛血清FBS A15-151

BI优等胎牛血清 04-001-1ACS

BI ES级别胎牛血清 04-002-1A

BI 间充质胎牛血清 04-400-1A

Corning胎牛血清 35-076-CV

PAN胎牛血清FBS P30-3302

PAN胎牛血清FBS ST30-3302

PAN ES级别胎牛血清 ST30-2602

PAN胎牛血清Plus ST30-3302P

NTC优等胎牛血清 SFBE

Gemini优等胎牛血清 900-108

Gemini特级胎牛血清 100-500

Gemini科研用人AB血清100-512

TCB胎牛血清 101ZC

Sigma 特级胎牛血清 F2442

Sigma正常人AB血清 H4522

SBI 无外泌体血清 EXO-FBS-50A-1

胎牛血清10270-106、10099-141、10091-148、10099-133、10100-147、16010159、A31608-02、16050-122、30067334、10437-028等胎牛血清

双抗 15140-122、SV30010

胰酶 25200-056、SH30042.01

GIBCO 胰酶 25200-072

DMEM高糖培养基 C11995500BT

DMEM低糖培养基 C11885500BT

PBS C10010500BT

1640培养基 C11875500BT

DMEM/F12 C11330500BT

MEM培养基 C11095500BT

α-MEM C12571500BT

DMEM低糖 SH30021.01

DMEM高糖 SH30022.01、SH30243.01

DMEM/F-12 1:1 SH30023.01

MEM/EBSS SH30024.01

PBS缓冲液 SH30256.01

α-MEM SH30265.01

RPMI-1640 SH30809.01

DPBS SH30028.02

 

 

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